發(fā)布時間：2020-06-20 01:00

【摘要】：本實驗采用山西小米醋膜為實驗材料,對膜下表面的醋酸菌進行分離純化,經(jīng)形態(tài)學特征觀察、生理生化特性分析及16S rDNA基因序列分析,鑒定出菌株6-5為居間駒形氏桿菌(Komagataeibacter intermedius),菌株M12為萊蒂亞駒形氏桿菌(Komagataeibacter rhaeticus)。兩株醋酸菌都具有產(chǎn)酸和產(chǎn)細菌纖維素的能力,且醋酸菌6-5的耐酒精能力高于醋酸菌M12。對產(chǎn)物膜進行紅外光譜分析,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物膜是纖維素。通過單因素試驗和Box-Behnken試驗設(shè)計優(yōu)化,得出最佳發(fā)酵條件為每1 L梨渣發(fā)酵液中加入葡萄糖35.82 g,檸檬酸4.47 g,接種量9.21%,發(fā)酵溫度30℃,培養(yǎng)周期7d,得到細菌纖維素的預(yù)測產(chǎn)量(干質(zhì)量)為10.97 g/L。通過驗證分析在此條件下細菌纖維素產(chǎn)量為(10.94±0.42)g/L與預(yù)測值吻合度較高,相對誤差為0.27%。采用評估檢驗法對發(fā)酵液進行了感官評分,篩選出5種評分較高的樣品,其中樣品2的評分最高,其次是樣品10、樣品12、樣品14和樣品6。5種發(fā)酵液的總酸含量均大于0.3 g/100mL,可溶性固形物含量均大于3%,表明5種發(fā)酵液均符合果醋飲料的標準要求。樣品2的總酸含量和可溶性固形物最高,分別為3.48 g/100mL和5.7 g/100mL,且樣品2的BC產(chǎn)量也較高,(10.20±0.02)g/L。對梨醋飲料樣品進行電子鼻、電子舌檢測分析,PCA主成分分析和DFA主成分分析,結(jié)果表明5種發(fā)酵液之間存在差別。采用GC-MS分析儀對梨醋飲料樣品2進行了揮發(fā)性成分的檢測,共鑒別出了23種化合物,主要為酸類、醇類和酯類化合物。梨醋飲料的特有香氣成分為苯乙醇、乙酸乙酯、苯乙酸乙酯、乙酸和異戊酸等。細菌纖維素膜分別添加1,3-丁二醇和銀耳多糖,制得BC/1,3-丁二醇復(fù)合膜和BC/銀耳多糖復(fù)合膜,通過抑菌特性分析發(fā)現(xiàn)兩種復(fù)合抑菌膜對金黃色葡萄球菌的抑菌效果較好,當1,3丁二醇的質(zhì)量分數(shù)為5%時,對金黃色葡萄球菌的抑菌圈可達2.292 mm,當銀耳多糖的質(zhì)量分數(shù)為0.3%時,金黃色葡萄球菌液的吸光值為0.045。對于同一濃度的1,3-丁二醇,測得BC凍干膜的負載能力最強,其次是BC濕膜的負載能力、BC烘干膜的負載能力,當1,3-丁二醇的質(zhì)量分數(shù)為5%時,BC凍干膜的負載能力可達5.22mg/cm~2。對BC/銀耳多糖復(fù)合膜的紅外光譜圖進行分析發(fā)現(xiàn)銀耳多糖確實存在于BC網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中。
【學位授予單位】：上海應(yīng)用技術(shù)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：TS209;TS275.4
【圖文】：

（c） （d）圖 2.1 醋酸菌的形態(tài)觀察結(jié)果Fig. 2.1 Morphological observation of acetobactera、c：菌落形態(tài)；b、d：光學顯微鏡圖（×1000）生理生化試驗株 M12 和 6-5 的醋酸菌株分別進行乙酸氧化、乳酸氧化、接觸酶，結(jié)果如表 2.3 所示。兩種菌株的接觸酶、乳酸氧化、產(chǎn)纖維素且都不形成芽孢，而在乙醇氧化、乙酸氧化、淀粉水解試驗等方合《伯杰細菌鑒定手冊》[45]與《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》[46]對兩分析，可初步確定醋酸菌 M12 為萊蒂亞駒形氏桿菌（Komagatae 6-5 為居間駒形氏桿菌（Komagataeibacter intermedius）。

M12 6-5 DNA Ladder Mix maker圖 2.2 醋酸菌的擴增基因片段Fig. 2.2 Amplified gene fragment of acetic acid bacteria列分析CGAACGCTGGCGGCATGCTTAACACATGCAAGTCGCACGAACCTTTTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACATCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGACGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGAAGGGCGCGTAGGCGGTTGTTACAGTCAGATGTGAAATTCCCGGGCGTGATGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATGACTGACGCTGACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCTGTAAACGATGTGTGCT

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本文編號：2721615