綠豆中谷氨酸脫羧酶的性質及結構研究
發(fā)布時間:2024-12-07 01:01
γ-氨基丁酸,別名4-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA),它有很多生理功能并且這些生理功能非常重要。谷氨酸脫羧酶(GAD,EC 4.1.1.15)是γ-氨基丁酸(GABA)的催化酶,可催化L-谷氨酸以產生成γ-氨基丁酸。制備GABA利用植物組織代謝GAD是一個很好的方法和途徑。通過研究我們可以發(fā)現(xiàn),綠豆具有較高的GAD活力。論文中的GAD是從綠豆中分離純化得到的,主要研究的是GAD活性、GAD的分離純化和研究溫度、pH、金屬離子以及試劑這幾個因素對GAD的影響以及對GAD結構影響進行研究,探討綠豆中GAD的活性,為進一步利用綠豆GAD富集產生GABA提供理論基礎。在論文中,用FDNB柱前衍生化法衍生GABA,該反應使用谷氨酸脫羧酶催化L-谷氨酸脫羧生成γ-氨基丁酸的這一反應特性,檢測綠豆中GAD活力。在360 nm下檢測衍生物,使用HPLC Lichrospher C 18色譜柱進行分離樣品,因而可以得到GABA的含量,以及可以得到綠豆組織中的GAD活力;建立了硫酸銨沉淀法、DEAE-Cellulose離子交換色譜法、葡聚糖凝膠Sephadex G-100層析法...
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:4014539
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圖1-1GABA支路和其它代謝途徑之間的關系
文獻綜述11圖1-1GABA支路和其它代謝途徑之間的關系Fig.1-1RelationshipbetweenGABAbranchesandothermetabolicpathways1.4植物中鈣調素在生物體中,Ca2+是生物學功能的關鍵元素。Ca2+和磷酸鹽復合物的形成可以形成....
圖1-2技術路線
文獻綜述131.6研究的主要內容本論文通過構建綠豆GABA含量和GAD酶活性的檢測方法,并采用硫酸銨沉淀法、離子交換色譜、葡聚糖凝膠分離等方法構建分離純化工藝體系,進而得到酶活較高且成分單一的綠豆GAD組分;考察了不同條件對硫酸銨鹽析GAD蛋白樣品的沉淀效果的影響,對純化后的綠豆....
圖3-1(NH4)2SO4濃度對綠豆谷氨酸脫羧酶分離效果的影響
結果與分析223.結果與分析3.1綠豆GAD的分離純化3.1.1(NH4)2SO4分級沉淀3.1.1.1不同(NH4)2SO4濃度對綠豆GAD酶分離效果的影響用飽和度不同的(NH4)2SO4(硫酸銨)將提取液中的谷氨酸脫羧酶沉淀,取上清液,透析后測定殘留的谷氨酸脫羧酶的酶活力,測....
圖3-2沉淀時間對綠豆谷氨酸脫羧酶分離效果的影響
綠豆中谷氨酸脫羧酶的性質及結構研究233.1.1.2沉淀時間對綠豆GAD酶分離效果的影響圖3-2沉淀時間對綠豆谷氨酸脫羧酶分離效果的影響Figure3-2EffectofprecipitationtimeonmungbeanontheactivityofmungbeanGAD由圖....
本文編號:4014539
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