柑橘體細(xì)胞雜種核仁共顯性機(jī)制研究
發(fā)布時間:2022-10-29 10:25
核仁顯性是一種普遍存在于植物和動物雜種中的表觀遺傳現(xiàn)象,與rRNA基因表達(dá)有關(guān)。在柑橘體細(xì)胞雜種中發(fā)現(xiàn)的核仁共顯性現(xiàn)象為研究多倍體基因組遺傳規(guī)律、基因表達(dá)調(diào)控提供了新思路。本實(shí)驗(yàn)通過熒光原位雜交(FISH)、蛋白免疫熒光等技術(shù),分析柑橘體細(xì)胞雜種及其親本的45S rDNA、DNA甲基化和H3K9ac在細(xì)胞核和染色體上的分布,并對DNA甲基化和H3K9ac與rRNA基因表達(dá)之間的關(guān)系進(jìn)行了探討,從分子細(xì)胞學(xué)角度研究核仁共顯性產(chǎn)生原因。1.45S rDNA在親本和體細(xì)胞雜種中的分布通過熒光原位雜交,觀察發(fā)現(xiàn)哈姆林甜橙(Citrus sinensis?Hamlin‘)有3個45S rDNA位點(diǎn),2個為活性NORs;枸頭橙(Citrus aurantium)中有4個45S rDNA位點(diǎn),均具有轉(zhuǎn)錄活性,但其中一個活性較低;體細(xì)胞雜種BG(朋娜臍橙+枸頭橙,Citrus sinensis?Bonanza‘+Citrus aurantium)有7個45S rDNA位點(diǎn),只有1個不具有轉(zhuǎn)錄活性。這進(jìn)一步驗(yàn)證了核仁共顯性現(xiàn)象的存在,而且表明枸頭橙中轉(zhuǎn)錄活性較低的NOR有可能在體細(xì)胞雜種中被激活。2.D...
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
1.1 課題的提出
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 植物熒光原位雜交技術(shù)的原理和進(jìn)展
1.2.1.1 熒光原位雜交技術(shù)的原理
1.2.1.2 熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展
1.2.1.3 探針的類型和標(biāo)記方法
1.2.2 熒光原位雜交的應(yīng)用
1.2.2.1 識別染色體
1.2.2.2 多倍體染色體親本鑒定
1.2.2.3 鑒定轉(zhuǎn)基因植物的外源基因
1.2.2.4 基因定位
1.2.3 核仁顯性研究進(jìn)展
1.2.3.1 rDNA與核仁顯性
1.2.3.2 核仁顯性的發(fā)現(xiàn)
1.2.3.3 核仁顯性發(fā)生機(jī)制
1.3 研究目的
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 免疫檢測探針來源
2.1.3 探針來源
2.2 染色體制片
2.2.1 玻片預(yù)處理
2.2.2 熒光原位雜交染色體制片
2.2.2.1 柑橘根尖預(yù)處理
2.2.2.2 染色體制片
2.2.3 蛋白免疫熒光染色體制片
2.3 熒光原位雜交
2.4 蛋白免疫熒光
3 結(jié)果與分析
3.1 免疫熒光分析
3.1.1 DNA甲基化抗體蛋白免疫熒光分析
3.1.2 H3K9ac蛋白免疫熒光分析
3.2 45S rDNA熒光原位雜交分析
3.3 DNA甲基化,H3K9ac乙;c 45S rDNA的關(guān)系
3.3.1 DNA甲基化與 45S rDNA的關(guān)系
3.3.2 H3K9ac乙酰化與 45S rDNA的關(guān)系
4 討論
4.1 親本和體細(xì)胞雜種的 45S rDNA的分布
4.2 DNA甲基化和H3K9ac在親本和體細(xì)胞雜種中的分布
4.3 表觀修飾和 45S rRNA基因的表達(dá)
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑桔細(xì)胞電融合再生兩個種間體細(xì)胞雜種[J]. 郭文武,鄧秀新. 生物工程學(xué)報. 2000(02)
[2]轉(zhuǎn)基因大麥中g(shù)fp基因的染色體位置及其表達(dá)(英文)[J]. 陳建民,Carlson A R,萬建民,Kasha K J. 遺傳學(xué)報. 2003(08)
[3]Fiber-FISH技術(shù)及其在植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 李宗蕓,宋運(yùn)淳,李立家. 植物學(xué)通報. 2002(03)
[4]S基因在甘藍(lán)EDFs上的高分辨率熒光原位雜交定位(英文)[J]. 楊昆,漆紅艷,朱利泉,王小佳. 遺傳學(xué)報. 2006(03)
[5]我國柑橘的發(fā)展現(xiàn)狀與展望[J]. 陳仕俏,趙文紅,白衛(wèi)東. 農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊). 2008(03)
