氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate,EC)在發(fā)酵食品生產和貯藏的全過程均可產生。2007年,世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構(International Agency for Research on Cancer,IARC)將氨基甲酸乙酯列為2A類致癌物,因此對發(fā)酵制品生產和貯藏全程的氨基甲酸乙酯濃度進行實時監(jiān)控和檢測顯得尤為重要。傳統(tǒng)的儀器檢測法不適宜大規(guī)模的在線檢測,而運用免疫法則可以滿足生產線現(xiàn)場實時檢測。本論文成功制備了氨基甲酸乙酯半抗原、人工抗原和多克隆抗體,對多克隆抗體的效果進行了評價,并初步建立了氨基甲酸乙酯間接酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測方法。主要研究內容如下:(1)根據氨基甲酸乙酯的結構特點,按照半抗原的設計要求和原理,通過向氨基甲酸乙酯分子中引入苯環(huán)特異性結構和直鏈連接臂,設計并合成了三種氨基甲酸乙酯半抗原ECH1、ECH2和ECH3,并通過核磁共振氫譜(1H NMR)和核磁共振碳譜(13C NMR)結構表征。(2)根據半抗原的結構特征,選擇碳二亞胺法將合成的三種氨基甲酸乙酯半抗原分別與大分子載體牛血清蛋白(BSA)進行偶聯(lián),制得人工抗原ECA1、ECA2和...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 氨基甲酸乙酯的概述
        1.1.1 氨基甲酸乙酯的理化特性
        1.1.2 氨基甲酸乙酯的形成過程
        1.1.3 氨基甲酸乙酯的致癌機理
    1.2 國內外食品中氨基甲酸乙酯相關標準及殘留水平
        1.2.1 食品中氨基甲酸乙酯的相關標準
        1.2.2 食品中氨基甲酸乙酯的殘留水平
    1.3 食品中氨基甲酸乙酯檢測方法的研究進展
        1.3.1 色譜法
        1.3.2 光譜法
        1.3.3 其它方法
    1.4 免疫分析法的理論基礎
        1.4.1 人工抗原的制備與效果評價
        1.4.2 酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)實驗
    1.5 本論文的主要內容及意義
        1.5.1 技術路線與主要內容
        1.5.2 目的及意義
第二章 氨基甲酸乙酯半抗原的合成與表征
    2.1 試驗材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 三種氨基甲酸乙酯半抗原的合成
        2.2.2 氨基甲酸乙酯半抗原的結構鑒定
    2.3 結果與討論
        2.3.1 三種半抗原的結構表征
        2.3.2 討論
    2.4 小結
第三章 氨基甲酸乙酯人工抗原的制備與評價
    3.1 試驗材料
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要溶液
    3.2 試驗方法
        3.2.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的合成
        3.2.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的鑒定與評價
    3.3 結果與討論
        3.3.1 氨基甲酸乙酯人工抗原的初步鑒定
        3.3.2 氨基甲酸乙酯人工抗原的偶聯(lián)比及蛋白含量的計算
        3.3.3 討論
    3.4 小結
第四章 氨基甲酸乙酯多克隆抗體的制備、評價與免疫分析方法的建立
    4.1 試驗材料
        4.1.1 主要儀器
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要溶液
    4.2 試驗方法
        4.2.1 多克隆抗體的制備
        4.2.2 間接ELISA法評價多克隆抗體免疫特性
        4.2.3 氨基甲酸乙酯ELISA檢測法的初步建立
    4.3 結果與討論
        4.3.1 多克隆抗體免疫效果評價
        4.3.2 ELISA檢測法的初步建立
        4.3.3 討論
    4.4 小結
第五章 全文結論
    5.1 主要結論
    5.2 展望
參考文獻
附錄 A 國內外發(fā)酵食品中EC含量
附錄 B 氨基甲酸乙酯包被原的制備
附錄 C EC的4-(二苯基羥甲基)苯甲酸衍生物的制備與表征
致謝
作者簡歷



本文編號：3788900