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脫氧雪腐鐮刀菌烯醇臭氧降解過程細胞毒性評價及產物分析

發(fā)布時間:2023-05-06 03:42
  近年來,真菌毒素污染問題日益嚴重,對糧食安全產生了嚴重的影響。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON))作為全球排名第二的高度富集真菌毒素,是導致真菌毒素污染的主要源頭之一,已被世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構列為3類致癌物,因此迫切需要尋找一種方法來有效控制DON的危害。臭氧作為一種強氧化性物質,能夠有效降解穩(wěn)定性較強的DON,已經引起了研究者們的廣泛關注,但關于臭氧降解DON過程中產物的毒性變化機制尚不清晰。本論文通過將模擬加標體系與實際陽性樣本相結合,研究臭氧降解DON過程的動力學及其降解效果,并結合敏感細胞模型快速識別降解過程中的毒性變化,借助質譜手段鑒定出毒性相關的中間產物。最后運用細胞代謝組學方法從細胞代謝水平研究了臭氧降解DON過程中的毒性變化機制。鑒于臭氧體系降解反應的隨機性,本論文通過將糧食樣本加標的模擬體系與實際陽性污染樣本相結合,研究了臭氧水降解DON過程的動力學及其降解效果。結果表明:低溫和酸性條件有利于高濃度臭氧水溶液的生成,因而優(yōu)化后續(xù)降解條件為4°C,pH 3.0;擬合得到臭氧水降解DON過程的一級和二級動力學曲線R2分...

【文章頁數】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 緒論
    1.1 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇
        1.1.1 DON概述
        1.1.2 DON污染現狀
        1.1.3 DON毒性危害及限量標準
    1.2 DON消減方法研究進展及應用現狀
        1.2.1 物理法
        1.2.2 生物法
        1.2.3 化學法
    1.3 臭氧降解真菌毒素研究進展
        1.3.1 干法臭氧降解
        1.3.2 濕法臭氧降解
        1.3.3 臭氧降解機制
        1.3.4 臭氧降解真菌毒素存在的問題
    1.4 細胞代謝組學在體外細胞毒性評價中的應用
    1.5 立題背景與意義
    1.6 主要研究內容
第二章 不同基質中DON臭氧降解動力學分析及降解效果研究
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 設備和儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 臭氧降解反應過程
        2.3.2 臭氧濃度優(yōu)化
        2.3.3 臭氧降解DON過程動力學研究
        2.3.4 糧食樣品加標模擬體系研究臭氧降解效果
        2.3.5 實際陽性污染樣品研究臭氧降解效果
        2.3.6 數據統計分析
    2.4 結果與討論
        2.4.1 臭氧濃度優(yōu)化
        2.4.2 臭氧降解DON過程動力學研究
        2.4.3 糧食樣品加標模擬體系臭氧降解效果研究
        2.4.4 實際陽性污染樣品臭氧降解效果研究
    2.5 本章小結
第三章 臭氧降解DON過程細胞毒性評價及中間產物研究
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 設備和儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 敏感細胞系的篩選
        3.3.2 敏感細胞系ROS檢測
        3.3.3 敏感細胞系凋亡狀態(tài)檢測
        3.3.4 臭氧降解DON過程中間產物測定
        3.3.5 臭氧降解DON過程中間產物變化趨勢研究
        3.3.6 數據處理及分析
    3.4 結果與討論
        3.4.1 敏感細胞系的篩選
        3.4.2 臭氧降解前后DON對細胞活性的影響
        3.4.3 臭氧降解前后DON對細胞ROS產生的影響
        3.4.4 臭氧降解前后DON對細胞凋亡的影響
        3.4.5 臭氧降解DON中間產物變化趨勢分析
        3.4.6 臭氧降解DON中間產物測定
        3.4.7 臭氧降解DON降解途徑分析
    3.5 本章小結
第四章 基于代謝組學研究臭氧降解DON過程的毒性變化機制
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 設備和儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 實驗分組
        4.3.2 細胞代謝物前處理
        4.3.3 GC-TOFMS分析
        4.3.4 多變量分析
    4.4 結果與討論
        4.4.1 代謝物譜的多元統計分析
        4.4.2 顯著性代謝物篩選
        4.4.3 顯著代謝物代謝途徑分析
        4.4.4 代謝通路富集分析
    4.5 本章小結
主要結論與展望
    主要結論
    展望
致謝
參考文獻
附錄A:附圖與附表
附錄B:作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文



本文編號:3808954

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