萱草為多年生宿根百合科萱草屬植物,廣泛分布在我國(guó)南北各省,資源豐富。萱草花,又稱(chēng)中國(guó)“母親花”,是“觀為花”、“用為藥”、“食為菜”的花卉。本研究以萱草花為原料,以類(lèi)黃酮提取率為指標(biāo),優(yōu)化了超聲輔助提取工藝,并優(yōu)化了大孔樹(shù)脂純化萱草花類(lèi)黃酮提取液的工藝;利用最優(yōu)的提取和純化工藝處理了20種萱草花,利用高效液相色譜儀-二極管陣列檢測(cè)器(HPLC-DAD)對(duì)20種萱草花中類(lèi)黃酮成分進(jìn)行了定性和定量分析,并測(cè)定了總黃酮含量和體外抗氧化性,為萱草花中類(lèi)黃酮資源利用提供理論支持,主要研究結(jié)果如下:(1)對(duì)萱草花中類(lèi)黃酮類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行超聲提取,在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇對(duì)類(lèi)黃酮提取率影響較大的三個(gè)因素進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)。結(jié)果表明,響應(yīng)面回歸模型顯著,失擬相不顯著,則建立的響應(yīng)面回歸模型適合對(duì)萱草花中提取類(lèi)黃酮進(jìn)行預(yù)測(cè)。萱草花中類(lèi)黃酮最佳提取條件為:乙醇體積分?jǐn)?shù)75%,超聲功率198W,超聲時(shí)間23min。在此條件下,萱草花中類(lèi)黃酮提取率為91.15%,與預(yù)測(cè)值91.73%接近。(2)考察了六種樹(shù)脂對(duì)類(lèi)黃酮的靜態(tài)吸附解析性能,通過(guò)對(duì)比可知,AB-8大孔樹(shù)脂的吸附量、解析率和純化率最高,適合純化萱草花類(lèi)黃酮粗提液。以泄漏點(diǎn)為指標(biāo)優(yōu)化動(dòng)態(tài)吸附工藝,泄露點(diǎn)出現(xiàn)最晚的工藝條件為:流速5BV/h、pH 4、上樣濃度1.0mg/mL,在此條件下樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附量最高;對(duì)于動(dòng)態(tài)解析工藝,以不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇為洗脫液進(jìn)行解析,80%乙醇解析效果最好。通過(guò)大孔樹(shù)脂吸附解析,萱草花類(lèi)黃酮粗提液的純度從12.35%提升到43.28%,其純度提高了3.5倍。(3)建立了檢測(cè)萱草花中類(lèi)黃酮成分的高效液相色譜法,分析條件為:柱溫35℃、進(jìn)樣體積10μL,流速0.8mL/min,掃描波長(zhǎng)254nm和280nm,流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液,B為乙腈,梯度洗脫程序:0~2min,A為95%~95%;2~10min,A為95%~80%;10~20min,A為80%~75%;20~25min,A為75%~75%;30~45min,A為75%~40%。對(duì)20種萱草花的類(lèi)黃酮成分進(jìn)行分析檢測(cè),均檢測(cè)出兒茶素、表兒茶素、蘆丁、異槲皮素和白楊素。通過(guò)測(cè)定DPPH自由基清除率和·OH自由基清除率,以維生素C(Vc)當(dāng)量表示體外抗氧化性,萱草花“紅貝貝”體外抗氧化性最高,萱草花“牧羊人”體外抗氧化性最低。利用偏最小二乘法(PLS,partial least squares)建立了類(lèi)黃酮組成成分與抗氧化性之間的關(guān)系,其中表兒茶素、蘆丁和異槲皮素與抗氧化性的相關(guān)關(guān)系較好。
【學(xué)位單位】：上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：TQ28
【部分圖文】：

圖 1.1 2-苯基色原酮結(jié)構(gòu)g1.1 2-phenylchromone struc圖 1.2 天然類(lèi)黃酮物質(zhì)結(jié)構(gòu)1.2 Structure of natural flavo

圖 1.2 天然類(lèi)黃酮物質(zhì)結(jié)構(gòu)Fig 1.2 Structure of natural flavonoids1.2.2 類(lèi)黃酮化合物性質(zhì)1.2.2.1 物理性質(zhì)類(lèi)黃酮化合物俗稱(chēng)黃堿素，多為黃色固體晶體，少數(shù)無(wú)定形粉末，熔點(diǎn)溫度范圍較寬，在 200~500℃之間。色原酮本身是無(wú)顏色的，由于 2-位引入苯環(huán)基團(tuán)，在苯環(huán)基團(tuán)上存在共軛效應(yīng)會(huì)對(duì)顏色有影響，同時(shí)，助色基團(tuán)（羥基或甲氧基）的數(shù)目和位置也會(huì)影響顏色，花色素一類(lèi)的黃酮容易受酸堿影響，其中類(lèi)黃酮化合物易于多糖結(jié)合生成糖苷鍵，糖苷鍵越多，溶解度越大，同時(shí)類(lèi)黃酮的結(jié)構(gòu)上甲氧基團(tuán)越多，則水中溶解度就越低[26]。1.2.2.2 化學(xué)性質(zhì)大多數(shù)類(lèi)黃酮化合物會(huì)發(fā)生顯色反應(yīng)，但顯色原理不同。還原反應(yīng)主要為類(lèi)黃酮與鹽酸-鎂粉或鋅粉反應(yīng)，多呈現(xiàn)橙紅色或紫紅色，但異黃酮類(lèi)不發(fā)生顯色反應(yīng)[27]；金屬鹽類(lèi)試劑絡(luò)合反應(yīng)主要為帶有羥基和酮基的類(lèi)黃酮上，在堿性條件下與鋁離子絡(luò)合，生成橙紅色或紅色絡(luò)合物，在 510nm 處有最大吸收峰，是實(shí)驗(yàn)室中最方便的測(cè)量類(lèi)黃酮含量的方法[28]。

萱草花中類(lèi)黃酮成分，為萱草花中類(lèi)黃酮資源的利用提供理論支持。1.4.2 研究?jī)?nèi)容（1）萱草花類(lèi)黃酮提取工藝優(yōu)化萱草花為原料，采用超聲輔助提取法，提取溶劑乙醇，以類(lèi)黃酮提取率為指標(biāo)，采用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，得到超聲提取萱草花中類(lèi)黃酮的最佳提取條件。（2）萱草花類(lèi)黃酮純化工藝優(yōu)化以靜態(tài)吸附解析性能為指標(biāo)篩選樹(shù)脂，然后繪制樹(shù)脂靜態(tài)吸附解析曲線，并研究不同上樣濃度和 pH 對(duì)靜態(tài)吸附的影響，以動(dòng)態(tài)吸附泄漏點(diǎn)為指標(biāo)，優(yōu)化動(dòng)態(tài)吸附工藝，同時(shí)又研究了不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇對(duì) AB-8 大孔樹(shù)脂的解析率的影響。（3）分析萱草花中類(lèi)黃酮成分提取 20 種萱草花中類(lèi)黃酮并用大孔樹(shù)脂進(jìn)行純化，測(cè)定各個(gè)品種類(lèi)黃酮的體外抗氧化性，然后建立高效液相分析方法萱草花中類(lèi)黃酮成分，測(cè)定萱草花中類(lèi)黃酮各個(gè)組分的含量，最后通過(guò)偏最小二乘法（PLS，partial least squares）分析類(lèi)黃酮成分與體外抗氧化性之間的關(guān)系。1.4.3 技術(shù)路線
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本文編號(hào)：2864030