中長鏈脂肪酸甘油三酯的酶法制備及對小鼠脂代謝的影響
發(fā)布時間:2022-02-13 17:20
油脂是人類膳食中重要的組成部分,一方面為機體提供能量,另一方面發(fā)揮著特殊的健康作用。近年來,過多的攝入脂肪和其他的不良生活習(xí)慣會導(dǎo)致肥胖,進而引起一系列的疾病。中長鏈脂肪酸甘油三酯(Medium-and long-chain triacylglycerols,MLCT)是一類特殊的結(jié)構(gòu)脂質(zhì),可以為機體供能的同時避免脂肪堆積。市場上的MLCT大多是以辛癸酸為原料合成的,且沒有特定的分子結(jié)構(gòu)。本研究以月桂酸、棕櫚硬脂和藻油為原料,酶法合成兩種MLM型(Middle-long-middle,MLM)MLCT,分別是富含1,3-二月桂酸-2-棕櫚酸甘油三酯(1,3-lauric-2-palmitoylglycerol,LaPLa)和富含月桂酸及二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)的MLCT。并通過動物實驗研究富含LaPLa的MLCT對小鼠脂代謝的影響。研究的主要結(jié)果如下:(1)富含LaPLa的MLCT酶法制備及理化性質(zhì)分析:以LaPLa的含量為指標,利用sn-1,3位特異性脂肪酶催化月桂酸酸解棕櫚硬脂合成目的產(chǎn)物。比較了三種脂肪酶(RM IM、TL IM、AO I...
【文章來源】:河北科技大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同鏈長的脂肪酸甘油三酯的代謝過程
河北科技大學(xué)碩士學(xué)位論文14脂肪酸種類較少,不含有月桂酸,其棕櫚酸的含量達到73.71%,sn-2位上的棕櫚酸含量也達到了66.83%。這種sn-2位上含有大量棕櫚酸的特殊結(jié)構(gòu),成為能合成高含量的LaPLa的基矗根據(jù)脂肪酸組成和含量,計算出棕櫚硬脂平均分子摩爾質(zhì)量為826.06。理化性質(zhì)中過氧化值和酸價符合食用油標準,該棕櫚硬脂可以使用。表2-1棕櫚硬脂脂肪酸組成脂肪酸種類總脂肪含量(%)Sn-2位脂肪酸含量(%)C14:00.90±0.02-C16:073.71±0.1366.83±0.24C18:04.41±0.032.84±0.04C18:117.12±0.0522.64±0.14C18:23.52±0.067.69±0.06其他0.25±0.02-2.2.2富含LaPLa的MLCT酶法制備2.2.2.1合成富含LaPLa的MLCT的酶篩選反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8(棕櫚硬脂:月桂酸),酶載量8%(w/w),溫度60℃,恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp,反應(yīng)達到LaPLa含量不再顯著性增加。圖2-13種脂肪酶對富含LaPLa的MLCT合成的影響。脂肪酶的選取原則首先是活性強,其次是能達到特殊的反應(yīng)要求,如本研究是將月桂酸盡可能的摻入甘油三酯的sn-1,3位。原料中使用的是熔點為58℃棕櫚硬脂,所以將3種酶的溫度都設(shè)在60℃,其他條件也一致。由圖2-1可以看出,3種酶表現(xiàn)出了不同的活力和反應(yīng)程度,即反應(yīng)速率和終產(chǎn)物含量。其中TLIM酶的活力和反應(yīng)程度最低,LaPLa含量上升速度較慢,在最后反應(yīng)達到平衡(LaPLa含量不再顯著性升高)時,其LaPLa含量較低,約為(22.51±0.41)%。RMIM和AOIM兩
第2章富含LaPLa的MLCT酶法制備及理化性質(zhì)分析15種酶在反應(yīng)達到平衡時,其LaPLa含量沒有顯著性差異,分別是(32.78±0.50)%和(32.38±0.30)%,但前者的反應(yīng)時間要遠遠長于后者,分別是8h和4h,AOIM表現(xiàn)出了很高的催化效率。在這里需要注意的是,AOIM隨著反應(yīng)的進行,LaPLa含量會下降,這是因為有三月桂酸甘油酯(LaLaLa)的生成。試驗中,當LaPLa含量趨于平衡時,隨著反應(yīng)繼續(xù)進行,LaLaLa開始生成且含量越來越高,這可能是因為反應(yīng)過程中出現(xiàn)了酰基遷移,以及過高的月桂酸影響了脂肪酶特異性,與Zhang[71]的實驗結(jié)果相符合,下文工藝優(yōu)化中LaPLa含量最后下降也是這個原因。綜合來看,控制好反應(yīng)時間,AOIM性能優(yōu)異,可以滿足此合成工藝,后期工藝優(yōu)化選取AOIM作為生物催化劑。2.2.2.2合成工藝條件對LaPLa含量的影響(1)反應(yīng)溫度對LaPLa含量的影響棕櫚硬脂與月桂酸混合,使整個反應(yīng)體系熔點降低,在50℃下也能熔融。溫度一方面會影響體系的粘度,進而影響分子之間的相互作用,另一方面會影響酶的活力[72]。