C-藻藍(lán)蛋白作為一種卟啉類色素蛋白是螺旋藻中重要的功能活性成分,在天然色素、天然藥物、生化試劑等領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。但其在存儲環(huán)境中易發(fā)生褪色穩(wěn)定性降低,鮮有報道C-藻藍(lán)蛋白在發(fā)生褪色失穩(wěn)時其他功能活性有何變化。本文探究了不同環(huán)境因素對鈍頂螺旋藻C-藻藍(lán)蛋白光學(xué)特性及生物活性的影響,全面評價其穩(wěn)定性,為其應(yīng)用條件及基礎(chǔ)研究的深入作參考。主要研究結(jié)果如下:環(huán)境因素p H、溫度、光照及蛋白質(zhì)干擾劑,均對C-藻藍(lán)蛋白光學(xué)特性有顯著影響。p H10、溫度（≥70℃）、鹽酸胍（≥1 mol/L）、乙醇（≥50%,V/V）以及SDS（≥1%,W/V）等條件下,C-藻藍(lán)蛋白色素保留率、熒光強(qiáng)度均下降超過40%,發(fā)生嚴(yán)重褪色。光照強(qiáng)度及時間的增加可使C-藻藍(lán)蛋白光學(xué)特性指標(biāo)下降且紅、藍(lán)波段光源對其影響最大。研究表明在p H6-7、溫度4-30℃、黑暗避光條件下C-藻藍(lán)蛋白光學(xué)特性指標(biāo)變化均小于15.12%,能保持相對穩(wěn)定范圍。由第二章實(shí)驗基礎(chǔ)、于褪色因素下評價C-藻藍(lán)蛋白對DPPH及ABTS自由基清除能力。隨溫度上升C-藻藍(lán)蛋白對兩種自由基清除能力均呈先上升后下降,且其抗氧化活性與色澤（色素保留率、... 

【文章來源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

藻膽體的結(jié)構(gòu)[3]

β鏈型球蛋白通過硫醚鍵與藻藍(lán)膽素共價連接，α鏈通過第84位半胱氨酸與一個藻藍(lán)膽素結(jié)合，β鏈分別在第84位和155位與兩個藻藍(lán)膽素連接，兩條鏈均具有α螺旋結(jié)構(gòu)[17]。所有不同來源的藻藍(lán)蛋白的結(jié)構(gòu)均是相似的，它們的α及β亞基構(gòu)成單體并形成三聚體（α3β3）或六聚體（α6β6）形式，聚集體是C-藻藍(lán)蛋白的功能形式[18]。其亞基的分子量取決于藻類的來源以及提取和純化的方法[3]。α亞基一般為13-20.5kDa，β亞基為11-24.4kDa。三維結(jié)構(gòu)分析中可知，三聚體結(jié)構(gòu)呈圓盤狀，直徑為11nm，厚度為3nm，中心腔直徑為3.5nm[19]。圖1-2C-藻藍(lán)蛋白分子結(jié)構(gòu)示意圖[3]Fig.1-2SchematicdiagramofC-phycocyaninmolecularstructure

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文C-藻藍(lán)蛋白光學(xué)特性與生物活性的穩(wěn)定性研究13收波長285nm和277nm處對光輻射有吸收。根據(jù)相關(guān)研究峰360nm處為其四吡咯結(jié)構(gòu)吸收部位，可見光區(qū)620nm附近為C-藻藍(lán)蛋白的特征吸收峰，發(fā)色團(tuán)部分共軛體系在該處具有強(qiáng)烈的光吸收，從而使其表現(xiàn)出鮮亮的蔚藍(lán)色，故峰620nm附近可反映其發(fā)色團(tuán)結(jié)構(gòu)的破壞程度及其色素保留程度。圖2-1C-藻藍(lán)蛋白樣品的吸收光譜Fig.2-1TheUV-visibleabsorptionspectrumofC-phycocyanin2.4.2.2C-藻藍(lán)蛋白熒光光譜特征C-藻藍(lán)蛋白由于其特殊的發(fā)色基團(tuán)結(jié)構(gòu)，自身具有熒光性質(zhì)，在620nm左右波長激發(fā)下，在635~650nm之間會出現(xiàn)強(qiáng)的熒光峰。通過實(shí)驗由熒光三維掃描圖2-2（a）得到C-藻藍(lán)蛋白樣品特征熒光峰相關(guān)數(shù)據(jù)，得其最大激發(fā)波長EX：620nm，最大發(fā)射波長EM：644nm，因此后續(xù)實(shí)驗中樣品熒光發(fā)射光譜（如圖2-2（b））均在最大激發(fā)波長620nm條件下測定。（a）（b）圖2-2C-藻藍(lán)蛋白溶液三維熒光掃描光譜（a）與激發(fā)波長620nm處發(fā)射光譜（b）Fig.2-23Dfluorescencescanningspectrum(a)andemissionspectrum(b)at620nmofC-phycocyaninsolution

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]薏苡仁糠油提取及對A549和RD細(xì)胞體外抗腫瘤作用研究[D]. 殷敏俠.江南大學(xué) 2018
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[3]新型C-PC/CMC-CD59sp納米微球的制備及其對HeLa細(xì)胞的靶向抗腫瘤研究[D]. 楊鵬.青島大學(xué) 2016
[4]藍(lán)隱藻藻藍(lán)蛋白結(jié)構(gòu)及功能研究[D]. 李文軍.煙臺大學(xué) 2013
[5]含碲藻膽蛋白的純化及藻藍(lán)蛋白酶解多肽的抗氧化活性研究[D]. 蔣潔.暨南大學(xué) 2011
[6]鈍頂螺旋藻藻藍(lán)蛋白及其酶解產(chǎn)物的抗腫瘤活性研究[D]. 范敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]光學(xué)活性重組別藻藍(lán)蛋白的初步研究[D]. 楊雨.中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2007
[8]天然藻膽蛋白的提取與純化及其與基因重組藻膽蛋白抗氧化活性的比較研究[D]. 王庭健.吉林大學(xué) 2005



本文編號：3559472