基于多孔層開管毛細管柱的固定化酶微反應器和毛細管電色譜的研究與應用
發(fā)布時間：2021-08-02 16:28
固定化酶微反應器（IMERs）是將生物酶分子的固定化技術與微通道內(nèi)生物酶反應相結合而制備的一類酶反應系統(tǒng)�；陂_管毛細管柱的固定化酶微反應器不僅兼具酶的高選擇性催化、可重復使用及微通道分析的低試劑消耗、易分離等優(yōu)點,而且微反應器制備簡單,操作方便,易于與其它分析設備相連接,使其在生命科學如酶反應動力學、抑制劑的篩選、蛋白質(zhì)組學以及生物催化等領域得到廣泛的應用。對于如何提高固定化酶微反應器的性能,包括催化效率和穩(wěn)定性等,毛細管柱內(nèi)的酶固定化技術至關重要,也是目前相關研究領域備受關注的研究方向。與毛細管固定化酶微反應器相對應,毛細管色譜柱的制備是毛細管電色譜高效分離分析的核心部分,也是電色譜理論和應用研究的重點,對毛細管電色譜技術的發(fā)展起著舉足輕重的作用,目前已經(jīng)成為一種迅速發(fā)展起來的新興技術。本論文圍繞新型開管毛細管柱在固定化酶微反應器和毛細管電色譜的研究與應用,展開了以下研究工作:1、提出了基于三維多孔層開管毛細管柱（3D-PLOT）的開管毛細管固定化酶微反應器,并成功應用于標準蛋白在線水解以及HeLa細胞的蛋白組學研究。我們通過簡單易控的原位一步兩相合成法,實現(xiàn)了石英毛細管內(nèi)表面的多...
【文章來源】：東北師范大學吉林省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：114 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
ERY-ZHM有機-無機雜化整體柱的制備示意圖
Fig 1-4 Enzyme immobilized methods.[47]圖 1-4 固定酶的方法。Table 1-2 Comparative evaluation of merits and demerits of various immotypes.[45-47,56]表 1-2 各種固定類型優(yōu)缺點比較固定類型 優(yōu)點 缺點吸附 易于操作 無孔隙擴散限制 不需交聯(lián)試劑 活化步驟少 成本相對便宜× 效率較低× 酶容易從載體
Fig 1-5 Schmatic diagram of the OT-IMER.[83]圖 1-5 開管式固定化酶微反應器示意圖。與開管式固定化酶微反應器相比，整體柱式固定化酶微反應器有更好的穩(wěn)定性，但制備過程復雜，在毛細管內(nèi)將有機高分子材料以原位聚合的方式固定酶。如 Cheng 等[84]的工作，用具有兩個羧基多功能基團的衣康酸試劑將胰蛋白酶固定于整體柱內(nèi)，制備了整體柱式酶微反應器，用于在線水解蛋白質(zhì)和分離多肽，如圖 1-6 所示。填充式毛細管固定化酶微反應器是將已經(jīng)制備好負載酶的填料，填入毛細管中而形成填充式酶反應器。我們課題組基于單顆粒填充技術[95]，將固載有胰蛋白酶的二氧化硅顆粒填充至內(nèi)徑為 100 μm 的毛細管中，制備了填充式酶微反應器用于在線水解蛋白質(zhì)，如圖 1-7 所示。近十年來，毛細管固定化酶微反應器作為一種重要的酶分析工具得到了廣泛[85]
【參考文獻】：
期刊論文
[1]順丁烯二酸酐-β-環(huán)糊精毛細管電色譜整體柱的制備及應用[J]. 李英杰,劉樹仁,高立娣,呂仁江. 化學通報. 2016(08)
[2]1.2μm新型放射型核殼色譜填料在加壓毛細管電色譜中的性能評價[J]. 施文君,田華君,薛蕓,翁中亞,瞿其曙,王彥,閻超. 色譜. 2016(05)
[3]新型有機-無機雜化整體柱的制備及其在毛細管液相色譜及加壓毛細管電色譜中的應用[J]. 翁中亞,薛蕓,施文君,王彥,閻超. 色譜. 2016(05)
[4]加壓毛細管電色譜法分離測定麻仁潤腸丸中的木香烴內(nèi)酯和去氫木香烴內(nèi)酯[J]. 趙彥勇,李利軍,黃文藝,馮軍,程昊,李彥青,尤磊,肖曉茹,劉伯洋. 分析試驗室. 2016(02)
[5]高分子手性固定相的研究進展[J]. 戴榮繼,王慧婷,孫維維,鄧玉林,呂芳,劉秀潔. 色譜. 2016(01)
[6]毛細管電泳法在酶抑制劑篩選中的應用[J]. 劉冬梅,師彥平,陳娟. 分析化學. 2015(05)
[7]分散液相微萃取-毛細管電泳法同時檢測唾液中的8種毒品[J]. 孟梁,王燕燕,孟品佳,王彥吉,張強. 分析化學. 2011(07)
[8]離子液體對膠束電動色譜膠束微結構以及分離效果的影響[J]. 余美娟,杭棟,曹玉華. 色譜. 2011(02)
[9]毛細管電色譜技術研究進展及應用[J]. 王晴,王靜,張英春,張華. 東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2009(03)
