發(fā)布時(shí)間：2021-06-10 01:29

　　丁酸是一種廣泛應(yīng)用于化工、食品和醫(yī)藥等行業(yè)的短鏈有機(jī)羧酸,目前主要通過(guò)化學(xué)法合成,但供給遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。隨著石化資源的日益枯竭、傳統(tǒng)能源消耗對(duì)環(huán)境污染的日漸加重以及大眾對(duì)生物基化學(xué)品的偏愛(ài),以微生物發(fā)酵法代替化學(xué)合成法生產(chǎn)丁酸已經(jīng)成為必然的發(fā)展趨勢(shì)。然而,微生物發(fā)酵產(chǎn)丁酸的工業(yè)化應(yīng)用目前受到多方面因素的阻礙,如生產(chǎn)菌株對(duì)丁酸耐受性有限導(dǎo)致丁酸終濃度、得率和生產(chǎn)速率較低,副產(chǎn)物乙酸的存在增加了丁酸的分離純化成本,廉價(jià)發(fā)酵基質(zhì)利用存在問(wèn)題造成丁酸發(fā)酵成本較高。針對(duì)微生物發(fā)酵產(chǎn)丁酸工業(yè)化應(yīng)用面臨的諸多問(wèn)題,本課題擬通過(guò)代謝工程改造酪丁酸梭菌從而提高其丁酸產(chǎn)量、丁酸/乙酸比例以及對(duì)木質(zhì)纖維素水解液的利用能力。在酪丁酸梭菌（Clostrdium tyrobutyricum）ATCC 25755中過(guò)表達(dá)6-磷酸果糖激酶基因（pfkA）和丙酮酸激酶基因（pykA）可以顯著提高其胞內(nèi)NADH和ATP水平,更高的胞內(nèi)NADH和ATP水平賦予C.tyrobutyricum更高的丁酸產(chǎn)量和丁酸耐受性。在補(bǔ)料分批發(fā)酵模式下,重組菌株ATCC 25755/pfkA+pykA的丁酸產(chǎn)量和生產(chǎn)速率分別達(dá)到了48... 

【文章來(lái)源】：華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：167 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

酪丁酸梭菌的丁酸代謝合成途徑[45]

28圖 2-1 重組質(zhì)粒 pPFK、pPYK 和 pPFY 構(gòu)建示意圖Fig. 2-1 Schematic diagram of construction of recombinant plasmids pPFK,pPYK and pPFY（4）連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化和陽(yáng)性克隆篩選。連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化具體過(guò)程：將連接產(chǎn)物加入含100 μL E. coli DH5α 感受態(tài)細(xì)胞的 1.5 mL 離心管中，冰浴 30 min；將離心管放入 42°C水浴熱激處理 90 s 后，立即轉(zhuǎn)至冰上放置 5 min；在離心管中加入 900 μL LB 液體培養(yǎng)基，37°С 條件下培養(yǎng) 1 h；取 100 μL 菌液涂布于含有氯霉素抗性的 LB 固體平板上，37°C

糖類(lèi)和酸類(lèi)產(chǎn)物的液相色譜圖


本文編號(hào)：3221734