[6]原生質(zhì)體融合[J]. 王幼平,張莉莉,吳曉霞. 生物學(xué)通報. 2009(08)
[7]柑橘果品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 丁曉波,張華,劉世堯,廖益均,周志欽. 園藝學(xué)報. 2012(09)
[8]普通煙草與黃花煙草原生質(zhì)體融合產(chǎn)生的種間雜種植株[J]. 王培田,陳家玉,趙世民,徐金相. 科學(xué)通報. 1981(06)
[9]多彩色熒光原位雜交技術(shù)原理及其應(yīng)用[J]. 楊明杰,曹佳. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1998(04)
本文編號:3697514
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
1.1 課題的提出
1.2 文獻(xiàn)綜述
1.2.1 植物熒光原位雜交技術(shù)的原理和進(jìn)展
1.2.1.1 熒光原位雜交技術(shù)的原理
1.2.1.2 熒光原位雜交技術(shù)的發(fā)展
1.2.1.3 探針的類型和標(biāo)記方法
1.2.2 熒光原位雜交的應(yīng)用
1.2.2.1 識別染色體
1.2.2.2 多倍體染色體親本鑒定
1.2.2.3 鑒定轉(zhuǎn)基因植物的外源基因
1.2.2.4 基因定位
1.2.3 核仁顯性研究進(jìn)展
1.2.3.1 rDNA與核仁顯性
1.2.3.2 核仁顯性的發(fā)現(xiàn)
1.2.3.3 核仁顯性發(fā)生機(jī)制
1.3 研究目的
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 免疫檢測探針來源
2.1.3 探針來源
2.2 染色體制片
2.2.1 玻片預(yù)處理
2.2.2 熒光原位雜交染色體制片
2.2.2.1 柑橘根尖預(yù)處理
2.2.2.2 染色體制片
2.2.3 蛋白免疫熒光染色體制片
2.3 熒光原位雜交
2.4 蛋白免疫熒光
3 結(jié)果與分析
3.1 免疫熒光分析
3.1.1 DNA甲基化抗體蛋白免疫熒光分析
3.1.2 H3K9ac蛋白免疫熒光分析
3.2 45S rDNA熒光原位雜交分析
3.3 DNA甲基化,H3K9ac乙;c 45S rDNA的關(guān)系
3.3.1 DNA甲基化與 45S rDNA的關(guān)系
3.3.2 H3K9ac乙酰化與 45S rDNA的關(guān)系
4 討論
4.1 親本和體細(xì)胞雜種的 45S rDNA的分布
4.2 DNA甲基化和H3K9ac在親本和體細(xì)胞雜種中的分布
4.3 表觀修飾和 45S rRNA基因的表達(dá)
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑桔細(xì)胞電融合再生兩個種間體細(xì)胞雜種[J]. 郭文武,鄧秀新. 生物工程學(xué)報. 2000(02)
[2]轉(zhuǎn)基因大麥中g(shù)fp基因的染色體位置及其表達(dá)(英文)[J]. 陳建民,Carlson A R,萬建民,Kasha K J. 遺傳學(xué)報. 2003(08)
[3]Fiber-FISH技術(shù)及其在植物基因組研究中的應(yīng)用[J]. 李宗蕓,宋運(yùn)淳,李立家. 植物學(xué)通報. 2002(03)
[4]S基因在甘藍(lán)EDFs上的高分辨率熒光原位雜交定位(英文)[J]. 楊昆,漆紅艷,朱利泉,王小佳. 遺傳學(xué)報. 2006(03)
[5]我國柑橘的發(fā)展現(xiàn)狀與展望[J]. 陳仕俏,趙文紅,白衛(wèi)東. 農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊). 2008(03)
[6]原生質(zhì)體融合[J]. 王幼平,張莉莉,吳曉霞. 生物學(xué)通報. 2009(08)
[7]柑橘果品營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀[J]. 丁曉波,張華,劉世堯,廖益均,周志欽. 園藝學(xué)報. 2012(09)
[8]普通煙草與黃花煙草原生質(zhì)體融合產(chǎn)生的種間雜種植株[J]. 王培田,陳家玉,趙世民,徐金相. 科學(xué)通報. 1981(06)
[9]多彩色熒光原位雜交技術(shù)原理及其應(yīng)用[J]. 楊明杰,曹佳. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1998(04)
本文編號:3697514
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