【摘要】：在哺乳動物早期肝臟和胰腺的形成過程中,兩者由同一內(nèi)胚層的前體細胞發(fā)育而來,且在一定的條件刺激下可以實現(xiàn)轉(zhuǎn)分化。在肝臟損傷中有檢測到膽管周圍的細胞表達lgr5,lgr5陽性的細胞會大量增殖分化為肝細胞和膽管細胞來補充受損傷的肝臟細胞,起到修復損傷的作用,而在成體肝臟中未檢測出lgr5的表達,胰腺亦如此。同時決定胰腺發(fā)育的pdxl基因和胰島素基因Insulin在成體的表達也局限于胰島細胞,其他胰腺細胞均未見有表達。lgr5、pdx1Insulin三種基因在成體肝臟和胰腺中的表達研究已經(jīng)有許多報道,但是關于這三種基因在肝臟和胰腺的世系表達特征還未見研究報道。因此本試驗利用cre-loxp系統(tǒng)和轉(zhuǎn)基因小鼠,通過特異性啟動子lgr5、pdx1和Insulin啟動的cre重組酶體系,經(jīng)藥物誘導、冰凍切片及免疫染色探討lgr5、pdx1及Insulin在肝膽胰的世系特征。研究結(jié)果顯示,Insulin基因在成體小鼠胰腺的胰島細胞中有表達,胰腺的腺泡細胞和胰腺導管細胞中未檢測到表達,在肝臟中的肝實質(zhì)細胞、肝導管細胞和膽導管細胞也未檢測到表達;pdx1基因在成體小鼠肝實質(zhì)細胞、肝導管細胞和膽管細胞中都有表達,在胰腺的腺泡細胞、胰島細胞和導管細胞也檢測到有表達;lgr基因在成體小鼠肝臟的肝實質(zhì)細胞、肝導管細胞和膽導管細胞未檢測到表達,在胰腺中的腺泡細胞、胰島細胞和導管細胞也未檢測到有表達,不具有世系特征。上述研究結(jié)果闡明了lgr5、pdx1和Insulin基因在肝臟和胰腺發(fā)育中的世系表達特征,為肝臟和胰腺發(fā)育中相關功能基因的研究奠定了基礎。
【圖文】：

圖２－１邋ＰＣＲ結(jié)果逡逑

Ｆｉｇｕｒｅ邋２－３邋ｅｒｅ邋ｃｏｄｉｎｇ邋ａｒｅａ邋ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ邋ｒｅｓｕｌｔｓ逡逑２．３．２小鼠肝臟和胰腺實質(zhì)以及導管免疫染色結(jié)果逡逑２．３．２．１小鼠肝、胰腺實質(zhì)細胞免疫染色結(jié)果逡逑利用／ｒａｗ／／＞？－ｃｒｅ－ＯＴ７／ｗ？Ｇ小鼠鑒定肝膽胰世系特征，表達或表達過／ｍｗ／／／？基因的細逡逑胞呈現(xiàn)ＧＦＰ陽性。小鼠胰腺胰島細胞免疫染色結(jié)果顯示，胰島細胞特異性胰島素基因逡逑（／ｍ７／／ｚ＿／７）表達于胰腺胰島細胞中，／ｍｗ／ｈ陽性胰島細胞有ＧＴ７／＊表達，／ｔｗｗ／／＞？蛋白和逡逑ＧＦ／＾蛋白共定位于胰腺胰島細胞中，即胰腺胰島細胞表達／ｒａｗ／／＞？（圖２－４，１１－４）；肝實逡逑質(zhì)細胞免疫染色結(jié)果顯示，肝細胞特異性表達白蛋白基因（ａ／Ｚｍｗｂ，邋ＪＺ５）廣泛表達逡逑于肝細胞的細胞質(zhì)中，陽性肝細胞未檢測到ＧＦ７５的表達，陽性肝細胞和ＧＦＰ逡逑陽性細胞不存在共染的情況，，即肝細胞中不表達／ｍｗ／ｈ邋（圖２－４，邋Ｌ１－４）；胰腺組織免疫逡逑染色結(jié)果顯示，腺泡細胞淀粉酶基因（Ａｗ＿ｙ／ｍｅ）特異性表達于腺泡細胞的細胞質(zhì)中，逡逑ｊｗｊ／ｏａ陽性細胞不表達ＧＦＰ，ｄｗｙｏｓｅ陽性腺泡細胞和ＧＦＰ陽性細胞不存在共染的情逡逑況，即腺泡細胞中不表達／似ｗ／／？邋（圖２－４，Ａ１邋－４邋）。逡逑
【學位授予單位】：東北林業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：Q344

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本文編號：2638541