【摘要】：海紅果(Malus micromalus Makino)為薔薇科蘋(píng)果屬落葉小喬木,是一種資源稀少的果樹(shù)。海紅果酸甜可口,營(yíng)養(yǎng)豐富,榨汁釀造成果酒后,原液里一些未發(fā)酵的化學(xué)成分和酵母代謝產(chǎn)生的活性成分,賦予了海紅果酒獨(dú)特的生理活性。為了研究海紅果酒的主要成分及其活性,本研究對(duì)海紅果酒的化學(xué)成分進(jìn)行了分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定,并對(duì)海紅果酒多糖的功能性進(jìn)行了研究。本論文試驗(yàn)共分為五個(gè)部分,即海紅果酒香氣物質(zhì)的分析檢測(cè);脂溶性成分的分離鑒定;水溶性多糖的分離純化和結(jié)構(gòu)表征;多糖的抗氧化和抗衰老活性評(píng)價(jià);多糖的降血糖活性研究。主要研究結(jié)果如下:(1)海紅果酒香氣成分的分析檢測(cè)采用頂空-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)海紅果酒的香氣物質(zhì)進(jìn)行了分析檢測(cè),并用面積歸一化法測(cè)定各成分的相對(duì)含量。結(jié)果表明,海紅果酒含有60種香氣成分,主要是醇類和酯類化合物、醛酮類化合物、有機(jī)酸以及烯烴類化合物等。(2)海紅果酒脂溶性成分的分離鑒定將海紅果酒濃縮,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇對(duì)濃縮液進(jìn)行萃取。不同萃取物通過(guò)各種色譜(硅膠柱色譜、Sephadex LH-20葡聚糖柱凝膠色譜等)和重結(jié)晶等方法分離。借助理化性質(zhì)和波譜手段,從乙酸乙酯萃取物中共鑒定出13個(gè)化合物,分別是:金絲桃苷(1)、蘆丁(2)、兒茶素(3)、表兒茶素(4)、熊果酸(5)、β-谷甾醇(6)、柚皮苷二氫查耳酮(7)、咖啡酸(8)、齊墩果酸(9)、綠原酸(10)、龍膽酸(11)、沒(méi)食子酸(12)、香草酸(13)。(3)水溶性多糖的分離純化與初級(jí)結(jié)構(gòu)表征將經(jīng)過(guò)分級(jí)萃取的萃余液,先后通過(guò)大孔樹(shù)脂純化、DEAE-52纖維素層析柱分離,流水透析、Sephadex LH-20葡聚糖凝膠色譜篩分,最后真空冷凍干燥得到海紅果酒多糖(MWP-21)。通過(guò)高效凝膠滲透法、離子色譜法、紫外光譜法、紅外光譜分析、甲基化分析和核磁共振分析等手段,對(duì)多糖MWP-21的初級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。結(jié)果表明:多糖MWP-21的相對(duì)分子質(zhì)量為3×10~5Da;單糖組成為半乳糖、葡萄糖和甘露糖,摩爾比為2.2:4.9:1.0;糖鏈由α-1,6-Glcp、α-1,4-Galp、β-1,4,6-Glcp、α-1,3,6-Galp和α-1,2,6-Manp五種糖殘基組成。(4)多糖的抗氧化和抗衰老活性評(píng)價(jià)采用體外抗氧化試驗(yàn)評(píng)價(jià)了海紅果酒多糖清除自由基的作用。結(jié)果表明,海紅果酒粗多糖(MWP)具有清除·OH、·DPPH和~-的作用,并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系�？顾ダ涎芯拷Y(jié)果表明,MWP能顯著降低衰老模型小鼠腦細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化水平,提高抗氧化酶系(SOD、CAT和GPx)的活力,明顯抑制大腦皮質(zhì)的細(xì)胞凋亡。證明MWP可通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力,抑制氧化應(yīng)激,減少大腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡,對(duì)大腦的衰退有一定的遏制作用。(5)多糖的降血糖活性研究以小鼠的體重、血糖和血清中的胰島素含量為指標(biāo),研究了海紅果酒多糖的降血糖活性。以小鼠肝細(xì)胞中的丙二醛(MDA)含量和抗氧化物酶系(SOD、CAT和GPx)活力為指標(biāo),研究了海紅果酒多糖對(duì)肝臟的保護(hù)作用。結(jié)果表明:海紅果酒多糖MWP能降低鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血糖濃度,可顯著抑制糖尿病小鼠的體重的下降,促進(jìn)血清中的胰島素的生成。同時(shí),MWP能顯著降低糖尿病小鼠肝臟丙二醛的水平,提高抗氧化酶(SOD、CAT和GPx)的活力。此外,MWP可有效改善肝組織纖維化、細(xì)胞間隙增大、中央靜脈缺如、假小葉增生等肝損傷的癥狀,具有一定的肝臟保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：陜西科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：TS262.7;O657.63
【圖文】：

