發(fā)布時間：2021-03-08 21:38

　　基因瞬時表達是植物中研究目標基因功能的常用手段。在模式植物擬南芥（Arabidopsis thaliana）中,相比原生質體和農(nóng)桿菌介導的基因異源表達技術,利用粒子轟擊進行基因瞬時表達一直鮮有報道。其主要原因是擬南芥葉型相對較小、基因槍操作相對煩瑣以及基因表達效率差異較大。該研究通過優(yōu)化雙管基因槍系統(tǒng),在營養(yǎng)生長旺盛的擬南芥蓮座葉中實現(xiàn)GFP和GUS基因高效表達。同時,通過GUS報告基因明確了壞死誘導因子BAX、Avh238和ATR13/Rpp13激發(fā)擬南芥細胞壞死的表型。但在本氏煙（Nicotianabenthamiana）中明顯誘導細胞壞死的Avrblb1/RB基因對,在擬南芥中卻喪失了誘導細胞壞死的活性。由于雙管基因槍系統(tǒng)每次轟擊時設置平行對照,可有效降低轉化實驗中的樣本變異度,為擬南芥及其突變體研究中準確評價基因功能和高通量篩選目標基因提供新的技術參考。 

【文章來源】：植物學報. 2020,55(02)北大核心

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 質粒材料
    1.2 方法
        1.2.1 基因槍微粒子彈制備及雙孔槍頭的組裝和轟擊參數(shù)設置
        1.2.2 轟擊轉化
        1.2.3 報告基因的檢測與觀察
        1.2.4 雙管基因槍轉化結果統(tǒng)計分析
        1.2.5 本氏煙中農(nóng)桿菌介導的基因瞬時表達
        1.2.6 轉基因擬南芥的制備與檢測
2 結果與討論
    2.1 擬南芥中雙管基因槍介導報告基因的瞬時表達
    2.2 雙管基因槍可有效降低樣本的變異度
    2.3 擬南芥葉片中應用雙管基因槍介導瞬時表達測定效應基因功能
    2.4 討論



本文編號：3071712