東亞三角渦蟲(chóng)DjPLCβ4基因克隆及在胚胎發(fā)育中的組織特異性表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-02-24 06:27
磷脂酶C的β亞型(PLCβ)在突觸傳遞和可塑性的調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。東亞三角渦蟲(chóng)Dugesia japonica作為首次出現(xiàn)三胚層的兩側(cè)對(duì)稱動(dòng)物,是研究發(fā)育和進(jìn)化的重要模式生物。為了研究DjPLCβ4基因在東亞三角渦蟲(chóng)胚胎發(fā)育不同階段的表達(dá),通過(guò)RT-PCR和RACE技術(shù)克隆并驗(yàn)證了DjPLCβ4 cDNA的功能與表達(dá)圖譜。結(jié)果顯示,DjPLCβ4基因全長(zhǎng)3 245 bp,編碼969個(gè)氨基酸。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)顯示,東亞三角渦蟲(chóng)與其他物種的PLCβ4亞型聚群,并位于兩側(cè)對(duì)稱動(dòng)物的基部,可能是PLCβ4的原始類(lèi)型。通過(guò)整體原位雜交技術(shù)研究DjPLCβ4基因在胚胎中的時(shí)空表達(dá),DjPLCβ4基因最開(kāi)始表達(dá)于胚胎發(fā)育的第3階段,陽(yáng)性信號(hào)主要位于胚胎咽及胚帶;隨著發(fā)育,胚胎孵化出幼蟲(chóng),DjPLCβ4基因主要表達(dá)于神經(jīng)原基和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。綜上所述,東亞三角渦蟲(chóng)DjPLCβ4基因參與胚胎神經(jīng)原基的形成和分化。
【文章來(lái)源】:四川動(dòng)物. 2020,39(03)北大核心
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 引物設(shè)計(jì)與PCR擴(kuò)增
1.3 通過(guò)RACE技術(shù)獲得PLCβ4全長(zhǎng)
1.4 生物信息學(xué)分析
1.5 DIG-Labeling RNA探針合成
1.6 原位雜交
2 結(jié)果
2.1 基因克隆
2.2 生物信息學(xué)分析
2.3 原位雜交
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]東亞三角渦蟲(chóng)DjWnt5a克隆及在胚胎不同發(fā)育階段中的表達(dá)[J]. 甄輝,吳素格,鹿晴晴,趙博生. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]中國(guó)的淡水(三腸目)渦蟲(chóng)[J]. 劉德增. 動(dòng)物學(xué)雜志. 1989(06)
本文編號(hào):3048938
【文章來(lái)源】:四川動(dòng)物. 2020,39(03)北大核心
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.2 引物設(shè)計(jì)與PCR擴(kuò)增
1.3 通過(guò)RACE技術(shù)獲得PLCβ4全長(zhǎng)
1.4 生物信息學(xué)分析
1.5 DIG-Labeling RNA探針合成
1.6 原位雜交
2 結(jié)果
2.1 基因克隆
2.2 生物信息學(xué)分析
2.3 原位雜交
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]東亞三角渦蟲(chóng)DjWnt5a克隆及在胚胎不同發(fā)育階段中的表達(dá)[J]. 甄輝,吳素格,鹿晴晴,趙博生. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]中國(guó)的淡水(三腸目)渦蟲(chóng)[J]. 劉德增. 動(dòng)物學(xué)雜志. 1989(06)
本文編號(hào):3048938
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