為探究Sl-miR6027在果實成熟過程中的功能,本研究利用生物信息學方法,分析了Sl-miR6027在番茄果實發(fā)育過程中的表達模式,同時對Sl-miR6027啟動子中存在的順式作用元件和Sl-miR6027的靶基因進行預測;依據(jù)Sl-miR6027成熟序列,設(shè)計STTM寡核苷酸序列,構(gòu)建pCambia-STTM6027沉默載體;采用農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)化番茄,通過PCR篩選陽性轉(zhuǎn)化植株并進行初步的表型分析。結(jié)果表明:Sl-miR6027在綠熟期表達量最高;Sl-miR6027啟動子中存在20個光應(yīng)答元件和一些非生物脅迫應(yīng)答元件;Solyc09g098130為Sl-miR6027潛在的靶基因,二者在果實成熟不同時期表達量呈負相關(guān),且其表達水平受到光照的調(diào)節(jié);依據(jù)Sl-miR6027成熟序列成功構(gòu)建出pCambia-STTM6027沉默載體;pCambia-STTM6027轉(zhuǎn)基因番茄表型分析表明Sl-miR6027參與調(diào)節(jié)紅熟期番茄果實顏色。上述結(jié)果初步表明Sl-miR6027參與調(diào)節(jié)番茄果實成熟過程。

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 Sl-miR6027在果實不同發(fā)育時期的動態(tài)表達模式分析
    1.2 Sl-miR6027啟動子中存在果實成熟過程相關(guān)的順式作用元件
    1.3 Solyc09g098130被預測為Sl-miR6027潛在的靶基因
    1.4 靶基因Solyc09g098130的表達受光照調(diào)節(jié)
    1.5 構(gòu)建了pCambia1300-STTM6027植物沉默表達載體
    1.6 農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化番茄并獲得陽性植株
    1.7 沉默Sl-miR6027的表達影響了成熟期番茄果實的顏色
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗材料
    3.2 miRNA表達分析
    3.3 啟動子分析
    3.4 靶基因預測
    3.5 靶基因的光調(diào)控表達模式
    3.6 構(gòu)建SMMT-6027沉默載體
    3.7 農(nóng)桿菌介導番茄轉(zhuǎn)化及檢測
    3.8 定量PCR
作者貢獻



本文編號：3742157