食品安全問題（微生物污染、農(nóng)獸藥殘留和違禁物質(zhì)添加等）嚴(yán)重威脅人畜的生命健康,其中由食品中微生物繁殖后產(chǎn)生的真菌毒素誘發(fā)的食源性疾病已廣泛引起大家的關(guān)注。目前已分離鑒定出的300多種真菌毒素中有30多種的危害較大,又以黃曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁,AFB₁）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）和赭曲霉毒素A（Ochratoxin A,OTA）等毒性強(qiáng)、具有“三致”作用的毒素的污染概率最高,主要存在于糧食及其制品中。且一些真菌可同時(shí)產(chǎn)生多種毒素,多種毒素混合污染一種糧食的情況也普遍存在。加強(qiáng)檢測(cè)技術(shù)的研發(fā)是保障糧食質(zhì)量安全的重要手段。熒光免疫層析檢測(cè)技術(shù)（fluorescent immunochromatographic assay,FICA）具有靈敏、準(zhǔn)確、快速、高通量、低成本,有多種熒光標(biāo)記物可供選擇,能實(shí)現(xiàn)多組分的同步檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)。本論文旨在建立熒光免疫層析法檢測(cè)糧食中的真菌毒素,為政府監(jiān)管提供參考。首先通過肟化改造AFB₁得到半抗原AFB₁-CMO,... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究目的和意義
    1.2 真菌毒素概述
        1.2.1 黃曲霉毒素B_1
        1.2.2 玉米赤霉烯酮
        1.2.3 赭曲霉毒素A
    1.3 真菌毒素檢測(cè)方法
        1.3.1 儀器檢測(cè)方法
        1.3.2 免疫學(xué)檢測(cè)方法
    1.4 熒光免疫層析法
        1.4.1 量子點(diǎn)熒光免疫層析法
        1.4.2 量子點(diǎn)微球熒光免疫層析法
        1.4.3 時(shí)間分辨熒光免疫層析法
    1.5 熒光免疫層析法檢測(cè)真菌毒素的研究展望
        1.5.1 多種熒光免疫層析法檢測(cè)真菌毒素的比較
        1.5.2 真菌毒素混合污染的同時(shí)檢測(cè)
    1.6 研究內(nèi)容和方法
        1.6.1 黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備
        1.6.2 糧食中黃曲霉毒素B_1的三種熒光定量免疫層析技術(shù)研究
        1.6.3 同時(shí)檢測(cè)糧食中三種真菌毒素的多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析技術(shù)研究
第2章 黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試劑
        2.1.2 儀器與設(shè)備
        2.1.3 溶液體系
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 抗原制備
        2.2.2 動(dòng)物免疫
        2.2.3 抗血清篩選
        2.2.4 黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備
        2.2.5 抗體純化
        2.2.6 抗體生物素化
        2.2.7 抗體性能鑒定
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 全抗原鑒定
        2.3.2 抗血清篩選
        2.3.3 單克隆抗體的制備
        2.3.4 抗體的性質(zhì)
    2.4 討論
        2.4.1 人工抗原的合成
        2.4.2 單克隆抗體的制備
        2.4.3 與文獻(xiàn)報(bào)道的抗體的比較
    2.5 小結(jié)
第3章 糧食中黃曲霉毒素B_1的三種熒光定量免疫層析技術(shù)研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試劑
        3.1.2 耗材
        3.1.3 儀器與設(shè)備
        3.1.4 溶液體系
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 三種熒光標(biāo)記物性質(zhì)的鑒定
        3.2.2 三種標(biāo)記抗體熒光探針的制備
        3.2.3 三種熒光定量免疫層析檢測(cè)方法的建立
        3.2.4 三種熒光定量免疫層析方法工藝條件的優(yōu)化
        3.2.5 動(dòng)力學(xué)分析
        3.2.6 定量檢測(cè)
        3.2.7 實(shí)際樣品檢測(cè)
    3.3 討論
        3.3.1 三種熒光標(biāo)記物的電鏡表征分析
        3.3.2 三種熒光定量免疫層析法的原理
        3.3.3 熒光定量免疫層析法工藝條件的優(yōu)化
        3.3.4 動(dòng)力學(xué)分析
        3.3.5 定量檢測(cè)
        3.3.6 實(shí)際樣品檢測(cè)
    3.4 討論
        3.4.1 三種熒光定量免疫層析法的比較
        3.4.2 與國內(nèi)外方法比較
    3.5 小結(jié)
第4章 同時(shí)檢測(cè)糧食中三種真菌毒素的多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析技術(shù)研究
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 試劑
        4.1.2 耗材
        4.1.3 儀器與設(shè)備
        4.1.4 溶液體系
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 時(shí)間分辨熒光探針的制備
        4.2.2 多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析法的建立
        4.2.3 檢測(cè)方法優(yōu)化
        4.2.4 動(dòng)力學(xué)分析
        4.2.5 定量檢測(cè)
        4.2.6 實(shí)際樣品檢測(cè)
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析法的原理
        4.3.2 多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析法的優(yōu)化
        4.3.3 動(dòng)力學(xué)分析
        4.3.4 定量檢測(cè)
        4.3.5 實(shí)際樣品檢測(cè)
    4.4 討論
        4.4.1 時(shí)間分辨熒光微球標(biāo)記抗體
        4.4.2 與國內(nèi)外方法的比較
    4.5 小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 黃曲霉毒素B_1單克隆抗體的制備
        5.1.2 糧食中黃曲霉毒素B_1的三種熒光定量免疫層析技術(shù)研究
        5.1.3 同時(shí)檢測(cè)糧食中三種真菌毒素的多重時(shí)間分辨熒光定量免疫層析技術(shù)研究
    5.2 展望
        5.2.1 熒光探針保存方式的探究
        5.2.2 時(shí)間分辨熒光定量免疫層析法優(yōu)勢(shì)普適性的探究
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]基于核酸適體傳感器的赭曲霉毒素A檢測(cè)方法研究[D]. 魯麗媛.河南工業(yè)大學(xué) 2017
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本文編號(hào)：3692454