2S白蛋白（2S albumin）是一種廣泛分布于植物種子中的低分子量儲藏蛋白。該蛋白含有8個保守半胱氨酸殘基,根據自身特性可形成兩個分子間二硫鍵和兩個分子內二硫鍵,使所屬蛋白質具有穩(wěn)定和緊密的結構,而且該蛋白具有較好的熱穩(wěn)定性。該蛋白家族成員具有多種功能,包括抗菌、抗癌、蛋白酶抑制劑和植物防御功能等。牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）是我國特有的一種極具觀賞價值和藥用價值的芍藥屬灌木,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗凝血、降血糖等功效。牡丹籽粕作為牡丹籽榨油后的副產物,含有豐富的功能性物質,其中蛋白質是主要的功能成分之一,含量約30%左右。對牡丹籽粕功能蛋白的研究,不僅能豐富牡丹籽蛋白的基礎研究,而且有助于提高籽粕的附加值,延長牡丹籽的產業(yè)鏈。本文以牡丹籽粕為原料,從牡丹籽粕水溶性蛋白（PSMP）中分離純化出一種牡丹類2S白蛋白（Ps-2S-Alb）,利用質譜和從頭測序技術進行鑒定,利用生物信息學手段對其結構進行了分析,同時研究了其抗氧化活性。具體內容如下:1. 牡丹籽粕水溶性蛋白提取工藝研究。以脫脂牡丹籽粕粉為原料,采用水提法提取PSMP。分別研究了提取液濃度、... 

【文章來源】：西北大學陜西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

測定蛋白含量標準曲線圖

第三章結果與討論23第三章結果與討論3.1牡丹籽粕水溶性蛋白的提取牡丹籽粕中含有20-30%的粗蛋白，是優(yōu)質的植物蛋白質來源。從牡丹籽粕中提取蛋白質，不僅可以解決植物蛋白資源短缺的問題，同時還可以實現牡丹籽粕的綜合利用，提高牡丹經濟價值。采用稀鹽和緩沖系統的水溶液是提取蛋白質最常用的方法，該方法具有對蛋白質穩(wěn)定性好、溶解度大、可保存被蛋白質生物活性等優(yōu)點。影響蛋白質提取率的因素主要有：溫度、鹽濃度、料液比、勻漿時間等。本文主要考察提取液濃度、料液比和勻漿時間對蛋白提取率的影響，通過優(yōu)化條件來提高蛋白質的提取率。3.1.1單因素試驗(1)料液比對蛋白提取率的影響。結果見圖3-1，料液比在1:16~1:4范圍內，PSMP的提取率隨料液比的增大呈現先增大后減小的趨勢，當料液比達到1:8時，提取率最大為40.53%。隨著料液比繼續(xù)增大，蛋白提取率呈現下降的趨勢，該現象是由于在低料液比時，牡丹籽粕粉粘稠，無法與水充分混合，分子運動和擴散能力較差，溶解能力較低，牡丹籽粕中的蛋白質較難分離出來。因此最終確定提取PSMP最佳料液比為1:8。圖3-1料液比對PSMP提取率的影響Fig.3-1Effectofsolid-to-liquidratioonextractionrateofPSMP(2)勻漿時間對蛋白提取率的影響。如圖3-2所示，在勻漿時間為60~180s內，PSMP的提取率先增大后減校在勻漿時間為120s時，PSMP提取率達到最大為51.28%。當

西北大學碩士學位論文24繼續(xù)增加勻漿時間時，PSMP提取率會逐漸降低，這可能是由于勻漿時間太長，勻漿機刀片發(fā)熱而導致部分蛋白質變性聚沉，而造成蛋白提取率降低。故確定120s為最佳勻漿時間。圖3-2勻漿時間對PSMP提取率的影響Fig.3-2EffectofextractiontimeontheextractionrateofPSMP(3)提取液濃度對蛋白提取率的影響。在其他因素相同的條件下，考察不同提取液PBS濃度對PSMP提取率的影響。結果如圖3-3所示，在PBS濃度為0.01~0.05mol/L范圍內，PSMP提取率先增大后減校當PBS濃度為0.015mol/L時，PSMP提取率最大為41.04%。當PBS濃度繼續(xù)增大時，蛋白質提取率呈負相關。這可能是由于在蛋白質水溶液中，加入少量的中性鹽，會增加蛋白質分子表面的電荷，從而使蛋白質在水溶液中的溶解度增大，因此PSMP在低濃度PBS中溶解度較高，故最佳提取液PBS濃度選擇0.015mol/L。圖3-3提取液濃度對PSMP提取率的影響Fig.3-3EffectofextractconcentrationontheextractionrateofPSMP


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