【摘要】：天然來源的抗氧化肽因?yàn)槠湓谑称泛歪t(yī)藥領(lǐng)域中具備潛在的運(yùn)用前景,受到很多研究者的關(guān)注。山核桃粕蛋白作為一種新型的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)資源,具有很高營養(yǎng)價(jià)值,值得開發(fā)利用。本論文首先提取了山核桃粕蛋白,然后進(jìn)行山核桃抗氧化肽的制備工藝、肽的分離純化以及體內(nèi)外抗氧化活性研究。1.以水解度和總抗氧化性為評價(jià)指標(biāo),通過單因素試驗(yàn),響應(yīng)面回歸分析的方法研究了山核桃粕蛋白抗氧化肽的酶解工藝,采用Alcalase堿性蛋白酶為酶源,其最佳工藝為:溫度58℃、時(shí)間3 h、酶濃度5700 U/g、p H 8.5。在此最優(yōu)組合下,可得吸光度為0.276,總抗氧化值最高。2.采用膜過濾對制備的山核桃抗氧化肽粗品進(jìn)行超濾分級,將山核桃抗氧化肽粗品按照分子量范圍分為3KDa、3-5KDa、5-10KDa和10KDa四種山核桃抗氧化肽。對這四種肽的理化性質(zhì)進(jìn)行測定,山核桃蛋白酶解動力學(xué)模型為DH=3.3036ln[1+(5.8372E0/S0+0.1503)t],通過實(shí)驗(yàn)證明該模型可靠。不同組分的山核桃蛋白酶解物溶解性與p H有關(guān),在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最低,堿性條件下溶解度逐漸增大。并且隨著山核桃多肽分子量的增大,山核桃粕酶解物的溶解性降低。山核桃蛋白水解后,持水性和持油性降低,最高組分的持水性為2.59 m L/g,持油性為1.77 m L/g。山核桃蛋白水解物的乳化性和乳化穩(wěn)定性、起泡性和起泡穩(wěn)定性在測試的p H范圍內(nèi)有相似的變化,在等電點(diǎn)時(shí)最低,隨著p H的增加其乳化性質(zhì)和起泡性質(zhì)均增加,堿性條件下有利于該酶解產(chǎn)物的加工,且四個(gè)組分沒有明顯差異。山核桃多肽的差示量熱掃描結(jié)果表明,酶解后的多肽均對熱有較好的抵抗作用。3.山核桃多肽酶解產(chǎn)物經(jīng)過超濾分離后得到的3KDa組分有較強(qiáng)的體外抗氧化活性,因此將3KDa多肽對小鼠進(jìn)行灌胃,實(shí)驗(yàn)證明該組分山核桃多肽具有較高的體內(nèi)抗氧化活性,可以提高小鼠血清、肝臟和脾臟中的SOD、CAT和GSH-Px活力,降低氧化產(chǎn)物MDA的含量。并且呈現(xiàn)一定的濃度依賴關(guān)系。將該組分多肽經(jīng)過DEAE-52陰離子交換柱分離純化后,得到兩個(gè)不同的組分B1和B2。其中B1的抗氧化活性高于B2。將得到的B1組分進(jìn)一步通過葡聚糖凝膠G-50進(jìn)一步純化,得到兩個(gè)分子量不同的組分C1和C2,其中分子量高的C1組分表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性。將C1組分通過反向高效液相質(zhì)譜聯(lián)用鑒定出抗氧化肽為:LAYLQYTDFETR。該新型抗氧化肽合成后其羥基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力濃度為0.1mg/m L時(shí)分別為47.42%、56.25%和67.67%。
【圖文】：

研究的基礎(chǔ)上，選取溫度(℃)、pH、加酶量( U/g)和水解時(shí)變量，以總抗氧化值對應(yīng)的吸光度為響應(yīng)值，設(shè)計(jì)響應(yīng)面表 2.1 響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計(jì)表Tab 2.1 response surface optimization design tableA 酶解溫度（℃）B pH C 加酶量(U/g)D 水（55 8.5 5000 60 9 6000 65 9.5 7000 驗(yàn)酶解山核桃蛋白的影響

