據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟（IDF）最新公布的數(shù)據(jù),截止到2019年,我國(guó)糖尿病患者約為1.164億人,已成為全球患病人數(shù)最多的國(guó)家。2型糖尿病（T2DM）在糖尿病人群中所占比例高達(dá)90%,其可誘發(fā)心血管疾病、腎病、視網(wǎng)膜病變以及神經(jīng)病變等并發(fā)癥,給患者家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。T2DM并非終身性慢性疾病,可通過(guò)適當(dāng)?shù)纳攀掣深A(yù)得到有效的預(yù)防和改善。因此,開(kāi)發(fā)天然、安全、高效的食品功能因子以替代傳統(tǒng)藥物對(duì)T2DM進(jìn)行膳食干預(yù)具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。我國(guó)核桃資源豐富,分離自核桃仁蛋白的核桃蛋白酶解物（WHPs,3-10kDa）已被證實(shí)具有降血糖活性,但活性肽的結(jié)構(gòu)和在關(guān)鍵調(diào)控中的作用機(jī)理有待進(jìn)一步明確。本文主要對(duì)核桃活性肽的制備、純化、結(jié)構(gòu)鑒定及降血糖活性進(jìn)行了系統(tǒng)研究。主要研究結(jié)果如下:（1）在完成WHPs（3-10kDa）Sephadex G25和Sephadex G15葡聚糖凝膠分離純化的基礎(chǔ)上,采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）對(duì)核桃水解肽進(jìn)一步分離純化,得到單一組分F1。利用電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜（ESI-MS/MS）技術(shù)對(duì)組分F1進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,共獲得432種具有不同氨基酸序列的活性肽。根... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 選題來(lái)源
    1.2 核桃概述
        1.2.1 核桃的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
        1.2.2 核桃的生理功能
        1.2.3 核桃多肽的研究進(jìn)展
    1.3 糖尿病的概述
        1.3.1 糖尿病的定義
        1.3.2 糖尿病的分類(lèi)與癥狀
        1.3.3 T2DM的治療藥物
        1.3.4 T2DM與氧化應(yīng)激的關(guān)系
    1.4 IRS-1/PI3K/Akt信號(hào)通路
    1.5 AMPK信號(hào)通路
    1.6 論文研究目的與意義
    1.7 論文研究的主要內(nèi)容
    1.8 創(chuàng)新點(diǎn)
    1.9 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
第二章 核桃降血糖活性肽的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定
    2.1 材料和方法
        2.1.1 材料
            2.1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料
            2.1.1.2 試劑
            2.1.1.3 儀器與設(shè)備
        2.1.2 方法
            2.1.2.1 RP-HPLC分離純化
            2.1.2.2 ESI-MS/MS結(jié)構(gòu)鑒定
            2.1.2.3 降血糖活性肽的合成
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 核桃降血糖活性肽的RP-HPLC色譜
        2.2.2 核桃降血糖活性肽的ESI-MS/MS結(jié)構(gòu)鑒定
        2.2.3 核桃降血糖活性肽的固相合成
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 核桃活性肽的降血糖及抗氧化活性研究
    3.1 材料和方法
        3.1.1 材料
            3.1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料
            3.1.1.2 試劑
            3.1.1.3 儀器與設(shè)備
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 α-葡萄糖苷酶抑制率
            3.1.2.2 α-淀粉酶抑制率
            3.1.2.3 氧自由基吸收能力（ORAC）
            3.1.2.4 HepG2細(xì)胞培養(yǎng)
            3.1.2.5 核桃活性肽對(duì)HepG2細(xì)胞活力的影響（MTT法）
            3.1.2.6 IR HepG2細(xì)胞模型的建立
            3.1.2.7 核桃活性肽對(duì)IR HepG2細(xì)胞模型葡萄糖消耗量的測(cè)定
            3.1.2.8 核桃活性肽對(duì)IR HepG2細(xì)胞模型抗氧化能力的測(cè)定
            3.1.2.9 統(tǒng)計(jì)分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 核桃活性肽對(duì)α-葡萄糖苷酶抑制率驗(yàn)證
        3.2.2 核桃活性肽對(duì)α-淀粉酶抑制率驗(yàn)證
        3.2.3 核桃活性肽的氧自由基吸收能力（ORAC）
        3.2.4 核桃活性肽對(duì)HepG2細(xì)胞活力的影響
        3.2.5 IR HepG2細(xì)胞模型的建立
        3.2.6 核桃活性肽對(duì)IR HepG2細(xì)胞模型葡萄糖消耗量的影響
        3.2.7 核桃活性肽對(duì)IR HepG2細(xì)胞模型抗氧化活性的影響
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 核桃活性肽對(duì)IR HepG2細(xì)胞葡萄糖代謝的影響及調(diào)控機(jī)制
    4.1 材料和方法
        4.1.1 材料
            4.1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料
            4.1.1.2 試劑
            4.1.1.3 儀器與設(shè)備
