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急性髓系白血病患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老相關(guān)基因的生物信息學(xué)分析及驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間:2021-01-02 08:51
  目的:通過(guò)生物信息學(xué)方法篩選急性髓系白血。ˋML)患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)衰老相關(guān)的差異表達(dá)基因并予以驗(yàn)證,為AML的科研和臨床提供新的分子標(biāo)志物。方法:應(yīng)用血液病醫(yī)院AML患者BMMSC制作基因表達(dá)譜芯片并參考從NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)GEO中選取的芯片GSE84881,綜合地進(jìn)行數(shù)據(jù)分析并篩選差異表達(dá)基因。運(yùn)用DAVID分析軟件進(jìn)行基因本體論(GO)富集分析和KEGG通路富集分析,篩選出與AML患者BM-MSC衰老相關(guān)的差異表達(dá)基因。收集病人及健康供者的骨髓樣本,體外擴(kuò)增MSC并應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)衰老相關(guān)基因表達(dá)水平與芯片的一致性,輔以衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶染色實(shí)驗(yàn)和MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)對(duì)AML患者BM-MSC表型和功能進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:篩選出247個(gè)差異表達(dá)基因,其中有132個(gè)基因表達(dá)上調(diào),115個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。側(cè)重分析6個(gè)衰老相關(guān)基因,包括表達(dá)上調(diào)基因COL3A1(P=0.025)、CRYAB(P=0.0003)、DCN(P=0.0368)以及表達(dá)下調(diào)基因CCL2(P=0.0256)、CTSC(P=0.0001)、IL6(P=0.0482)。RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,上述... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2019年02期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)

【文章目錄】:
材料和方法
    試劑與儀器
    基因芯片樣本
    細(xì)胞實(shí)驗(yàn)樣本
    基因芯片的分析和差異表達(dá)基因的篩選
    衰老相關(guān)差異表達(dá)基因的RT-PCR檢測(cè)
    衰老表型的衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶 (senescenceassociatedβ-Galactosidase, SA-β-Gal) 的染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
    AML患者BM-MSC增殖能力的MTT檢測(cè)
    統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    基因芯片分析結(jié)果
    差異表達(dá)基因的GO分析、KEGG分析以及衰老相關(guān)基因的篩選
    RT-PCR檢測(cè)結(jié)果
    細(xì)胞增殖能力的MTT檢測(cè)結(jié)果
討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞在造血調(diào)控中的作用[J]. 霍思維,張毅.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2006(01)



本文編號(hào):2953053

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