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基于顯色作用和淬滅作用的膠體金在黃曲霉毒素M1和大腸桿菌O157:H7檢測中的初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-03-29 16:09
  膠體金是具有一定尺寸大小,并且可以保持穩(wěn)定膠體狀態(tài)的貴金屬納米粒子。由于顏色醒目,所以膠體金作為示蹤物廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢測。同時,膠體金具有較高的摩爾消光系數(shù)和可調(diào)的可見光吸收峰,因此也可以作為淬滅劑應(yīng)用于檢測。黃曲霉毒素M1(Aflatoxin,AFM1)是黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)的次級代謝產(chǎn)物。在潮濕的環(huán)境下,AFB1會污染谷物,奶牛吃了AFB1污染的谷物后會產(chǎn)生含AFM1的牛奶,因此AFM1也被稱為“牛奶毒素”。大腸桿菌O157:H7對于人類健康而言是一種嚴重的威脅,因此,有必要設(shè)計一種快速且靈敏的方法來檢測它們。本論文利用膠體金的顯色作用和淬滅作用實現(xiàn)對AFM1和大腸桿菌O157:H7的檢測。真菌毒素和致病菌可能存在于同一食品樣本中,因此有必要在樣本中將其同時檢出。本文第二章以膠體金為顯色標記物將競爭法和雙抗夾心法集成在同一個試紙條上,從而實現(xiàn)了對小分子物質(zhì)(AFM1)和大分子物質(zhì)(大腸桿菌O157:H7)的同時檢測。結(jié)果表明,AFM1檢測時,線性范圍為100 pg/mL-1000 pg/mL,在牛奶中的檢測靈敏度為50 pg/mL。大腸桿菌O157... 

【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于顯色作用和淬滅作用的膠體金在黃曲霉毒素M1和大腸桿菌O157:H7檢測中的初步應(yīng)用


黃曲霉毒素結(jié)構(gòu)通式

模式圖,模式,信號值


2.3.5 T 線位置的探究如圖2.1所示,將T1線檢測AFM1,T2線檢測大腸桿菌O157:H7這種模式命名為LFI set-up I;將T1線檢測大腸桿菌O157:H7,T2線檢測AFM1這種模式命名為LFI set-up II。在LFI set-up I和LFI set-up II這兩種模式中,當AFM1濃度為0 pg/mL時,每隔一分鐘對檢測大腸桿菌O157:H7(3.3×105CFU/mL)的T線信號值進行讀取,直到35 min。比較這兩種模式下檢測大腸桿菌O157:H7(3.3×105CFU/mL)的T線信號值。當AFM1濃度為500 pg/mL時,每隔一分鐘對檢測大腸桿菌O157:H7(3.3×105CFU/mL)的T線信號值進行讀取,直到35 min。比較這兩種模式下檢測大腸桿菌O157:H7(3.3×105CFU/mL)的T線信號值。當大腸桿菌濃度為0CFU/mL時,每隔一分鐘對檢測AFM1(0和500 pg/mL)的T線信號值進行讀取,直到35 min。比較兩種模式下檢測AFM1(0和500 pg/mL)的T線信號值。當大腸桿菌為3.3×105CFU/mL時,每隔一分鐘對檢測AFM1(0和500 pg/mL)的T線信號值進行讀取,直到35 min。比較兩種模式下檢測AFM1(0和500 pg/mL)的T線信號值。綜合以上數(shù)據(jù)探究檢測線的位置對競爭法和雙抗夾心法的影響

免疫層析,競爭法,試紙條,大腸桿菌


第二章 集成雙路膠體金免疫層析法同時檢測黃曲霉毒素 M1 和大腸桿菌 O157:H7并與上述方法對比。2.4 結(jié)果與討論2.4.1 實驗設(shè)計原理檢測原理如圖 2.2 所示,若樣本存在一定濃度的大腸桿菌 O157:H7,則 anti-Ecoli O157:H7 mAb-GNP 與大腸桿菌 O157:H7 形成復(fù)合物,接著復(fù)合物被 T1 線上的 anti-E. coli O157:H7 pAb 捕獲,最終在 T1 線上顯色,T1 線的檢測信號值與大腸桿菌 O157:H7 的量成正比。若樣本存在一定濃度的 AFM1,anti-AFM1 mAb-GNP 與 AFM1 結(jié)合形成復(fù)合物,則 T2 線上的 AFM1-BSA 不能或少量被 anti-AFM1 mAb-GNP 捕獲,T線不顯色或顯色很淺。T2 線的檢測信號值與 AFM1 的濃度成反比。

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮-二聯(lián)膠體金免疫層析試紙條的制備及應(yīng)用[J]. 章先,付子賢,周一釗,方維煥,宋厚輝.  微生物學(xué)通報. 2019(05)
[4]食品中真菌毒素的污染與檢測研究進展[J]. 稅丕容.  現(xiàn)代食品. 2018(13)
[5]膠體金免疫層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測中的應(yīng)用[J]. 高素敏.  當代畜牧. 2017(35)
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[9]基于納米材料構(gòu)建免疫傳感器快速測定糧油食品中的黃曲霉毒素B1[J]. 王瑞鑫,張微,李書國.  糧食與油脂. 2016(01)
[10]畜產(chǎn)品中瘦肉精、氯霉素等殘留的膠體金檢測技術(shù)[J]. 姜在清,陳明生.  中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2015(10)

博士論文
[1]DNA探針在檢測生物分子與離子方面的應(yīng)用[D]. 龐淑.吉林大學(xué) 2015

碩士論文
[1]免疫層析法快速檢測氟苯尼考和大腸桿菌O157:H7的研究[D]. 韓姣姣.南昌大學(xué) 2018
[2]基于HCR及生物素—鏈霉親和素信號放大系統(tǒng)檢測大腸桿菌O157:H7的研究[D]. 郭琦.南昌大學(xué) 2017
[3]黃曲霉毒素M1免疫層析檢測方法的研究[D]. 吳成輝.南昌大學(xué) 2017



本文編號:3107811

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