L-天冬氨酸是組成蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)氨基酸之一,在食品、醫(yī)藥和化工等領(lǐng)域都有普遍的應(yīng)用。目前,主要依靠化學(xué)合成法生產(chǎn)L-天冬氨酸,此方法存在環(huán)境污染大、生產(chǎn)條件苛刻、產(chǎn)品純度低等缺點(diǎn),嚴(yán)重限制了其在食品醫(yī)藥中的應(yīng)用。相比較而言,生物酶催化轉(zhuǎn)化法具有環(huán)境污染小、專一性強(qiáng)、產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn),因此,生物酶催化轉(zhuǎn)化法的應(yīng)用前景更光明。而雙酶偶聯(lián)全細(xì)胞催化,不僅不需要酶的分離純化和中間產(chǎn)物的分離提純,還便于細(xì)胞的回收重復(fù)利用,提高細(xì)胞利用率,極大降低生產(chǎn)成本�；诖�,本研究通過構(gòu)建馬來酸順反異構(gòu)酶和L-天冬氨酸裂解酶雙酶偶聯(lián)表達(dá)的重組大腸桿菌,然后以全細(xì)胞催化馬來酸合成L-天冬氨酸。主要研究結(jié)果如下:(1)成功構(gòu)建了6種不同的MaiA與AspA雙酶偶聯(lián)表達(dá)體系,通過比較6株重組菌的共表達(dá)效果和催化效率,獲得最佳的菌株pMA2(pRSF_Duet-1-maiA-aspA)。然后將pMA2按20%靜息細(xì)胞(OD₆₀₀為40)和80%底物的反應(yīng)體系,在pH 8.0、37℃、200r·min^-1條件下全細(xì)胞催化不同濃度馬來酸(1.6、2.4、3....

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖1-1L-天冬氨酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1-1ChemicalstructureofL-Asp

圖1-1L-天冬氨酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)式Fig.1-1ChemicalstructureofL-Asp種大宗氨基酸產(chǎn)品，其在食品、醫(yī)藥和化氨酸是酸度較高的酸味氨基酸，故其可用的兩個羧基使其容易形成天冬氨酸鹽，天有增鮮作用，還能夠緩解疲勞[1]；L-天冬度極高，熱量卻很低，口感....

圖1-2E.coliAspA的晶體結(jié)構(gòu)

圖1-2E.coliAspA的晶體結(jié)構(gòu)Fig.1-2CrystalstructureofE.coliAspA始于20世紀(jì)初，AspA最早由Harden和Quastel等pA的研究得到迅速地發(fā)展，Ellfolk等于1953年相AspA的....

圖1-4S.marcescensMaiA的三級結(jié)構(gòu)

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文鍵并不斷裂[22]，催化過程如圖1-3。MaiA屬于天e/FumaraseSuperfamily）的成員[23]。粘質(zhì)沙雷氏菌來bp，酶分子是由兩個相同的亞基構(gòu)成的二聚體，單源建模其三級結(jié)構(gòu)如圖1-4。圖1-3MiaA的催化機(jī)制Fig.1-3Me....

圖1-3MiaA的催化機(jī)制

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文物的碳碳雙鍵并不斷裂[22]，催化過程如圖1-3。MaiA屬于天冬氨酸酶/富（Aspartase/FumaraseSuperfamily）的成員[23]。粘質(zhì)沙雷氏菌來源的MaiA全長753bp，酶分子是由兩個相同的亞基構(gòu)成的二聚體，單亞基的分子右[....

本文編號：3959730