藍莓(Vaccinium spp.)是一種極具經(jīng)濟價值和保健價值的果實,隨著市場多樣化需求的增加,通過生物技術育種,提升藍莓果實產(chǎn)量和品質(zhì)迫在眉睫。利用生物技術進行的根癌農(nóng)桿菌介導的植物遺傳轉(zhuǎn)化已經(jīng)在多種果樹中成功應用,但在藍莓中仍然存在品種轉(zhuǎn)化效率低下、轉(zhuǎn)化困難等問題。本研究以高叢藍莓品種‘北陸’(Northland)、‘圣藍’(Millennia)、‘喜來’(Sierra)、‘萊格西’(Legacy)、‘藍源’(Bluesouth)為材料,通過不同激素組合和濃度試驗,優(yōu)化藍莓葉片不定芽再生體系及建立藍莓葉片愈傷組織再生體系;通過分析根癌農(nóng)桿菌侵染濃度和時間、共培養(yǎng)天數(shù)、抑菌劑濃度等因子的影響效果,以期對藍莓遺傳轉(zhuǎn)化體系進行優(yōu)化,為后續(xù)藍莓基因功能的研究和育種工作提供技術支撐。主要研究結果如下:(1)優(yōu)化了4個藍莓品種‘北陸’、‘圣藍’、‘喜來’、‘萊格西’葉片再生不定芽體系,篩選出4個品種誘導不定芽培養(yǎng)基以WPM+4.0 mg/L ZT+30 g/L蔗糖+6.5 g/L瓊脂粉為佳。其中,‘北陸’葉片不定芽誘導率為60%,‘圣藍’葉片不定芽誘導率為81.67%,‘喜來’葉片不定芽誘導...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 引言
    1.1 研究背景
    1.2 木本植物組織培養(yǎng)研究進展
    1.3 藍莓組織培養(yǎng)研究進展
        1.3.1 植物生長調(diào)節(jié)劑種類及濃度
        1.3.2 外植體類型
        1.3.3 基因型
    1.4 木本植物遺傳轉(zhuǎn)化研究進展
        1.4.1 影響農(nóng)桿菌介導木本植物遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素
        1.4.2 根癌農(nóng)桿菌介導藍莓遺傳轉(zhuǎn)化的研究進展
    1.5 研究的目的與意義
    1.6 技術路線圖
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 主要試劑及常用培養(yǎng)基配制
    2.2 主要實驗儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 藍莓葉片再生不定芽試驗
        2.3.2 藍莓愈傷組織再生體系的建立
        2.3.3 藍莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
3 結果分析
    3.1 葉片再生不定芽優(yōu)化試驗
        3.1.1 不同培養(yǎng)基配方對不同藍莓品種葉片再生不定芽的效果
    3.2 藍莓愈傷組織再生體系的建立
        3.2.1 不同造傷方式對葉片生成愈傷組織的效果
        3.2.2 不同光照處理對藍莓葉片生成愈傷組織的效果
        3.2.3 不同培養(yǎng)基配方對藍莓葉片愈傷組織誘導的效果
        3.2.4 不同繼代方式對愈傷組織生長的作用
        3.2.5 不同培養(yǎng)基配方對藍莓葉片愈傷組織繼代的效果
    3.3 藍莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化
        3.3.1 各藍莓品種葉片卡那霉素選擇壓濃度篩選試驗
        3.3.2 根癌農(nóng)桿菌侵染時間試驗
        3.3.3 共培養(yǎng)時間篩選試驗
        3.3.4 根癌農(nóng)桿菌侵染濃度試驗
        3.3.5 不同濃度抑菌劑對農(nóng)桿菌的抑制試驗
        3.3.6 藍莓Km抗性芽獲得
4 討論
    4.1 不同因素對藍莓葉片再生的影響
    4.2 不同因素對誘導藍莓葉片愈傷組織的影響
    4.3 不同因素對藍莓葉片遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響
    4.4 對藍莓遺傳轉(zhuǎn)化體系的展望
5 結論
    5.1 藍莓葉片再生不定芽試驗優(yōu)化結果
    5.2 藍莓愈傷組織再生試驗結果
    5.3 藍莓遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化結果
附錄A 縮寫表
參考文獻
個人簡介
導師簡介
致謝



本文編號：3795005