發(fā)布時(shí)間：2020-10-08 15:27

　　 本論文以嘌呤核苷為母體結(jié)構(gòu)引入磺胺結(jié)構(gòu)單元,設(shè)計(jì)合成了25個(gè)含磺胺取代的嘌呤核苷類衍生物。并采用~1H NMR、~(13)C NMR、HRMS對目標(biāo)化合物1-25結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征,并以黃瓜花葉病毒(CMV)與煙草花葉病毒(TMV)馬鈴薯Y病毒(PVY)為研究對象,采用半葉枯斑法對其進(jìn)行活體抗植物病毒活性測試。并基于目標(biāo)化合物抗TMV鈍化活性初步探究其與TMV CP之間的相互作;基于對CMV的保護(hù)活性對目標(biāo)化合物5進(jìn)行了蛋白組學(xué)相關(guān)研究本論文的工作總結(jié)概括如下:1.設(shè)計(jì)合成了25個(gè)新型含磺胺取代的嘌呤核苷衍生物1-25,目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)均通過相應(yīng)的核磁共振氫譜(~1H NMR)、核磁共振碳譜(~(13)C NMR)和高分辨質(zhì)譜(HRMS)結(jié)構(gòu)表征。2.采用半葉枯斑法對合成的25個(gè)目標(biāo)化合物進(jìn)行抗PVY、CMV和TMV活性測試。結(jié)果表明:含磺胺取代的嘌呤核苷類衍生物對PVY、CMV和TMV具有較好的抑制效果。在對TMV鈍化活性方面,化合物4(EC_(50)=67.30μg/mL)和5(EC_(50)=48.85μg/mL)表現(xiàn)出較好的鈍化活性,分別優(yōu)于寧南霉素(EC_(50)=84.78μg/mL)、病毒唑(EC_(50)=150.45μg/mL)和氨基寡糖(EC_(50)=521.30μg/mL)。在對CMV保護(hù)活性方面,其中化合物1(EC_(50)=363.79μg/mL)、2(EC_(50)=383.02μg/mL)和5(EC_(50)=237.55μg/mL)、對CMV的保護(hù)活性優(yōu)于寧南霉素(EC_(50)=511.82μg/mL)病毒唑(EC_(50)=584.53μg/mL)和氨基寡糖(EC_(50)=550.80μg/mL)。3.基于目標(biāo)化合物具有良好的抗TMV鈍化活性。通過熒光光譜檢測法和微量熱涌動(dòng)法探究部分目標(biāo)化合物與TMV CP之間的相互作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)高活性化合物5與TMV CP之間具有較強(qiáng)親和力。4.測定對CMV保護(hù)活性較好的化合物5對植株葉片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)等防御酶生物活性的影響發(fā)現(xiàn)其能增強(qiáng)防御酶活性,從而增強(qiáng)煙草的抗病性;采用質(zhì)譜技術(shù)分析不同條件植株之間的差異蛋白表達(dá),并利用各種生物信息學(xué)手段對差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行注釋,分類和功能分析找出化合物調(diào)節(jié)植物生理生化的光合作用關(guān)鍵通路。
【學(xué)位單位】：貴州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TQ450.1
【部分圖文】：

物 5 與 TMV-CP 的相互作用。[46-48]采用熒光光譜儀器:HORIBA FluoroMax-4 進(jìn)行實(shí)L 濃度的待測化合物 4、5、9 和對照藥，然后采用 SECuffer 中：2.922 g (NaCl) + 0.5 mL β-Me + 50 mL 0.2 m P制成濃度為 16mmol/L。然后啟動(dòng)熒光光譜儀及計(jì)算機(jī)激發(fā)狹縫均為 5 nm，設(shè)置激發(fā)波長為 278 nm，發(fā)射 此條件下測定蛋白樣品與不同濃度化合物的相互作用果與分析譜法測定目標(biāo)化合物在不同濃度下與 TMV CP 之間

TMVCP 的淬滅方式（其中 Ksv為猝滅常數(shù)，Kq為猝散碰撞速率常數(shù)，τ0=10－8s，Cq為待測化合物的濃度）lg Cq方程式計(jì)算出化合物的結(jié)合常數(shù)(Ka)，化合物 l。如圖 5-4 所示

圖 5-7 寧南霉素對 TMV CP 熒光強(qiáng)度的影響Figure 5-7 Ningnanmycin influence on fluorescence intensity of TMV

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本文編號(hào)：2832404