[10]毛細管電色譜柱及其固定相制備技術的進展[J]. 谷雪,瞿其曙,閻超. 色譜. 2007(02)
博士論文
[1]基于毛細管電泳—酶微反應器的酶分析及其抑制動力學研究[D]. CAMARA MOHAMED AMARA.東北師范大學 2016
碩士論文
[1]基于毛細管酶微反應器的酶反應動力學研究[D]. 尹正日.東北師范大學 2014
[2]海藻酸鈉固定化α-淀粉酶的研究[D]. 鄭璐.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
本文編號：3317896
【文章來源】：東北師范大學吉林省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：114 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
ERY-ZHM有機-無機雜化整體柱的制備示意圖
Fig 1-4 Enzyme immobilized methods.[47]圖 1-4 固定酶的方法。Table 1-2 Comparative evaluation of merits and demerits of various immotypes.[45-47,56]表 1-2 各種固定類型優(yōu)缺點比較固定類型 優(yōu)點 缺點吸附 易于操作 無孔隙擴散限制 不需交聯(lián)試劑 活化步驟少 成本相對便宜× 效率較低× 酶容易從載體
Fig 1-5 Schmatic diagram of the OT-IMER.[83]圖 1-5 開管式固定化酶微反應器示意圖。與開管式固定化酶微反應器相比，整體柱式固定化酶微反應器有更好的穩(wěn)定性，但制備過程復雜，在毛細管內(nèi)將有機高分子材料以原位聚合的方式固定酶。如 Cheng 等[84]的工作，用具有兩個羧基多功能基團的衣康酸試劑將胰蛋白酶固定于整體柱內(nèi)，制備了整體柱式酶微反應器，用于在線水解蛋白質(zhì)和分離多肽，如圖 1-6 所示。填充式毛細管固定化酶微反應器是將已經(jīng)制備好負載酶的填料，填入毛細管中而形成填充式酶反應器。我們課題組基于單顆粒填充技術[95]，將固載有胰蛋白酶的二氧化硅顆粒填充至內(nèi)徑為 100 μm 的毛細管中，制備了填充式酶微反應器用于在線水解蛋白質(zhì)，如圖 1-7 所示。近十年來，毛細管固定化酶微反應器作為一種重要的酶分析工具得到了廣泛[85]
【參考文獻】：
期刊論文
[1]順丁烯二酸酐-β-環(huán)糊精毛細管電色譜整體柱的制備及應用[J]. 李英杰,劉樹仁,高立娣,呂仁江. 化學通報. 2016(08)
[2]1.2μm新型放射型核殼色譜填料在加壓毛細管電色譜中的性能評價[J]. 施文君,田華君,薛蕓,翁中亞,瞿其曙,王彥,閻超. 色譜. 2016(05)
[3]新型有機-無機雜化整體柱的制備及其在毛細管液相色譜及加壓毛細管電色譜中的應用[J]. 翁中亞,薛蕓,施文君,王彥,閻超. 色譜. 2016(05)
[4]加壓毛細管電色譜法分離測定麻仁潤腸丸中的木香烴內(nèi)酯和去氫木香烴內(nèi)酯[J]. 趙彥勇,李利軍,黃文藝,馮軍,程昊,李彥青,尤磊,肖曉茹,劉伯洋. 分析試驗室. 2016(02)
[5]高分子手性固定相的研究進展[J]. 戴榮繼,王慧婷,孫維維,鄧玉林,呂芳,劉秀潔. 色譜. 2016(01)
[6]毛細管電泳法在酶抑制劑篩選中的應用[J]. 劉冬梅,師彥平,陳娟. 分析化學. 2015(05)
[7]分散液相微萃取-毛細管電泳法同時檢測唾液中的8種毒品[J]. 孟梁,王燕燕,孟品佳,王彥吉,張強. 分析化學. 2011(07)
[8]離子液體對膠束電動色譜膠束微結構以及分離效果的影響[J]. 余美娟,杭棟,曹玉華. 色譜. 2011(02)
[9]毛細管電色譜技術研究進展及應用[J]. 王晴,王靜,張英春,張華. 東北農(nóng)業(yè)大學學報. 2009(03)
[10]毛細管電色譜柱及其固定相制備技術的進展[J]. 谷雪,瞿其曙,閻超. 色譜. 2007(02)
博士論文
[1]基于毛細管電泳—酶微反應器的酶分析及其抑制動力學研究[D]. CAMARA MOHAMED AMARA.東北師范大學 2016
碩士論文
[1]基于毛細管酶微反應器的酶反應動力學研究[D]. 尹正日.東北師范大學 2014
[2]海藻酸鈉固定化α-淀粉酶的研究[D]. 鄭璐.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
本文編號：3317896
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