多糖是一類(lèi)高分子碳水化合物,具有廣泛的生物活性,近年來(lái)逐漸成為食品和醫(yī)療行業(yè)的研究熱點(diǎn)。一些研究發(fā)現(xiàn)微生物胞外多糖具有良好的抗氧化活性和成膜性,因而被廣泛應(yīng)用于果蔬保鮮領(lǐng)域。強(qiáng)雄腐霉（Pythium arrhenomanes）是一類(lèi)腐生性真菌,屬腐霉科、腐霉屬。目前關(guān)于腐霉代謝產(chǎn)物的研究大多集中在二十碳五烯酸的提取,而關(guān)于腐霉胞外多糖的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本研究以強(qiáng)雄腐霉HA-09為研究對(duì)象,對(duì)其胞外多糖進(jìn)行分離純化和一級(jí)結(jié)構(gòu)解析,探索其在天然抗氧化劑、微生物源果蔬保鮮制劑等方面的應(yīng)用價(jià)值,為強(qiáng)雄腐霉胞外多糖的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論和技術(shù)支持。1.強(qiáng)雄腐霉胞外多糖的提取純化工藝?yán)么汲练◤膹?qiáng)雄腐霉發(fā)酵液中提取得到粗多糖（Crude PEPS）,產(chǎn)量為7.33 g/L。菌絲與多糖的干重比為3.18 g/7.33 g。強(qiáng)雄腐霉粗多糖中總糖含量為83.62%,蛋白質(zhì)含量為6.89%。對(duì)強(qiáng)雄腐霉粗多糖進(jìn)行分級(jí)純化,共得到三種純化組分:PEPS-1、PEPS-2和PEPS-3。2.強(qiáng)雄腐霉胞外多糖的結(jié)構(gòu)鑒定一級(jí)結(jié)構(gòu)解析結(jié)果表明,三種純化組分均具有較高的純度,不含蛋白質(zhì)等雜質(zhì);純化組分均由鼠李糖和葡萄... 

【文章來(lái)源】：淮陰工學(xué)院江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

淮陰工學(xué)院碩士學(xué)位論文第13頁(yè)回歸方程為：Y=1.1154X-0.0059（R2=0.995），其中Y為吸光度值，X為葡萄糖濃度（mg/mL）；牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2-2，回歸方程為：Y=0.0138X-0.002（R2=0.996），其中Y為吸光度值，X為牛血清蛋白濃度（μg/mL），經(jīng)計(jì)算強(qiáng)雄腐霉粗多糖中總糖含量為83.62%，蛋白質(zhì)含量為6.89%，強(qiáng)雄腐霉粗多糖中蛋白質(zhì)含量較低，可以進(jìn)行進(jìn)一步的分級(jí)純化。圖2-1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure2-1Standardcurveofglucose圖2-2牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure2-2Standardcurveofbovineserumalbumin2.2.2強(qiáng)雄腐霉胞外多糖的分級(jí)純化DEAE-52纖維素是一種陰離子交換樹(shù)脂，利用不同極性的洗脫液可將帶電荷不同的多糖分級(jí)洗脫下來(lái)，從而得到帶電特性不同的純化組分[102]。DEAE-52分離多糖的原理如圖

