近年來(lái),隨著海產(chǎn)品加工業(yè)的蓬勃發(fā)展,產(chǎn)生了大量的副產(chǎn)品,這些副產(chǎn)品要么被丟棄,要么僅僅用作動(dòng)物飼料或肥料。因此,迫切需要利用這些副產(chǎn)品生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品。海洋資源生物活性肽具有許多生理功能,包括抗氧化、抗腫瘤、抗菌、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制、護(hù)肝和促傷口愈合等活性。此外,加工廢棄物中的魚(yú)皮、魚(yú)骨、魚(yú)鱗等中含有豐富的膠原蛋白。因此,從海產(chǎn)品加工廢棄物中提取膠原蛋白或生物活性肽可為其高值化利用提供新的途徑,從而減少環(huán)境污染,并創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟(jì)效益。本實(shí)驗(yàn)以日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮為原料,提取膠原蛋白并測(cè)定其理化特性和功能特性,為其在化妝品添加劑或生物材料的應(yīng)用中奠定基礎(chǔ)。此外,利用日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮制備膠原蛋白肽,測(cè)定其理化特性和功能特性,為其促傷口愈合奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)的主要研究結(jié)果如下:(1)利用單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)對(duì)日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮酶溶性膠原蛋白(PSC)的酶解條件進(jìn)行優(yōu)化,經(jīng)過(guò)回歸擬合得到加酶量、料液比和酶解時(shí)間的二次多項(xiàng)回歸方程為:提取率=83.73+3.53X₁+1.47X₂+1.78X₃-0.11X₁X

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 膠原蛋白的類型
    1.2 膠原蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
    1.3 膠原蛋白的提取方法
    1.4 膠原蛋白的理化性質(zhì)
        1.4.1 膠原蛋白的氨基酸組成
        1.4.2 膠原蛋白的熱穩(wěn)定性
        1.4.3 膠原蛋白其它理化性質(zhì)
    1.5 膠原蛋白的應(yīng)用
        1.5.1 膠原蛋白在食品中的應(yīng)用
        1.5.2 膠原蛋白在化妝品中的應(yīng)用
        1.5.3 膠原蛋白在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
    1.6 海洋膠原蛋白肽的制備方法
    1.7 海洋膠原蛋白肽的生物活性
        1.7.1 抗衰老性
        1.7.2 抗氧化活性
        1.7.3 抗菌活性
        1.7.4 促傷口愈合性
    1.8 本研究的目的和意義
第二章 日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮酶溶性膠原蛋白提取工藝條件的優(yōu)化
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 儀器與設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮預(yù)處理
        2.2.2 酶法提取日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮膠原蛋白
        2.2.3 單因素試驗(yàn)
        2.2.4 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.5 膠原蛋白含量的測(cè)定
        2.2.6 統(tǒng)計(jì)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定結(jié)果
        2.3.2 日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮中羥脯氨酸含量的測(cè)定結(jié)果
        2.3.3 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.4 響應(yīng)面對(duì)PSC提取條件的優(yōu)化結(jié)果
    2.4 結(jié)論
第三章 日本黃姑魚(yú)魚(yú)皮酸溶性膠原蛋白和酶溶性膠原蛋白的理化特性研究
    3.1 材料
        3.1.1 細(xì)胞與樣品
        3.1.2 藥物與試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 酸法提取ASC
        3.2.3 氨基酸分析
        3.2.4 熱變性溫度的測(cè)定
        3.2.5 SDS-PAGE分析
        3.2.6 傅里葉紅外光譜分析
        3.2.7 電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析
        3.2.8 水合性質(zhì)測(cè)定
        3.2.9 細(xì)胞毒性檢測(cè)(MTT法)
        3.2.10 細(xì)胞致敏性分析(乳酸脫氫酶(LDH)釋放法)
        3.2.11 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)
        3.2.12 統(tǒng)計(jì)方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 ASC和 PSC提取率結(jié)果
        3.3.2 氨基酸組成結(jié)果
        3.3.3 熱變性溫度測(cè)定結(jié)果
        3.3.4 SDS-PAGE分析結(jié)果
        3.3.5 紅外光譜分析結(jié)果
        3.3.6 電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析結(jié)果
        3.3.7 PSC的吸濕保濕性質(zhì)測(cè)定結(jié)果
        3.3.8 PSC對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞NIH-3T3 毒性分析結(jié)果
        3.3.9 PSC對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞NIH-3T3 過(guò)敏性分析結(jié)果
        3.3.10 形態(tài)學(xué)分析結(jié)果
    3.4 結(jié)論
第四章 膠原蛋白肽的制備及其功能活性評(píng)價(jià)
    4.1 材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 藥物與試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 方法
        4.2.1 MCPs的制備
        4.2.2 MCPs的分子量測(cè)定
        4.2.3 MCPs的氨基酸組成測(cè)定
        4.2.4 抗氧化活性評(píng)價(jià)
        4.2.5 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        4.2.7 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)情況
        4.2.8 統(tǒng)計(jì)方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 酶種篩選結(jié)果
        4.3.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.3 MCPs的分子量分布測(cè)定結(jié)果
        4.3.4 MCPs的氨基酸組成測(cè)定結(jié)果
        4.3.5 MCPs的抗氧化活性測(cè)定
        4.3.6 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.7 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.8 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)結(jié)果
    4.4 結(jié)論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果



本文編號(hào)：3855688