旱、抗寒冷、耐薄瘠的特點(diǎn)，在干旱貧瘠的丘陵和溝壑地區(qū)，海紅果僅靠依然可以得到保證[3]，據(jù)報(bào)道，單株盛年的海紅果樹(shù)，年產(chǎn)量可以達(dá)到 30，由于地方政府的大力扶持，海紅果作為一種經(jīng)濟(jì)作物而被大量栽培，谷的種植面積已達(dá) 3.5 萬(wàn)公頃[5]，年產(chǎn)量超過(guò) 6 萬(wàn)噸[6]，成為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民主之一。此外，作為重要的經(jīng)濟(jì)林木，海紅果具有極強(qiáng)的生命力，在當(dāng)?shù)氐暮＜t果大樹(shù)隨處可見(jiàn)，且生機(jī)盎然，最高樹(shù)齡可達(dá) 300 年以上[2]，在培歷史中，這些古老的果樹(shù)保土固沙，對(duì)防止水土流失做出了巨大貢獻(xiàn)生態(tài)環(huán)境。由此可知，海紅果不僅給地方帶來(lái)了經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)也為保護(hù)了貢獻(xiàn)。紅果的植物特性紅果是一種落葉喬木，每年 3 月中旬開(kāi)始萌芽，4 月中旬開(kāi)花，花落結(jié)果綠色，6 月底逐漸由綠變紅，9 月下旬基本紅透，霜降之后，口感更佳，，果樹(shù)進(jìn)入休眠期[7]。

圖 1-2 蘋(píng)果酒和海紅果酒Figure 1-2 Apple wine and Malus micromalus Makino wine酒加工工藝的研究蘋(píng)果酒產(chǎn)業(yè)尚處于發(fā)展階段，在生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵技術(shù)上不成熟，基本產(chǎn)工藝。蘋(píng)果和葡萄屬于不同科植物，果實(shí)之間存在的差異較大，葡和工藝措施并不能完全適合于蘋(píng)果酒的生產(chǎn)。為了改善蘋(píng)果酒的加工過(guò)液態(tài)發(fā)酵法進(jìn)行蘋(píng)果果酒發(fā)酵工藝優(yōu)化研究，得到了色澤淺黃綠、的蘋(píng)果酒。李坤娜[48]通過(guò)響應(yīng)面分析優(yōu)化蘋(píng)果酒的發(fā)酵工藝，確定了、pH 以及接種量等工藝參數(shù)。酒的品質(zhì)和蘋(píng)果的品種有直接的關(guān)系。Oskar Laaksonen 等[49]研究發(fā)成熟度的蘋(píng)果，釀造的蘋(píng)果酒酚類物質(zhì)的含量不同，從而使蘋(píng)果酒的chian Girschik[50]研究分析了 Pink Lady，Royal Gala 和 Red Deliciou釀造成的果酒的可滴定酸度和酚類物質(zhì)的含量，發(fā)現(xiàn) Red Deliciou適合釀酒。用于釀造蘋(píng)果酒的蘋(píng)果，一般果體較小，甜中帶有輕微

60圖 4-8 多糖 MWP-21 的 NMR 譜圖。a)1H-NMR; b)13C-NMR 譜圖Figure 4-8 NMR spectrum of the polysaccharide MWP-21. a)1H-NMR spectrum of MWP-21;b)13C-NMR spectrum of MWP-21殘基 B 的異頭質(zhì)子信號(hào)為 5.10，根據(jù)文獻(xiàn)[175]比較，初步推斷殘基 B 為 1,4-Galp。異頭質(zhì)子信號(hào)位于低場(chǎng)（ 5.10）表明殘基 B 以 -構(gòu)型存在。H-2~H-5 的信號(hào)由1H-1HCOSY 確定，并與文獻(xiàn)[176, 177]比較。碳信號(hào)則由 HSQC 確定。處于低場(chǎng)的 C-1（ 102.27）和 C-4（76.32）信號(hào)表明殘基 B 即為 -1,4-Galp.

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本文編號(hào)：2777011