袁志香腐霉多糖的分離與鑒定及其在草莓采后保鮮中的作用研究第14頁(yè)2-3所示，通常利用純水作為洗脫液時(shí)可以將中性多糖洗脫下來(lái)，利用鹽溶液如NaCl溶液作為洗脫液洗脫時(shí)可以將酸性多糖洗脫下來(lái)[103]。帶電特性不同的純化多糖在結(jié)構(gòu)組成、生物活性等方面往往存在較大的差異，酸性多糖多含有糖醛酸、氨基酸或硫酸基等酸性基團(tuán)[65]。圖2-3DEAE-52纖維素樹(shù)脂洗脫示意圖Figure2-3SchematicdiagramofDEAE-52celluloseelution圖2-4強(qiáng)雄腐霉胞外多糖（PEPS）洗脫曲線Figure2-4ElutioncurveofPythiumarrhenomanesexopolysaccharides(PEPS)強(qiáng)雄腐霉多糖的洗脫曲線如圖2-4所示。強(qiáng)雄腐霉粗多糖經(jīng)純水和不同濃度的鹽溶液（0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液）洗脫共得到三個(gè)組分，分別為水洗組分PEPS-1、0.1MNaCl洗脫組分PEPS-2、0.5MNaCl洗脫組分PEPS-3，可以初步判定PEPS-1為中性多糖，PEPS-2和PEPS-3可能為酸性多糖，其中PEPS-2和PEPS-3易溶于0.5MNaOH溶液。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微生物胞外多糖黃原膠的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J]. 邱嘉輝,何亞文.  激光生物學(xué)報(bào). 2019(05)
[2]鐵皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究[J]. 王麗霞,劉孟宗,王芳,張惠.  中國(guó)食品添加劑. 2019(02)
[3]地皮菜多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)組成分析[J]. 張雅雯,李海平,孟麗青,王迎進(jìn).  食品研究與開(kāi)發(fā). 2017(18)
[4]Growth Inhibitory Effects of Garlic Polysaccharide on Human HepG2 Cells[J]. Liyan LI,Tao HUANG.  Agricultural Science & Technology. 2017(06)
[5]HPGPC法測(cè)定庫(kù)拉索蘆薈多糖的分子量和含量[J]. 楊樹(shù)娟,姜文圣,錢(qián)如貴,申開(kāi)澤,王艷.  今日藥學(xué). 2016(11)
[6]杜香多糖的乙醇分級(jí)純化及其性質(zhì)研究[J]. 張喬會(huì),黃晶晶,田盼盼,王建中,羅興武.  食品研究與開(kāi)發(fā). 2016(19)
[7]絞股藍(lán)內(nèi)生真菌產(chǎn)胞外多糖發(fā)酵條件的優(yōu)化[J]. 李傳民,曹健,張慧茹,蘭亞莉.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(01)
[8]真菌發(fā)酵胞外多糖的研究進(jìn)展[J]. 楊同香,吳孔陽(yáng),陳俊亮,唐浩國(guó),康懷彬.  食品科學(xué). 2016(05)
[9]DEAE纖維素純化玉米須總多糖的工藝優(yōu)選[J]. 孫曉雪,康杰,王昶,王偉明.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2014(15)
[10]2,4-二硝基苯肼法測(cè)定維C銀翹片中維生素C的含量[J]. 孫艷麗.  廣東化工. 2013(13)

博士論文
[1]幾種植物多酚捕獲體內(nèi)自由基反應(yīng)機(jī)理的理論研究[D]. 逯陽(yáng).哈爾濱理工大學(xué) 2017
[2]基于牡蠣糖原硫酸酯結(jié)構(gòu)的多糖構(gòu)效關(guān)系研究[D]. 楊靜峰.江蘇大學(xué) 2013
[3]黃傘子實(shí)體多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性的研究[D]. 聶永心.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]鼠李糖脂強(qiáng)化石油污染土壤植物—微生物聯(lián)合修復(fù)研究[D]. 李琦.西安建筑科技大學(xué) 2011
[5]青蛤多糖分離鑒定、硫酸酯化及其生物活性研究[D]. 蔣長(zhǎng)興.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[6]氨基葡萄糖/殼寡糖稀土配合物的合成、表征及抗氧化性能研究[D]. 任群翔.東北大學(xué) 2009

碩士論文
[1]植物及水體重金屬含量拉曼光譜檢測(cè)方法研究[D]. 江麗霞.華東交通大學(xué) 2015
[2]藍(lán)芪復(fù)方中多糖的純化及分子量測(cè)定[D]. 羅小燕.廣東藥學(xué)院 2015
[3]三株大型真菌的發(fā)酵條件優(yōu)化及其胞外多糖的結(jié)構(gòu)與功能研究[D]. 劉帥.河南師范大學(xué) 2014
[4]馬鈴薯L-半乳糖-1，4-內(nèi)酯脫氫酶基因在番茄中的功能分析[D]. 趙云霞.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[5]蓮花蜂花粉多糖的提取、分離及生物活性的研究[D]. 劉潔.福建農(nóng)林大學(xué) 2009
[6]牡蠣多糖的分離純化及生物學(xué)活性研究[D]. 李志.福建農(nóng)林大學(xué) 2009
[7]中藥北沙參多糖與單糖組成和含量測(cè)定方法研究[D]. 任浩娜.沈陽(yáng)藥科大學(xué) 2008
[8]火棘多糖的初步研究[D]. 楊鋒.陜西師范大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3493360