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馬鈴薯StCRK1和StCRK2亞細胞定位及其互作蛋白的初步篩選

發(fā)布時間:2021-02-20 18:32
  馬鈴薯是世界第三大主糧作物之一,但其在培育過程中極易受到各種病害的影響,導致產(chǎn)量和品質(zhì)降低。因此研究馬鈴薯自身的防御機制,對控制馬鈴薯病害具有重要的理論和實踐意義。類受體激酶(receptor-likekinases,RLK)作為保守的上游信號分子,可調(diào)節(jié)植物發(fā)育和脅迫適應等生物過程。富含半胱氨酸的類受體激酶(cysteine-rich receptor-like kinase,CRK)是一類重要的 RLK,在植物的抗病性和細胞死亡中起重要作用。本研究克隆了馬鈴薯StCR1和StRK2無終止密碼子的CDS序列,利用Gateway系統(tǒng)中的LR反應構(gòu)建了馬鈴薯StCRK1/2-GFP表達載體,將表達載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101通過浸染本氏煙草葉片進行瞬時表達,發(fā)現(xiàn)馬鈴薯StCRK1和StCRK2均定位在質(zhì)膜上;同時克隆了StCRK和和StCK2中包含近膜和激酶結(jié)構(gòu)域的序列,構(gòu)建了用于酵母雙雜交的誘餌載體;并構(gòu)建了致病疫霉(Phytophthora infestans)誘導下的馬鈴薯cDNA文庫。利用酵母雙雜交技術(shù)篩選與StCRK1和StCRK2相互作用的蛋白,經(jīng)過初步篩選,共獲得了 32個與... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

馬鈴薯StCRK1和StCRK2亞細胞定位及其互作蛋白的初步篩選


圖1典型的CRFCs結(jié)構(gòu)示意圖??

馬鈴薯StCRK1和StCRK2亞細胞定位及其互作蛋白的初步篩選


圖3?5VC7?A://2cDNA目的片段擴增結(jié)果??Fig.?3?Amplification?of?StCRKl/2?cDNA??

馬鈴薯StCRK1和StCRK2亞細胞定位及其互作蛋白的初步篩選


圖4?StCRKl/2-Tl菌落PCR鑒定??Fig.?4?colony?PCR?identification?for?StCRKl/2-Tl??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略的意義與實施[J]. 龐文淥.  糧食加工. 2019(02)
[2]農(nóng)業(yè)部召開馬鈴薯主食產(chǎn)品及產(chǎn)業(yè)開發(fā)國際研討會[J].   農(nóng)業(yè)工程技術(shù). 2015(23)
[3]酵母雙雜交系統(tǒng)及其應用研究進展[J]. 崔紅軍,魏玉清.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2015(13)
[4]酵母雙雜交技術(shù)及應用的研究進展[J]. 鄭立雙,李向楠,孫城濤,劉紅羽,劉勛,賀明,呂文發(fā).  中國畜牧獸醫(yī). 2013(09)
[5]植物蛋白激酶研究進展[J]. 張春寶,趙麗梅,趙洪錕,董英山.  生物技術(shù)通報. 2011(10)
[6]水稻水通道蛋白OsPIP2-6的亞細胞定位研究[J]. 姚清國,李曉芹,李小兵,韓愛云.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2011(17)
[7]玉米醇溶蛋白γ-zein基因載體構(gòu)建及亞細胞定位[J]. 張玉,白史且,李聰,李達旭,鄧永昌,王涌鑫.  分子植物育種. 2011(02)
[8]轉(zhuǎn)抗菌肽基因提高馬鈴薯對青枯病的抗性[J]. 賈士榮,屈賢銘,馮蘭香,唐惕,唐益雄,劉坤,趙艷麗,白永延,蔡敏鶯.  中國農(nóng)業(yè)科學. 1998(03)

博士論文
[1]擬南芥類受體激酶RIPK與FERONIA共響應RALF信號的遺傳與生化分析[D]. 杜長青.湖南大學 2016

碩士論文
[1]利用酵母雙雜交技術(shù)篩選與馬鈴薯StNAC262互作的功能基因[D]. 張莉.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2018
[2]類受體蛋白激酶在水稻抽穗期的表達及作用機制研究[D]. 李穎秀.山東師范大學 2018
[3]水稻類受體蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)響應重金屬鎘脅迫的功能解析[D]. 葉瑤瑤.中國計量大學 2017
[4]黃萎病菌誘導下海島棉全長cDNA文庫分析及功能基因克隆[D]. 丁澤國.河北農(nóng)業(yè)大學 2014
[5]水稻類受體蛋白激酶OsRLK399的功能研究[D]. 秦正睿.吉林大學 2012



本文編號:3043171

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