藍藻細胞分裂關鍵蛋白FtsZ的性質(zhì)及其調(diào)控
發(fā)布時間:2020-12-18 06:06
FtsZ是第一個被鑒定出來的定位在原核細胞分裂隔膜處的蛋白,是真核生物中微管蛋白的同源類似物。FtsZ非常保守,幾乎發(fā)現(xiàn)于所有的原核生物中,作為主要的細胞骨架蛋白,在細胞分裂中起著關鍵的作用。大腸桿菌(Escherichia coli)等細菌FtsZ已在體外廣泛研究。大腸桿菌的FtsZ(EcFtsZ)裝配成長度為30-50個亞基的單線狀原絲纖維,具有很高的GTP水解活性。組裝,水解和解聚的循環(huán)使得FtsZ原絲纖維在體內(nèi)和體外都具有高度動態(tài)性。這些原絲纖維在體內(nèi)與其它十幾種輔助蛋白一起,形成了高度動態(tài)的收縮環(huán)(Z環(huán))。收縮環(huán)是細菌細胞分裂器的主要部分,在細菌分裂的末期,收縮環(huán)收縮使細菌分為兩個細胞。藍藻是最簡單最原始的單細胞原核生物,含有葉綠素a,是可以進行產(chǎn)氧光合作用的最古老的生物體。在形態(tài)上,藍細菌具有革蘭氏陰性細菌的外膜特征,但藍細菌中細胞分裂的調(diào)控系統(tǒng)具有與革蘭氏陽性菌相同的特異性成分,而植物葉綠體又起源于內(nèi)共生的古生藍藻,因此研究藍細菌細胞分裂系統(tǒng)與細菌和葉綠體的相似之處和差異,將為揭示細菌分裂的機理和進化提供新的見解。在這里,我們研究了單細胞聚球藻Synechocystis ...
【文章來源】:西北大學陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 細胞骨架蛋白FtsZ
1.1.1 FtsZ亞基和原絲結(jié)構(gòu)
1.1.2 FtsZ組裝的生化特性
1.1.3 FtsZ在進化上的親緣關系
1.2 細胞分裂的關鍵細胞器——Z環(huán)
1.2.1 Z環(huán)與細胞膜的結(jié)合
1.2.2 分裂體的形成
1.2.3 通過彎曲原絲產(chǎn)生收縮力的證據(jù)
1.3 細胞分裂的負調(diào)控系統(tǒng)
1.3.1 NO系統(tǒng)
1.3.2 SOS系統(tǒng)
1.3.3 Min系統(tǒng)
1.4 本課題的研究目的及意義
第二章 實驗材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗儀器
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 培養(yǎng)基及緩沖液的配方
2.1.4 菌株及質(zhì)粒
2.2 實驗方法
2.2.1 目的基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建
2.2.2 目的蛋白的提取和純化
2.2.3 定點突變
2.2.4 蛋白性質(zhì)測定
第三章 實驗結(jié)果
3.1 藍藻FtsZ聚合的動力學特征
3.1.1 SyFtsZ蛋白的表達與純化
3.1.2 藍藻FtsZ聚合的動力學特征
3.1.3 不同pH下緩沖液中SyFtsZ的不同組裝特性
3.1.4 SyFtsZ的高度彎曲結(jié)構(gòu)
3.2 SyFtsZ上影響束狀結(jié)構(gòu)形成的關鍵位點的研究
3.2.1 突變體質(zhì)粒的構(gòu)建及蛋白純化
3.2.2 pH7.5 時野生型與突變型SyFtsZ聚合動力學的比較
3.2.3 pH7.2 時野生型與突變型SyFtsZ聚合動力學的比較
3.2.4 突變體SyFtsZ-TS GTP酶活的變化
3.2.5 EcFtsZ突變體的生化特性
3.3 藍藻Min蛋白聚合的動力學
3.3.1 細菌MinCDE共聚物的組裝
3.3.2 藍藻MinCDE共聚物的組裝
第四章 討論與總結(jié)
4.1 藍細菌的特點
4.2 比較分析藍細菌FtsZ的生化特性
4.3 FtsZ弱的動態(tài)活性增加穩(wěn)定性
4.4 負調(diào)控Min系統(tǒng)蛋白的組裝特性
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的科研成果
致謝
本文編號:2923499
【文章來源】:西北大學陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:80 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
1.1 細胞骨架蛋白FtsZ
1.1.1 FtsZ亞基和原絲結(jié)構(gòu)
1.1.2 FtsZ組裝的生化特性
1.1.3 FtsZ在進化上的親緣關系
1.2 細胞分裂的關鍵細胞器——Z環(huán)
1.2.1 Z環(huán)與細胞膜的結(jié)合
1.2.2 分裂體的形成
1.2.3 通過彎曲原絲產(chǎn)生收縮力的證據(jù)
1.3 細胞分裂的負調(diào)控系統(tǒng)
1.3.1 NO系統(tǒng)
1.3.2 SOS系統(tǒng)
1.3.3 Min系統(tǒng)
1.4 本課題的研究目的及意義
第二章 實驗材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗儀器
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 培養(yǎng)基及緩沖液的配方
2.1.4 菌株及質(zhì)粒
2.2 實驗方法
2.2.1 目的基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建
2.2.2 目的蛋白的提取和純化
2.2.3 定點突變
2.2.4 蛋白性質(zhì)測定
第三章 實驗結(jié)果
3.1 藍藻FtsZ聚合的動力學特征
3.1.1 SyFtsZ蛋白的表達與純化
3.1.2 藍藻FtsZ聚合的動力學特征
3.1.3 不同pH下緩沖液中SyFtsZ的不同組裝特性
3.1.4 SyFtsZ的高度彎曲結(jié)構(gòu)
3.2 SyFtsZ上影響束狀結(jié)構(gòu)形成的關鍵位點的研究
3.2.1 突變體質(zhì)粒的構(gòu)建及蛋白純化
3.2.2 pH7.5 時野生型與突變型SyFtsZ聚合動力學的比較
3.2.3 pH7.2 時野生型與突變型SyFtsZ聚合動力學的比較
3.2.4 突變體SyFtsZ-TS GTP酶活的變化
3.2.5 EcFtsZ突變體的生化特性
3.3 藍藻Min蛋白聚合的動力學
3.3.1 細菌MinCDE共聚物的組裝
3.3.2 藍藻MinCDE共聚物的組裝
第四章 討論與總結(jié)
4.1 藍細菌的特點
4.2 比較分析藍細菌FtsZ的生化特性
4.3 FtsZ弱的動態(tài)活性增加穩(wěn)定性
4.4 負調(diào)控Min系統(tǒng)蛋白的組裝特性
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的科研成果
致謝
本文編號:2923499
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