流行病學和臨床研究發(fā)現(xiàn)膳食中的反式脂肪酸(TFA)會提高血脂含量,促發(fā)動脈粥樣硬化(AS),從而誘導心血管疾病(CVD)的產(chǎn)生,因此各國都出臺了相應的政策限制工業(yè)加工食品中TFA的含量。但是TFA的來源有兩種,一種是工業(yè)來源反式脂肪酸(I-TFA),另一種是反芻動物反式脂肪酸(R-TFA)。CVD是目前影響人類健康最重大的慢性疾病,CVD死亡率占所有慢性疾病死亡率的50%左右。已知I-TFA會增加心血管疾病的患病風險,而R-TFA對心血管健康的影響尚不明確。脂質(zhì)組學技術是研究脂質(zhì)代謝與CVD的重要方法。所以,在全球限制TFA的大環(huán)境下,基于脂質(zhì)組學方法分析I-TFA和R-TFA對肝細胞脂質(zhì)代謝的影響、特別是關于對心血管健康的影響是非常必要的,對闡明含TFA食品的安全性、指導合理膳食有著重要意義。因此,本課題以人正常肝細胞LO2細胞為實驗對象,選擇9t16:1和11t18:1代表R-TFA,9t18:1代表I-TFA,此外,依據(jù)健康人血液(HHB)、心血管疾病人血液(CHB)、牛奶(CM)以及氫化大豆油(HSO)中TFA的比例分別配置了 4種反式脂肪酸混合物(TFA-mixture),將...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞符號注釋
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 概述
        1.2.1 反式脂肪酸
        1.2.2 反式脂肪酸與心血管疾病
        1.2.3 脂質(zhì)組學
        1.2.4 磷脂酶A2與花生四烯酸代謝通路
    1.3 課題研究的價值、意義及主要內(nèi)容
        1.3.1 課題來源
        1.3.2 研究價值和意義
        1.3.3 主要研究內(nèi)容
        1.3.4 技術路線
第2章 反式脂肪酸對人正常肝細胞功能的影響
    2.1 引言
    2.2 實驗材料與設備
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗設備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 LO2細胞培養(yǎng)
        2.3.2 反式脂肪酸的配制
        2.3.3 CCK8測細胞活力
        2.3.4 脂肪酸分析
        2.3.5 細胞內(nèi)ROS測定
        2.3.6 細胞膜完整性測定
        2.3.7 細胞內(nèi)甘油三酯和總膽固醇測定
        2.3.8 統(tǒng)計學分析
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 反式脂肪酸對人正常肝細胞活力的影響
        2.4.2 反式脂肪酸對人正常肝細胞脂肪酸組成的影響
        2.4.3 反式脂肪酸對人正常肝細胞內(nèi)ROS相對含量的影響
        2.4.4 反式脂肪酸對人正常肝細胞膜完整性的影響
        2.4.5 反式脂肪酸對人正常肝細胞甘油三酯含量的影響
        2.4.6 反式脂肪酸對人正常肝細胞總膽固醇含量的影響
    2.5 討論
    2.6 小結(jié)
第3章 反式脂肪酸對人正常肝細胞脂質(zhì)輪廓的影響
    3.1 引言
    3.2 實驗材料及設備
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗設備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 LO2細胞的培養(yǎng)
        3.3.2 細胞樣本的處理與收集
        3.3.3 脂質(zhì)的提取
        3.3.4 蛋白含量的測定
        3.3.5 全脂質(zhì)測定方法
        3.3.6 氧化脂質(zhì)測定方法
        3.3.7 統(tǒng)計學分析
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 反式脂肪酸對LO2細胞脂質(zhì)輪廓的影響
        3.4.2 反式脂肪酸對LO2細胞氧化脂質(zhì)組成和含量的影響
        3.4.3 差異代謝物分析
        3.4.4 KEGG代謝通路分析
    3.5 討論
    3.6 小結(jié)
第4章 反式脂肪酸對人正常肝細胞磷脂酶A2和花生四烯酸代謝通路的影響
    4.1 前言
    4.2 實驗材料與設備
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗設備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 LO2細胞的培養(yǎng)
        4.3.2 藥物處理及分組
        4.3.3 蛋白提取與測定
        4.3.4 蛋白免疫印記(Western blot)檢測蛋白表達
        4.3.5 數(shù)據(jù)分析
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 反式脂肪酸對人正常肝細胞磷脂酶A2蛋白表達的影響
        4.4.2 磷脂酶A2參與反式脂肪酸誘導LO2細胞內(nèi)花生四烯酸代謝通路
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 反式脂肪酸對人正常肝細胞功能的影響
        5.1.2 反式脂肪酸對人正常肝細胞脂質(zhì)輪廓的影響
        5.1.3 反式脂肪酸對人正常肝細胞磷脂酶A2和花生四烯酸代謝通路的影響
    5.2 進一步工作方向
創(chuàng)新之處
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果



本文編號：3770025