黃曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是由黃曲霉、寄生曲霉和特曲霉等曲霉屬真菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物,是對人類健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展危害程度排在第一位的真菌毒素。生物降解黃曲霉毒素方法具有高效性、安全性、環(huán)境友好性等一系列優(yōu)勢,成為近年來研究人員關(guān)注的熱點(diǎn)。為探尋可用于實(shí)際生產(chǎn)的黃曲霉毒素生物脫毒劑,本研究選擇一株短黃桿菌3J2MO,對其降解黃曲霉毒素的能力進(jìn)行研究:1.研究探明短黃桿菌3J2MO具降解多種黃曲霉毒素的能力。將菌株3J2MO與系列濃度的不同種類黃曲霉毒素及其前體雜色曲霉毒素混合培養(yǎng)5 d,測定并計(jì)算毒素降解率。結(jié)果顯示,在菌株3J2MO處理下,黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1和雜色曲霉毒素均發(fā)生了降解,每毫升菌液對五種黃曲霉毒素的降解量均可達(dá)500 ng以上,研究及文獻(xiàn)比對結(jié)果表明,短黃桿菌3J2MO是目前能高效降解黃曲霉毒素種類最多的菌株,為農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素污染減控提供了新的材料。2.研究明確了短黃桿菌3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產(chǎn)物發(fā)酵液的安全性。通過小鼠急性腹腔注射致病性試驗(yàn),測定了菌株3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產(chǎn)物發(fā)酵液的致病性,結(jié)果顯示二者無致病性;通過大鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)測定二者的急性經(jīng)口毒性,結(jié)果表明二者急性經(jīng)口毒性屬微毒級別;通過大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)測定菌株3J2MO及其降解黃曲霉毒素B1產(chǎn)物發(fā)酵液的急性經(jīng)皮毒性,結(jié)果顯示二者急性經(jīng)皮毒性水平屬低毒級別。研究結(jié)果表明,短黃桿菌3J2MO降解農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素具有高效、安全的特點(diǎn),具有重要開發(fā)價(jià)值。3.研究建立了花生粕中黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO固態(tài)發(fā)酵法安全降解技術(shù)。通過單因素研究,探明菌液培養(yǎng)時(shí)間、樣品培養(yǎng)時(shí)間、菌液接種量三個(gè)因素是菌株3J2MO降解花生粕中黃曲霉毒素的主要影響因素。通過響應(yīng)面試驗(yàn)分析法,最終確定花生粕中黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO固態(tài)發(fā)酵法安全降解技術(shù),即菌液培養(yǎng)時(shí)間29.04 h,樣品培養(yǎng)時(shí)間78.72 h,菌液接種量4.12 mL(菌濃度為2.39*10~9 cfu/mL)。應(yīng)用建立的黃曲霉毒素短黃桿菌3J2MO安全降解技術(shù),花生粕中黃曲霉毒素降解率可達(dá)71.95%。本研究為農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素污染減控提供了高效、安全的新方法。4.測定了短黃桿菌3J2MO全基因組序列并探尋候選降解酶。對菌株3I2MO進(jìn)行全基因組測序并組裝,測序結(jié)果表明該菌株基因組由一條環(huán)化的染色體組成,沒有質(zhì)粒,基因組大小約3.99Mbp,對功能基因進(jìn)行注釋并分析,初步定位了一種可能的黃曲霉毒素降解酶,為降解機(jī)理的揭示提供了科學(xué)依據(jù)。本文研究結(jié)果表明,短黃桿菌3J2MO為開發(fā)農(nóng)產(chǎn)品黃曲霉毒素脫毒劑提供了新途徑。
【學(xué)位單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TS201.3
【部分圖文】：

解率隨時(shí)間和毒素含量變化的趨勢 為例，研究短黃桿菌 3J2MO 降解黃曲霉毒素效率隨時(shí)間和毒素含量FB1 標(biāo)準(zhǔn)溶液與供試菌株短黃桿菌 3J2MO 發(fā)酵液于 10 mL LB 液體終質(zhì)量濃度設(shè)置為 50、100、200、500、1000 ng/mL，菌液終濃度為（28oC，200 r/min）中培養(yǎng)，分別于第 0、6、12、24、48、72、96、，其余條件同 2.3.2.1。分析rosoft Excel 2010 和 SAS 9.2 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果以均值和標(biāo)準(zhǔn)差差分析法和 Duncan 多重比較法對均值進(jìn)行分析比較，當(dāng) P<0.05，認(rèn)、b、c、d 來表示不同的顯著性水平。本章研究中以實(shí)驗(yàn)室保存的一得大腸桿菌對黃曲霉毒素的降解率范圍是-0.4%~0.96%。菌 3J2MO 降解毒素的種類范圍研究菌 3J2MO 對 AFB1 降解能力的探究

碩士學(xué)位論文 第二章 短黃桿菌3J2MO對不同種類黃曲霉毒素及雜色曲霉素黃桿菌 3J2MO 對黃曲霉毒素 B1 的作用效果，將菌株發(fā)酵液與黃曲培養(yǎng)基中混合后置于恒溫?fù)u床中（28oC，200 r/min）共培養(yǎng)（初始毒素濃度為 100 ng/mL），5 d 后測得黃曲霉毒素 B1 含量變?yōu)?6.18 ng1 含量具有顯著性差異，降解率高達(dá) 93.82%，足以證明該菌株具有菌 3J2MO 對 AFB2 降解能力的探究

圖 2.2AFB2 降解前后毒素含量變化Figure 2.2 Changes of AFB2 concentration before and after degradation黃桿菌 3J2MO 對黃曲霉毒素 B2 的作用效果，將菌株發(fā)酵液與黃曲 LB 培養(yǎng)基中混合后置于恒溫?fù)u床中（28oC，200 r/min）共培養(yǎng)（初始素濃度為 100 ng/mL），5 d 后黃曲霉毒素 B2 含量發(fā)生了顯著變化，變以應(yīng)用于黃曲霉毒素 B2 的降解，且降解效率達(dá)到 90%以上。菌 3J2MO 對 AFG1 降解能力的探究
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本文編號：2840797