發(fā)布時間：2021-11-01 08:03

　　PeaT1蛋白是從極細鏈格孢菌（Alternaria tenuissima）中提取的一種蛋白激發(fā)子,能誘導(dǎo)多種作物產(chǎn)生系統(tǒng)獲得抗性。試驗表明PeaT1蛋白制劑對水稻、小麥、白菜、芹菜等都具有明顯的促生長、增產(chǎn)、提高果實品質(zhì)和抗病抗逆的效果。為規(guī)模化生產(chǎn)穩(wěn)定的PeaT1蛋白制劑,對其工廠化生產(chǎn)發(fā)酵技術(shù)進行了深入研究。根據(jù)極細鏈格孢菌的營養(yǎng)需求,通過正交設(shè)計試驗對該菌的培養(yǎng)基進行了改進和優(yōu)化,并進行了500L、5T和20T發(fā)酵罐的逐級發(fā)酵,獲得了理想的蛋白制劑產(chǎn)品。使用高效液相色譜法、電泳法和比色法對制劑中的蛋白進行了定性和定量檢測,并進行了蛋白制劑和復(fù)配配方的室內(nèi)生測,具體研究結(jié)果如下:1.優(yōu)化了PeaT1蛋白工廠化生產(chǎn)的培養(yǎng)基配方。本文通過對蛋白激發(fā)子PeaT1的工廠化生產(chǎn)工藝研究,將極細鏈格孢菌的實驗室級發(fā)酵培養(yǎng)進行了進一步優(yōu)化,通過正交試驗確定了配方:木薯粉3.5%、黃豆粉1%、蔗糖0.5%、蛋白胨0.5%、味精0.5%、硫酸銨0.2%、硫酸亞鐵0.02%、硫酸鎂0.02%。2.實現(xiàn)了500L、5000L和20000L發(fā)酵罐發(fā)酵參數(shù)的逐級放大。對500L、5T和20T發(fā)酵罐發(fā)酵參數(shù)... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

00L罐發(fā)酵參數(shù)及菌絲顯微鏡鏡檢圖

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第二章 PeaT1規(guī)模化發(fā)酵工藝的優(yōu)化發(fā)酵時長(h) 溫度（℃） pH 值 溶氧量（%）24 29.2 6.24 23.825 29.2 6.24 26.826 29.1 6.24 28.82.2.3.2 二級發(fā)酵參數(shù)的工藝控制在 5T 罐發(fā)酵 26h 的過程中，對發(fā)酵罐內(nèi)的溶氧值（DO 值）、溫度和 pH 值進行實時監(jiān)控，將每小時的各項參數(shù)記錄下來繪制成散點圖。通過 5T 發(fā)酵罐的發(fā)酵參數(shù)變化趨勢可以看出：發(fā)酵過程中 pH 值變化不大，發(fā)酵開始時 pH值為 6.71，發(fā)酵結(jié)束時 pH 值為 6.24；DO 值前期平穩(wěn)，從第 20h 開始迅速下降。

圖 2.3 20T 罐發(fā)酵參數(shù)及菌絲顯微鏡鏡檢圖Fig 2.3 Fermentation parameters in 20T and mycelial morphology micrography2.3 討論2.3.1 逐級發(fā)酵中發(fā)酵條件的改進通過 500L 發(fā)酵罐、5T 發(fā)酵罐和 20T 發(fā)酵罐的發(fā)酵試驗，經(jīng)過不斷摸索得到了極細鏈格孢菌工廠化生產(chǎn)的條件。在試驗過程中，通過小試和中試，得到了逐級發(fā)酵的發(fā)酵參數(shù)。采用培養(yǎng)基配方：木薯粉 3.5%、黃豆粉 1%、蔗糖 0.5%、蛋白胨 0.5%、味精 0.5%、硫酸銨 0.2%、硫酸亞鐵0.02%、硫酸鎂 0.02%。在實際生產(chǎn)過程中，二級發(fā)酵完成后，5T 罐內(nèi)的發(fā)酵液足夠分成兩份移入兩個 20T 罐中，接種量能達到 10%，這樣操作比只轉(zhuǎn)入一個 20T 罐，在生產(chǎn)效率上提高了一倍，大大降低能耗。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3469809