發(fā)布時間：2021-08-10 01:33

　　α-熊果苷（α-Arbutin,α-Ar）是一種安全且高效的美白活性物質(zhì),通過抑制酪氨酸酶的活性,阻斷黑色素合成,達(dá)到美白的功效。目前α-Ar主要的生產(chǎn)方法是微生物和酶轉(zhuǎn)化法,催化一分子葡萄糖和一分子對苯二酚（HQ）來合成。由于底物HQ具有細(xì)胞毒性,當(dāng)其濃度過高時會導(dǎo)致細(xì)胞凋亡從而降低α-Ar產(chǎn)量。本課題構(gòu)建了一個底物和細(xì)胞雙固定化的反應(yīng)體系,一方面將HQ負(fù)載在磁性殼聚糖微球（Fe3O4@CTS）載體上,通過緩釋作用來降低反應(yīng)過程中游離HQ的濃度,以達(dá)到減小其對微生物細(xì)胞的毒性及底物能夠持續(xù)轉(zhuǎn)化的目的,反應(yīng)結(jié)束后,通過外加磁場可以對載體進(jìn)行快速分離;另一方面選用吸附法和包埋法對細(xì)胞進(jìn)行固定,固定化細(xì)胞可進(jìn)行多次重復(fù)使用。主要研究內(nèi)容如下:（1）底物固定化載體磁性殼聚糖微球的制備及其對HQ的負(fù)載:首先通過氧化水熱法制備出了直徑為30-40 nm的Fe3O納米粒子,然后通過乳化交聯(lián)法制備Fe3O4@CTS微球,經(jīng)FTIR紅外表征獲得席夫堿鍵（C=N）和Fe-O鍵的特征吸收峰,可以證明Fe3O4@CTS制備成功。通過振動樣品磁強(qiáng)計(jì)（VSM）分析了 Fe3O4納米粒子和Fe3O4@CTS微球的... 

【文章來源】：北京化工大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ａ－Ａｒ結(jié)構(gòu)［３】??３

活性的作用，但是ａ－Ａｒ的美??白效果可以達(dá)到Ｐ－Ａｒ的１０倍以上％且不抑制人黑素瘤細(xì)胞ＨＭＶ－ＩＩ的生長％說明??其在化妝品中的應(yīng)用是有效且安全的，市場價值更高，受到研宄者們的青睞。??麵??多巴??！?ｍ?ｍｍ?４??多ｇ瑕ＪＳＩＨＳ谷胱甘狀多巴??多巴色索?谷賊ｇＫ多巴??５．６－二Ｓ基吲哚?５，６－二羥基吲〇？按酸?谷抗ＳＫ多巴現(xiàn)??＊＊＊＊＊?Ｊ?Ｊ?胸??５．６－Ｂ５ＩＷ？?５，６？吲?Ｋｊｅｍ?酸?揭變素??＼，?１??真黑索??？混合黒素??圖１－２黑色素合成路徑??Ｆｉｇ．?１－２?Ｍｅｌａｎｉｎ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｐａｔｈｗａｙ??１．２．２?ａ－熊果苷的合成方法??早期從植物中通過萃娶分餾、過濾等手段分離得到的熊果苷多為ｐ－Ａｒ，且分離??難度大、產(chǎn)物純度低，如今己經(jīng)被化學(xué)合成法和生物合成法所取代［ｉｅ］。主要的合成方??法有有機(jī)合成法、植物組織培養(yǎng)法、酶合成法以及微生物轉(zhuǎn)化法，其中有機(jī)合成法和??植物組織培養(yǎng)法主要用于合成卩－Ａｒ，而ａ－Ａｒ通過酶法和微生物轉(zhuǎn)發(fā)法合成［｜１］。??（１）酶法生產(chǎn)ａ－Ａｒ??酶法生產(chǎn)ａ－Ａｒ通常是利用不同的糖基轉(zhuǎn)移酶和糖苷酶催化ＨＱ和不同的葡糖基??供體底物合成，常用的有蔗糖磷酸化酶、ａ－淀粉酶、環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶、ａ－葡萄糖苷??酶、右旋蔗糖酶、淀粉蔗糖酶以及蔗糖異構(gòu)酶［３，１２］，通過糖基轉(zhuǎn)移反應(yīng)和逆水解反應(yīng)??兩種途徑合成。其中鹿糖憐酸酶是用于催化合成ａ－Ａｒ的第一種酶，Ｋｉｔａｏ和Ｓｅｋｉｎｅ［１３］??２??

?北京化工大學(xué)碩士學(xué)位論文???５０００００００－１???４０００００００－??３０００００００－??？ｎ??２?，？??ｍ?，??？?２０００００００－?，，??Ｘ??１０００００００－?遍，??聲??０－?＾??Ｉ?＇?Ｉ?＊?ｌ?ｒ———］?？?Ｉ?＇?＜??０?１?２?３?４?５??ＨＱ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｇ／Ｌ）??圖２－２?ＨＱ標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．?２－２?ＨＱ?Ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｃｕｒｖｅ??２．３．３磁性殼聚糖微球?qū)Ρ蕉迂?fù)載量的計(jì)算??利用ＨＱ標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別求得吸附前后的ＨＱ濃度，進(jìn)而計(jì)算吸附量。公式如下：??Ｑ?＝?（Ｃ０－Ｃ）ｘＶ／ｍ??式（２－２）??其中Ｑ是吸附量，單位ｍｇ／ｇ；?Ｃｏ為吸附前ＨＱ的濃度，Ｃ為吸附后ＨＱ的濃度，單??位為ｇ／Ｌ；?Ｖ為ＨＱ溶液的體積，單位為ｍＬ；?ｍ為Ｆｅ３０４＠ＣＴＳ微球的質(zhì)量，單位為??ｇ°??２．３．４四氧化三鐵磁性納米粒子的制備??①精確稱量１．４７?ｇ檸檬酸鈉，０．８?ｇ?ＮａＯＨ，?８５?ｇ?ＮａＮ〇３于２５０?ｍＬ錐形瓶中，加??入９５?ｍＬ去離子水，加熱至完全溶解，溶液澄清；②配制濃度為２?ｍｏｌ／Ｌ的ＦｅＳ〇４．７Ｈ２０??溶液，量�。�?ｍＬ加入到①的混合液中；③待溶液沸騰后，保持１〇〇?°Ｃ反應(yīng)１?ｈ，過??程中不斷滴加去離子水，確保溶液體積維持在一定值；④反應(yīng)結(jié)束后，待溶液冷卻至??室溫，外加磁場將Ｆｅ３０４粒子與溶液分離，并用乙醇清洗多次至洗液澄清為止：⑤于??５０?°Ｃ真空干燥箱中干燥１２?ｈ；⑥輕輕研磨得到Ｆｅ３０４納米粒子粉末，稱重，記錄質(zhì)量。??


本文編號：3333186