        4.1.2 方法
            4.1.2.1 細(xì)胞總蛋白提取
            4.1.2.2 蛋白免疫印跡（Western Blot）測(cè)定蛋白表達(dá)
            4.1.2.3 高碘酸-Schiff（PAS）糖原染色法
            4.1.2.4 GLUT4免疫熒光染色
            4.1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 LPLLR通過(guò)促進(jìn)IR HepG2細(xì)胞中GLUT4的表達(dá)和易位來(lái)改善葡萄糖攝取
        4.2.2 LPLLR通過(guò)上調(diào)IR HepG2細(xì)胞中的p-GSK-3β促進(jìn)糖原合成
        4.2.3 LPLLR通過(guò)下調(diào)與IR HepG2細(xì)胞糖異生有關(guān)的酶和轉(zhuǎn)錄因子來(lái)抑制肝臟糖異生
        4.2.4 LPLLR通過(guò)激活I(lǐng)R HepG2細(xì)胞中的IRS-1/PI3K/Akt和AMPK信號(hào)通路來(lái)改善IR
        4.2.5 LPLLR對(duì)IR HepG2細(xì)胞中IRS-1/PI3K/Akt和AMPK信號(hào)通路的總結(jié)
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
第五章 核桃活性肽LPLLR的穩(wěn)定性研究
    5.1 材料和方法
        5.1.1 材料
            5.1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料
            5.1.1.2 試劑
            5.1.1.3 儀器與設(shè)備
        5.1.2 方法
            5.1.2.1 LPLLR的熱穩(wěn)定性分析
            5.1.2.2 LPLLR的酸堿穩(wěn)定性分析
            5.1.2.3 LPLLR的模擬胃腸道消化穩(wěn)定性分析
            5.1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    5.2 結(jié)果
        5.2.1 LPLLR的熱穩(wěn)定性分析結(jié)果
        5.2.2 LPLLR的酸堿穩(wěn)定性分析結(jié)果
        5.2.3 LPLLR的模擬胃腸道消化穩(wěn)定性分析結(jié)果
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]核桃的營(yíng)養(yǎng)保健功能及功能成分研究進(jìn)展[J]. 李俊南,習(xí)學(xué)良,熊新武,楊建華,張雨思.  中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng). 2018(05)
[2]核桃多肽的抗氧化活性及其分子量、氨基酸組成特性研究[J]. 李漢洋,李建杰,王帥,徐興華,藍(lán)文言,梁宇鵬,張珍蘭,榮瑞芬.  食品工業(yè)科技. 2018(13)
[3]我國(guó)核桃起源問(wèn)題探究[J]. 王根憲.  西北園藝(果樹(shù)). 2015(06)
[4]山核桃營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與種植經(jīng)濟(jì)效益分析[J]. 李新委,謝世友,馬燕.  農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào). 2015(02)
[5]長(zhǎng)白山核桃球蛋白的提取、分離純化及其功能性質(zhì)研究[J]. 王曉飛,閔偉紅,朱運(yùn)明,劉春雷,吳丹,崔玲玉,劉景圣.  現(xiàn)代食品科技. 2015(04)
[6]核桃多肽對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)老年小鼠血脂水平的影響[J]. 楊子明,劉金磊,顏小捷,李典鵬.  食品科學(xué). 2015(09)
[7]食用核桃可降低糖尿病風(fēng)險(xiǎn)[J]. 陳錚.  中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2013(04)
[8]核桃多肽功能特性的研究[J]. 姜莉,徐懷德,陳金海.  食品科技. 2013(01)
[9]核桃油、紫蘇油、α-亞麻酸、亞油酸對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響[J]. 陳亮,王麗梅,郭艷芬,肖娜,陶興無(wú),劉志國(guó),劉大川,劉烈炬.  中國(guó)油脂. 2011(10)
[10]核桃多肽的制備及核桃多肽酒的研制[J]. 姜莉,徐懷德,陳金海,姜晨曦,何玉君.  食品科學(xué). 2009(08)

博士論文
[1]玉米抗氧化肽活性氧清除作用與抗氧化基因表達(dá)調(diào)節(jié)作用研究[D]. 王麗英.吉林大學(xué) 2018
[2]β酪啡肽在大鼠胃腸道內(nèi)的釋放、吸收和穩(wěn)定特性及其對(duì)胃腸機(jī)能的影響[D]. 宗亞峰.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]苦瓜降糖多肽-P的分離純化及降糖機(jī)理研究[D]. 盛清凱.江南大學(xué) 2005

碩士論文
[1]降血糖活性肽制備及抑制α-葡萄糖苷酶活性肽純化與鑒定[D]. 趙紅星.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2018
[2]亞麻籽抗氧化肽制備、活性鑒定及降血糖研究[D]. 王惠敏.福州大學(xué) 2018
[3]核桃生物活性評(píng)價(jià)及其乳劑制備工藝研究[D]. 李麗琪.武漢工程大學(xué) 2017
[4]核桃多肽降血糖功能效果研究[D]. 杜侃瑩.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[5]核桃多肽防治糖尿病物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究[D]. 李麗.武漢工程大學(xué) 2016
[6]漢麻籽粕降血糖肽的酶法制備及其分離純化[D]. 梁凱.華南理工大學(xué) 2014
[7]T3對(duì)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化還原狀態(tài)及糖代謝的影響[D]. 陳立立.江南大學(xué) 2014
[8]啤酒糟多肽的分離純化及降血糖活性研究[D]. 田應(yīng)娟.華南理工大學(xué) 2011
[9]醋蛋酶解產(chǎn)物生物活性成分的研究[D]. 陳黎斌.江南大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3156003