由圖2-2的反應(yīng)曲線可以看出,隨著溫度從50℃不斷地提高,酶的活力越來越強,反應(yīng)達到平衡所用的時間越來越短,65℃時達到頂值,為3h,此溫度下酶的活力最強。當達到70℃時酶的活力下降,反應(yīng)平衡時間延長,反應(yīng)速率降低。這可能是因為溫度過高,使部分酶失活,整體催化能力降低。所以65℃下可以得到更高LaPLa含量的MLCT,同時反應(yīng)時間最短,選擇65℃作為酶催化合成試驗的下一步試驗的溫度條件。反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8(棕櫚硬脂:月桂酸),酶載量4%(w/w),反應(yīng)溫度分別為50℃、55℃、60℃、65℃、70℃,恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp,反應(yīng)時間8h。圖2-2反應(yīng)溫度對LaPLa含量的影響。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]血管性血友病因子基因敲除可抑制高脂喂養(yǎng)小鼠附睪脂肪的含量和炎癥反應(yīng)[J]. 陸艷,楊娟,汪海東. 老年醫(yī)學(xué)與保健. 2019(06)
[2]酶法催化酸解合成富含OPO的人乳替代脂[J]. 鄒碩,王笑寒,王小三,金青哲,王興國. 中國油脂. 2019(12)
[3]11β-HSD1抑制劑BVT.2733對肥胖小鼠多器官組織代謝與炎癥相關(guān)基因表達的影響[J]. 尹立平,王龍,呂珊,鐘毅,丁國憲,劉娟. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019(12)
[4]人類母乳中一種化合物能對抗致病菌[J]. 中國食品學(xué)報. 2019(10)
[5]SLGT-2抑制劑在糖尿病脂肪肝患者的治療中對血清瘦素水平的作用觀察[J]. 王麗娜,周林. 中醫(yī)臨床研究. 2019(30)
[6]肥胖動物模型的研究及應(yīng)用[J]. 駱文錦,陳香均,馬林強,吳金姍,汪志紅. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019(10)
[7]慢性腎臟病與肥胖相關(guān)性的研究進展[J]. 金海峰. 中華腎病研究電子雜志. 2019(04)
[8]月桂酸單甘油酯在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用效果及其機制的研究進展[J]. 吳勝,彭艷. 飼料研究. 2019(08)
[9]酶法合成中長碳鏈甘油三酯[J]. 徐文迪,繆智誠,王小三,金青哲,王興國. 中國油脂. 2019(08)
[10]糖尿病相關(guān)研究進展[J]. 張爭輝,薛愛芹,于蘭. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2019(20)
碩士論文
[1]Sn-1,3專一性脂肪酶的固定化及其在結(jié)構(gòu)油脂OPO合成中的應(yīng)用[D]. 李陽.浙江大學(xué) 2015
本文編號:3623601
【文章來源】:河北科技大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
不同鏈長的脂肪酸甘油三酯的代謝過程
河北科技大學(xué)碩士學(xué)位論文14脂肪酸種類較少,不含有月桂酸,其棕櫚酸的含量達到73.71%,sn-2位上的棕櫚酸含量也達到了66.83%。這種sn-2位上含有大量棕櫚酸的特殊結(jié)構(gòu),成為能合成高含量的LaPLa的基矗根據(jù)脂肪酸組成和含量,計算出棕櫚硬脂平均分子摩爾質(zhì)量為826.06。理化性質(zhì)中過氧化值和酸價符合食用油標準,該棕櫚硬脂可以使用。表2-1棕櫚硬脂脂肪酸組成脂肪酸種類總脂肪含量(%)Sn-2位脂肪酸含量(%)C14:00.90±0.02-C16:073.71±0.1366.83±0.24C18:04.41±0.032.84±0.04C18:117.12±0.0522.64±0.14C18:23.52±0.067.69±0.06其他0.25±0.02-2.2.2富含LaPLa的MLCT酶法制備2.2.2.1合成富含LaPLa的MLCT的酶篩選反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8(棕櫚硬脂:月桂酸),酶載量8%(w/w),溫度60℃,恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp,反應(yīng)達到LaPLa含量不再顯著性增加。圖2-13種脂肪酶對富含LaPLa的MLCT合成的影響。脂肪酶的選取原則首先是活性強,其次是能達到特殊的反應(yīng)要求,如本研究是將月桂酸盡可能的摻入甘油三酯的sn-1,3位。原料中使用的是熔點為58℃棕櫚硬脂,所以將3種酶的溫度都設(shè)在60℃,其他條件也一致。由圖2-1可以看出,3種酶表現(xiàn)出了不同的活力和反應(yīng)程度,即反應(yīng)速率和終產(chǎn)物含量。其中TLIM酶的活力和反應(yīng)程度最低,LaPLa含量上升速度較慢,在最后反應(yīng)達到平衡(LaPLa含量不再顯著性升高)時,其LaPLa含量較低,約為(22.51±0.41)%。RMIM和AOIM兩
