本文中我們采用激光共聚焦光學(xué)構(gòu)型和振鏡掃描模式,通過優(yōu)化光學(xué)構(gòu)型和元件配置,構(gòu)建了一套細胞掃描成像-熒光互相關(guān)光譜聯(lián)用系統(tǒng)。該系統(tǒng)具有高分辨活細胞成像和原位分析功能,能夠用于活細胞內(nèi)生物分子濃度的測定以及生物分子擴散行為、酶的活性和分子相互作用的研究。進而,我們構(gòu)建了穩(wěn)定表達p53-EGFP和MDMX-mCherry的細胞模型,將構(gòu)建的系統(tǒng)用于活細胞核內(nèi)p53-MDMX蛋白相互作用的研究。 

【文章來源】：分析科學(xué)學(xué)報. 2020,36(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

數(shù)據(jù)采集與控制系統(tǒng)

圖3為系統(tǒng)軟件界面截圖,軟件系統(tǒng)設(shè)置了多個模塊來實現(xiàn)其主要功能:激光控制模塊區(qū)可以實現(xiàn)激光開關(guān)(Laser 1和Laser 2)和光強設(shè)置(Laser power);三維掃描控制模塊區(qū)可實現(xiàn)二維掃描(Scanning)、三維定位(X、Y step,Z step);FCS模塊區(qū)可實現(xiàn)分析通道選擇(Channels)、FCS工作模式選擇(Mode:auto和cross)、采樣時間設(shè)置(Sampling time)及數(shù)據(jù)保存(Save)等功能;工作模式中auto模式為自相關(guān)光譜,cross模式為互相關(guān)光譜。此外,能實時顯示熒光強度變化(Intensity A/B)及運行時間(Elapsed time)。如圖3所示,顯示器能夠顯示細胞圖像、熒光強度軌跡及熒光相關(guān)光譜曲線等信息。圖4 穩(wěn)定表達p53-EGFP和MDMX-mCherry的活細胞共聚焦掃描成像分析圖(Z位置)

穩(wěn)定表達p53-EGFP和MDMX-mCherry的活細胞共聚焦掃描成像分析圖(Z位置)


本文編號：3061774