適當(dāng)提高溫度可以提高酶解液的抗氧化能力。由圖溫度的提高，，山核桃粕蛋白的水解度和總抗氧化值均時(shí)，山核桃粕蛋白的水解度和總抗氧化值最大。隨后值卻隨之下降。導(dǎo)致如此現(xiàn)象是因?yàn)槊笇囟扔幸欢ǚ址磻?yīng)，所以在一定溫度范圍內(nèi)，酶解的速率會隨著解的溫度達(dá)到一定的臨界溫度時(shí)，酶的生物活性會受去活力，從而降低酶解速率。故 60℃為最佳溫度。山核桃蛋白的影響
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：TS229

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 許典;呂佼;于超;王豐俊;;低分子質(zhì)量核桃多肽抗氧化及抗腫瘤活性研究[J];中國糧油學(xué)報(bào);2015年11期

2 梁杏;張旭;陳朝銀;趙聲蘭;梁永菊;魯曉芳;;核桃餅粕多酚純化工藝及其抗氧化活性的研究[J];中國釀造;2015年04期

3 姜文鑫;王曉飛;崔玲玉;閔偉紅;;紫蘇分離蛋白酶解制備抗菌肽的工藝優(yōu)化[J];食品研究與開發(fā);2015年03期

4 楊子明;劉金磊;顏小捷;李典鵬;;核桃多肽對D-半乳糖誘導(dǎo)老年小鼠血脂水平的影響[J];食品科學(xué);2015年09期

5 張瑞;吳彩紅;凡海佳;李呂木;匡厚坤;汪雙喜;丁小玲;;發(fā)酵菜粕中菜籽小肽分離純化及其體外抗氧化活性研究[J];飼料工業(yè);2014年05期

6 彭祺;邊威;王佳麗;吳堅(jiān);葛樂勇;王芳;鄭云峰;李博斌;;不同加工工藝對臨安山核桃營養(yǎng)成分的影響[J];食品工業(yè)科技;2013年20期

7 熊拯;陳敏娥;張炳亮;;油茶籽粕蛋白質(zhì)提取工藝及功能特性研究[J];糧油食品科技;2013年01期

8 肖仁顯;陳中海;陳秋平;沈建福;;冷榨法、超臨界CO_2萃取法和有機(jī)溶劑浸出法提取山核桃油比較[J];食品科學(xué);2012年20期

9 房祥軍;郜海燕;陳杭君;;山核桃加工、貯藏前后總多酚含量及其抗氧化活性的變化[J];食品科學(xué);2011年05期

10 陳仕云;吳德玲;金傳山;彭代銀;詹權(quán)勝;;山核桃外蒲殼化學(xué)成分初步分析及總黃酮含量測定[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 鄭淋;抗氧化肽的構(gòu)效關(guān)系及定向制備的研究[D];華南理工大學(xué);2015年

2 祝超智;金華火腿抗氧化肽的活性研究及組分鑒定[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 黃文;白果活性蛋白的分離、純化、結(jié)構(gòu)及其生物活性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 徐兆剛;河蚌抗氧化肽的制備及其特性研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 趙會燕;玉米胚芽抗氧化肽的制備及其安全性評價(jià)研究[D];吉林大學(xué);2015年

3 蔡孟森;熱榨核桃粕的綜合利用[D];華南理工大學(xué);2015年

4 李俐樺;糯米糠和米糠成分比較及其抗氧化肽制備工藝研究[D];重慶工商大學(xué);2015年

5 明強(qiáng)強(qiáng);微生物固態(tài)發(fā)酵花生粕制備抗氧化肽的研究[D];山東師范大學(xué);2014年

6 劉紅梅;花生抗氧化肽的制備及其功能特性的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 許磊;云南大理漾濞核桃營養(yǎng)與多肽功能特性研究[D];西南大學(xué);2013年

8 劉思聰;毛蚶天然多肽提取純化及其體外抗氧化能力和抑制腫瘤活性的初步研究[D];中國海洋大學(xué);2013年

9 張秋萍;豌豆分離蛋白酶解產(chǎn)生物活性肽的研究[D];江南大學(xué);2013年

10 楊瑾;山核桃餅粕蛋白質(zhì)提取純化工藝及其功能特性的研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

本文編號：2640506