壇紫菜和龍須菜是我國沿海地區(qū)廣泛養(yǎng)殖的兩種重要的經濟藻類。兩種藻類含豐富的營養(yǎng)成分,可供食用和藥用,尤其是紫菜中的蛋白質含量相當于陸地植物大豆,且富含人體必需的氨基酸。本文以壇紫菜和龍須菜作為研究對象,分別研究了壇紫菜和龍須菜的酶解多肽的制備及其抗氧化和血管緊張素轉化酶(ACE)抑制活性。1.從龍須菜胰蛋白酶的酶解多肽液(≤3 kDa的組分)中利用LC-MS/MS鑒定出兩條具有特定序列的ACE抑制肽。經測定FQIN[M(O)]CILR和TGAPCR的IC₅₀值分別為9.64±0.36μM和23.94±0.82μM。兩條多肽具溫度和pH穩(wěn)定性,且能在模擬胃腸液中保持結構的穩(wěn)定性并發(fā)揮穩(wěn)定的ACE抑制作用。酶動力學考察顯示兩個多肽為ACE的非競爭性抑制劑。分子對接模擬顯示兩個多肽通過與ACE催化底物相關的關鍵氨基酸殘基形成氫鍵來干擾ACE。此外,兩個多肽在自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)體內仍能發(fā)揮顯著的降壓活性,兩者能顯著的降低SHR的收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP),其中FQIN[M(O)]CILR比TGAPCR在SHR體內能發(fā)揮更好的降血壓效果。2.比較了實驗室傳統(tǒng)...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 海洋環(huán)境與資源
        1.1.2 高血壓的發(fā)生及血管緊張素轉化酶的作用
        1.1.3 氧化應激與抗氧化劑
    1.2 生物活性肽的研究概況
        1.2.1 生物活性肽的研究現(xiàn)狀
        1.2.2 活性多肽的制備及分離方法
        1.2.3 海洋活性多肽的研究概況
    1.3 壇紫菜和龍須菜的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 壇紫菜的研究進展
        1.3.2 龍須菜的研究進展
    1.4 選題意義及研究背景
第2章 龍須菜降壓肽的篩選鑒定及體內活性研究
    2.1 儀器與材料
    2.2 實驗方法
        2.2.1 龍須菜多肽的制備
        2.2.2 液-質聯(lián)用技術鑒定多肽的序列
        2.2.3 ACE抑制肽的合成
        2.2.4 ACE抑制活性的測定
        2.2.5 總抗氧化活性測定
        2.2.6 多肽的性質
        2.2.7 多肽穩(wěn)定性考察
        2.2.8 多肽與ACE結合穩(wěn)定性
        2.2.9 多肽抑制模式考察
        2.2.10 分子對接模擬
        2.2.11 多肽SHR體內降血壓活性研究
        2.2.12 統(tǒng)計分析
    2.3 實驗結果
        2.3.1 龍須菜多肽的抗氧化及降血壓活性
        2.3.2 多肽ACE抑制活性篩選
        2.3.3 多肽的性質
        2.3.4 多肽ACE抑制活性的穩(wěn)定性研究
        2.3.5 多肽與ACE結合穩(wěn)定性
        2.3.6 多肽抑制模式的表征
        2.3.7 分子對接
        2.3.8 SHR體內降血壓活性研究
    2.4 討論
    2.5 結論
第3章 壇紫菜酶解多肽的制備及活性研究
    3.1 儀器與材料
    3.2 試驗方法
        3.2.1 壇紫菜蛋白的提取
        3.2.2 壇紫菜蛋白的分離純化
        3.2.3 蛋白質及多糖含量測定
        3.2.4 壇紫菜酶解多肽的制備
        3.2.5 水解度的測定
        3.2.6 酶解壇紫菜抗氧化能力測定
        3.2.7 酶解壇紫菜多肽ACE抑制活性測定
    3.3 結果與討論
        3.3.1 壇紫菜蛋白的提取
        3.3.2 壇紫菜蛋白的分離
        3.3.3 酶解壇紫菜蛋白的水解度及回收率
        3.3.4 酶解壇紫菜多肽抗氧化能力
        3.3.5 酶解壇紫菜多肽抑制ACE活性
    3.4 結論
參考文獻
致謝
作者簡歷及攻讀學位期間發(fā)表的學術論文與研究成果



本文編號：3777668