第2章富含LaPLa的MLCT酶法制備及理化性質(zhì)分析15種酶在反應(yīng)達到平衡時,其LaPLa含量沒有顯著性差異,分別是(32.78±0.50)%和(32.38±0.30)%,但前者的反應(yīng)時間要遠遠長于后者,分別是8h和4h,AOIM表現(xiàn)出了很高的催化效率。在這里需要注意的是,AOIM隨著反應(yīng)的進行,LaPLa含量會下降,這是因為有三月桂酸甘油酯(LaLaLa)的生成。試驗中,當LaPLa含量趨于平衡時,隨著反應(yīng)繼續(xù)進行,LaLaLa開始生成且含量越來越高,這可能是因為反應(yīng)過程中出現(xiàn)了酰基遷移,以及過高的月桂酸影響了脂肪酶特異性,與Zhang[71]的實驗結(jié)果相符合,下文工藝優(yōu)化中LaPLa含量最后下降也是這個原因。綜合來看,控制好反應(yīng)時間,AOIM性能優(yōu)異,可以滿足此合成工藝,后期工藝優(yōu)化選取AOIM作為生物催化劑。2.2.2.2合成工藝條件對LaPLa含量的影響(1)反應(yīng)溫度對LaPLa含量的影響棕櫚硬脂與月桂酸混合,使整個反應(yīng)體系熔點降低,在50℃下也能熔融。溫度一方面會影響體系的粘度,進而影響分子之間的相互作用,另一方面會影響酶的活力[72]。由圖2-2的反應(yīng)曲線可以看出,隨著溫度從50℃不斷地提高,酶的活力越來越強,反應(yīng)達到平衡所用的時間越來越短,65℃時達到頂值,為3h,此溫度下酶的活力最強。當達到70℃時酶的活力下降,反應(yīng)平衡時間延長,反應(yīng)速率降低。這可能是因為溫度過高,使部分酶失活,整體催化能力降低。所以65℃下可以得到更高LaPLa含量的MLCT,同時反應(yīng)時間最短,選擇65℃作為酶催化合成試驗的下一步試驗的溫度條件。反應(yīng)條件:底物摩爾比1:8(棕櫚硬脂:月桂酸),酶載量4%(w/w),反應(yīng)溫度分別為50℃、55℃、60℃、65℃、70℃,恒溫水浴振蕩器轉(zhuǎn)速200rmp,反應(yīng)時間8h。圖2-2反應(yīng)溫度對LaPLa含量的影響。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]血管性血友病因子基因敲除可抑制高脂喂養(yǎng)小鼠附睪脂肪的含量和炎癥反應(yīng)[J]. 陸艷,楊娟,汪海東. 老年醫(yī)學(xué)與保健. 2019(06)
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[3]11β-HSD1抑制劑BVT.2733對肥胖小鼠多器官組織代謝與炎癥相關(guān)基因表達的影響[J]. 尹立平,王龍,呂珊,鐘毅,丁國憲,劉娟. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019(12)
[4]人類母乳中一種化合物能對抗致病菌[J]. 中國食品學(xué)報. 2019(10)
[5]SLGT-2抑制劑在糖尿病脂肪肝患者的治療中對血清瘦素水平的作用觀察[J]. 王麗娜,周林. 中醫(yī)臨床研究. 2019(30)
[6]肥胖動物模型的研究及應(yīng)用[J]. 駱文錦,陳香均,馬林強,吳金姍,汪志紅. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019(10)
[7]慢性腎臟病與肥胖相關(guān)性的研究進展[J]. 金海峰. 中華腎病研究電子雜志. 2019(04)
[8]月桂酸單甘油酯在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用效果及其機制的研究進展[J]. 吳勝,彭艷. 飼料研究. 2019(08)
[9]酶法合成中長碳鏈甘油三酯[J]. 徐文迪,繆智誠,王小三,金青哲,王興國. 中國油脂. 2019(08)
[10]糖尿病相關(guān)研究進展[J]. 張爭輝,薛愛芹,于蘭. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2019(20)
碩士論文
[1]Sn-1,3專一性脂肪酶的固定化及其在結(jié)構(gòu)油脂OPO合成中的應(yīng)用[D]. 李陽.浙江大學(xué) 2015
本文編號:3623601
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