目的研究人間充質干細胞（hMSCs）來源的外泌體對單核細胞增殖和分泌炎性因子的影響,初步探討外泌體的免疫調節(jié)功能。方法離心法培養(yǎng)hMSCs,收集培養(yǎng)的hMSCs上清液,利用試劑盒提取外泌體,電鏡下觀察其結構,Western blot檢測其CD63和CD81的表達水平。密度梯度離心法分離外周血單核細胞,在培養(yǎng)的單核細胞中加入外泌體,MTT法檢測單核細胞的增殖情況,流式細胞儀檢測其凋亡情況,ELISA法檢測上清液中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）及白介素-8（IL-8）的分泌量。結果 hMSCs來源的外泌體在透射電鏡下呈小球狀,Western blot顯示外泌體CD63和CD81表達陽性。MTT檢測顯示,在LPS的刺激下,單核細胞增殖增加;加入外泌體后單核細胞的增殖受到抑制。流式細胞儀檢測結果表明外泌體具有促進單核細胞凋亡的作用。ELISA檢測結果表明,外泌體能夠抑制炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8的分泌。結論 h MSCs來源的exosmes能夠抑制單核細胞的增殖并促進其凋亡,同時抑制了單核細胞分泌炎性因子TNF-α、I... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學學報. 2020,55(07)北大核心

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外泌體的鑒定

在LPS的刺激下,單核細胞增殖增加,生長曲線呈典型的“S”型;而加入外泌體后單核細胞的增殖受到抑制。終濃度為1 mg/L 的外泌體對單核細胞增殖的抑制作用不明顯;終濃度為10、50和100 mg/L的外泌體均能抑制單核細胞的增殖,隨著濃度的增加,抑制作用明顯,顯示劑量依賴性,差異有統(tǒng)計學意義。見圖2。2.3 外泌體對單核細胞凋亡的影響

hMSCs來源的外泌體具有促進單核細胞凋亡的作用,實驗組(圖3A)的早期凋亡率(B4:13.8%)、晚期凋亡率(B2:9.5%)以及總凋亡率(B2+B4:23.3%)均高于對照組(圖3B)。圖4 ELISA檢測外泌體對單核細胞分泌炎性因子的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]采用高速離心及ExoQuick-TC法提取小鼠骨髓間充質干細胞來源外泌體比較及鑒定[J]. 韓金秀,李宏遠,撒亞蓮,嚴丹,賀繼剛.  安徽醫(yī)科大學學報. 2017(04)
[2]MicroRNA-29a在脂多糖誘導人單核細胞凋亡中的作用和機制[J]. 熊旭明,張振輝,江子欣,陳偉燕,楊其霖,劉衛(wèi)江.  中華急診醫(yī)學雜志. 2013 (01)



本文編號：3116970