為了探究變鉛青鏈霉菌dndA基因轉錄調控機制,本研究利用LC-MS分析了野生型變鉛青鏈霉菌1326和dndB基因同框缺失菌株HXY2的DNA硫修飾豐度差異。通過半定量RT-PCR比較dndA基因在1326與HXY2中的表達差異。用兒茶酚2, 3-雙加氧酶活力檢測實驗和對dndA啟動子區(qū)域進行刪除或突變來確定負責dndA基因表達調控的順式作用元件。研究發(fā)現(xiàn),HXY2的DNA硫修飾豐度高于1326,dndA基因在HXY2中的表達高于1326。兒茶酚2,3-雙加氧酶活力檢測實驗顯示,刪除或突變r重復序列能使1326的dndA啟動子活力明顯升高。突變r重復序列后,HXY2的dndA啟動子活力沒有明顯變化。結果顯示,DndB蛋白抑制dndA基因轉錄進而下調DNA硫修飾豐度,以及DndB蛋白通過結合到r重復序列而抑制dndA基因轉錄。這是首次對dndA基因的轉錄調控機制進行研究,并且本研究進一步豐富了DndB蛋白的調控機理。 

【文章來源】：基因組學與應用生物學. 2020,39(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

刪除-10區(qū)對dnd A啟動子活力影響

刪除r重復序列對dndA啟動子活力影響

本研究發(fā)現(xiàn)，變鉛青鏈霉菌dndA基因轉錄具有對數(shù)生長早期高、對數(shù)晚期低的特點；之前報道的變鉛青鏈霉菌dndB、dndC、dndD和dndE基因的轉錄也具有這樣的特點(Dai et al.,2016)。在沙門氏菌中，dndB、dndC、dndD和dndE基因的轉錄在dndB基因缺失菌株中具有對數(shù)早期高、對數(shù)晚期低的特點，但在野生型菌株中，其轉錄與生長時期無關，說明沙門氏菌dndB基因參與了dndB、dndC、dndD和dndE基因依賴于生長時期的轉錄的復雜調控(Cheng et al.,2015)。而變鉛青鏈霉菌dndA基因轉錄在1326與HXY2中都具有對數(shù)生長早期高、對數(shù)晚期低的特點，這說明變鉛青鏈霉菌dndA基因轉錄依賴于生長時期的現(xiàn)象與DndB蛋白無關，而是由另外的蛋白負責調控。圖5 敲除dnd B基因與突變r重復序列對dnd A啟動子活力影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]過表達調控基因rapG提高雷帕霉素的產量[J]. 徐冬梅,郭會燦,武曉莉,茍麗霞,于海軍.  基因組學與應用生物學. 2018(09)



本文編號：3231383