發(fā)布時間：2021-05-15 20:18

　　黃曲霉毒素B1是常出現(xiàn)在霉變的農(nóng)產(chǎn)品中的一種由黃曲霉菌代謝產(chǎn)生的毒素,它毒性極強(qiáng),是砒霜毒性的68倍。若食用超過一定劑量的黃曲霉毒素B1則會導(dǎo)致急性疾病,例如腹瀉、肝臟受損等,嚴(yán)重情況下甚至?xí)䦟?dǎo)致死亡。因此,一種新型農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素B1快速檢測方法的建立對于保障世界食品衛(wèi)生安全有著重大的意義。本論文圍繞以下三個方面展開了討論:（1）經(jīng)典型免疫層析黃曲霉毒素B1檢測技術(shù)建立基于抗原和抗體之間的特異性免疫識別是經(jīng)典的免疫層析方法的基本原理,其主要試驗方案也是根據(jù)這一實驗原理制定的。首先利用膠體金作為可見光下標(biāo)記物,用于顯色,在膠體金表面通過靜電吸附標(biāo)記上黃曲霉毒素B1抗體,通過肉眼觀察C/T線的顯色情況來判斷膠體金標(biāo)記的抗體是否有和T線上的包被原或C線上羊抗鼠二抗結(jié)合,從而分析樣品中黃曲霉毒素B1的含量,并進(jìn)行定量分析。實驗中具體優(yōu)化了用于標(biāo)記的膠體金中的重要參數(shù),在得到的最佳實驗條件下,可以實現(xiàn)5分鐘內(nèi)完成檢測,且靈敏度達(dá)到0.5μg/L,在0.1～5μg/L范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好線性（R²=0.9872）,本技術(shù)重復(fù)性強(qiáng)、穩(wěn)定性高,且具有非常高的特異性,可以有效的檢測... 

【文章來源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 黃曲霉毒素 B1 產(chǎn)生及危害
    1.2 黃曲霉毒素 B1 的經(jīng)典儀器檢測方法
        1.2.1 高效液相色譜法檢測黃曲霉毒素B1
        1.2.2 薄層色譜法檢測黃曲霉毒素B1
        1.2.3 液質(zhì)聯(lián)用法檢測黃曲霉毒素 B1
    1.3 黃曲霉毒素B1的快速檢測方法
        1.3.1 近紅外光譜法檢測黃曲霉毒素B1
        1.3.2 酶聯(lián)免疫吸附法檢測黃曲霉毒素B1
        1.3.3 生物傳感器檢測黃曲霉毒素B1
    1.4 膠體金免疫側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)
    1.5 本文主要研究內(nèi)容
第二章 黃曲霉毒素 B1 經(jīng)典型免疫層析檢測技術(shù)建立
    2.1 經(jīng)典型免疫層析檢測方法的技術(shù)原理
    2.2 主要材料與設(shè)備
        2.2.1 主要實驗材料
        2.2.2 主要儀器設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 標(biāo)記材料膠體金的制備與保存
        2.3.2 材料前處理以及溶液配置
        2.3.3 黃曲霉毒素B1單克隆抗體與膠體金的偶聯(lián)標(biāo)記
        2.3.4 層析膜的種類優(yōu)化
        2.3.5 黃曲霉毒素B1經(jīng)典型免疫層析檢測實驗相關(guān)參數(shù)優(yōu)化
        2.3.6 標(biāo)準(zhǔn)樣品的檢測與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 膠體金的表征以及保存實驗
        2.4.2 層析膜選擇結(jié)果
        2.4.3 膠體金與抗體偶聯(lián)性能驗證
        2.4.4 偶聯(lián)pH值優(yōu)化
        2.4.5 抗體添加量優(yōu)化
        2.4.6 封閉劑選擇以及封閉劑添加量的優(yōu)化
        2.4.7 重懸液選擇優(yōu)化
        2.4.8 T線噴膜濃度優(yōu)化
        2.4.9 反應(yīng)時間選擇優(yōu)化
        2.4.10 特異性驗證
        2.4.11 標(biāo)準(zhǔn)樣品的檢測與標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
    2.5 小結(jié)
第三章 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1免疫側(cè)向?qū)游鰴z測技術(shù)建立
    3.1 改進(jìn)型黃曲霉毒素 B1 免疫層析檢測方法的技術(shù)原理
    3.2 主要材料與設(shè)備
        3.2.1 主要實驗材料
        3.2.2 主要儀器設(shè)備
    3.3 實驗方法
        3.3.1 金標(biāo)抗體偶聯(lián)物用量
        3.3.2 上樣量的優(yōu)化
        3.3.3 冷凍干燥工藝條件優(yōu)化優(yōu)化
        3.3.4 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1檢測方法性能測試及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    3.4 結(jié)果和討論
        3.4.1 金標(biāo)抗體偶聯(lián)物用量的優(yōu)化
        3.4.2 上樣量的優(yōu)化
        3.4.3 冷凍干燥工藝條件優(yōu)化
        3.4.4 改進(jìn)型黃曲霉毒素B1檢測方法性能測試及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    3.5 小結(jié)
第四章 茶葉中黃曲霉毒素B1超靈敏免疫側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)建立
    4.1 前言
    4.2 主要材料與設(shè)備
        4.2.1 主要實驗材料
        4.2.2 主要儀器設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 基質(zhì)效應(yīng)影響分析
        4.3.2 稀釋倍數(shù)優(yōu)化
        4.3.3 四種茶樣中超靈敏黃曲霉毒素檢測方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    4.4 結(jié)果和討論
        4.4.1 基質(zhì)效應(yīng)影響確定
        4.4.2 稀釋倍數(shù)優(yōu)化
        4.4.3 四種茶樣中超靈敏黃曲霉毒素 B1 檢測方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線建立
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的學(xué)術(shù)活動及成果清單


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3188271