不同細胞質(zhì)的金針菇菌絲差異蛋白分析
發(fā)布時間:2022-08-09 13:07
以黃色金針菇(Flammulina filiformis)單核菌株Y33和白色金針菇單核菌株W8為供試菌株,采用雙向核遷移技術(shù),獲得一對具有相同細胞核、不同細胞質(zhì)的雙核菌株Y8-33和W8-33(簡稱異質(zhì)雙核菌株)。采用菌落形態(tài)觀察、顯微鏡檢查與分子標記對這兩個雙核菌株進行驗證分析,并以菌株W8-33菌絲樣品為對照,采用雙向凝膠電泳技術(shù)對金針菇異質(zhì)雙核菌株菌絲的蛋白質(zhì)組進行分析。結(jié)果表明:異質(zhì)雙核菌株Y8-33和W8-33菌絲均具有鎖狀聯(lián)合結(jié)構(gòu),在菌落形態(tài)上呈現(xiàn)明顯差異,但ISSR分子標記的PCR擴增產(chǎn)物具有很高的相似性。在Y8-33菌絲樣品中共鑒定出17個差異蛋白,包括8個上調(diào)蛋白、9個下調(diào)蛋白;其中,14-3-3蛋白、微管蛋白、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、果糖二磷酸醛縮酶、ARF/SAR蛋白家族以及熱激蛋白HSP90、HSP70和HSS1差異蛋白可能在由于受體細胞不同所導致的不同細胞質(zhì)環(huán)境下,對金針菇的生長生理起到重要的調(diào)控作用。
【文章頁數(shù)】:9 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 供試菌株
1.2 主要試劑與儀器
1.3 異質(zhì)雙核菌株的獲取
1.4 單核菌株和異質(zhì)雙核菌株的菌落形態(tài)觀察與鏡檢
1.5 異質(zhì)雙核菌株的分子驗證
1.6 菌絲液體培養(yǎng)與收集
1.7 蛋白質(zhì)的提取
1.8 蛋白質(zhì)濃度的測定
1.9 蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜分析
1.10 基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜分析與數(shù)據(jù)庫檢索
2 結(jié)果與分析
2.1 單核菌株和異質(zhì)雙核菌株的菌落形態(tài)觀察與顯微鏡鏡檢結(jié)果
2.2 異質(zhì)雙核菌株的ISSR鑒定
2.3 金針菇異質(zhì)雙核菌株的菌絲蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜分析結(jié)果
2.4 差異蛋白的鑒定與分類
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]核、質(zhì)基因?qū)Ψ涡蝹?cè)耳菌絲生長、營養(yǎng)成分及基因表達的影響[J]. 葉麗云,孟國良,宋燕嬌,郝金斌,劉新銳,吳小平. 菌物學報. 2019(06)
[2]中國五種重要食用菌學名新注[J]. 戴玉成,楊祝良. 菌物學報. 2018(12)
[3]雙向核遷移在香菇遺傳和育種中的應用研究[J]. 劉靖宇,劉新銳,鄧優(yōu)錦,劉芳,謝寶貴. 菌物學報. 2011(05)
[4]雙孢蘑菇基質(zhì)降解能力退化的差異蛋白質(zhì)組學分析[J]. 陳美元,王澤生,廖劍華,李洪榮,蔡志欣,謝寶貴. 菌物學報. 2011(03)
[5]雙孢蘑菇耐溫差異蛋白質(zhì)組學研究[J]. 陸兆明,徐禎,王珂,陳澄,陳岑淥璐,宋思揚. 廈門大學學報(自然科學版). 2009(04)
[6]14-3-3蛋白功能研究進展[J]. 曾妍,鄭志紅,楊磊. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2008(07)
碩士論文
[1]超表達高粱果糖-1,6-二磷酸醛縮酶基因(SbFBA)擬南芥對干旱脅迫的響應[D]. 劉軍霞.西北農(nóng)林科技大學 2015
本文編號:3672613
【文章頁數(shù)】:9 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 供試菌株
1.2 主要試劑與儀器
1.3 異質(zhì)雙核菌株的獲取
1.4 單核菌株和異質(zhì)雙核菌株的菌落形態(tài)觀察與鏡檢
1.5 異質(zhì)雙核菌株的分子驗證
1.6 菌絲液體培養(yǎng)與收集
1.7 蛋白質(zhì)的提取
1.8 蛋白質(zhì)濃度的測定
1.9 蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜分析
1.10 基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜分析與數(shù)據(jù)庫檢索
2 結(jié)果與分析
2.1 單核菌株和異質(zhì)雙核菌株的菌落形態(tài)觀察與顯微鏡鏡檢結(jié)果
2.2 異質(zhì)雙核菌株的ISSR鑒定
2.3 金針菇異質(zhì)雙核菌株的菌絲蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜分析結(jié)果
2.4 差異蛋白的鑒定與分類
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]核、質(zhì)基因?qū)Ψ涡蝹?cè)耳菌絲生長、營養(yǎng)成分及基因表達的影響[J]. 葉麗云,孟國良,宋燕嬌,郝金斌,劉新銳,吳小平. 菌物學報. 2019(06)
[2]中國五種重要食用菌學名新注[J]. 戴玉成,楊祝良. 菌物學報. 2018(12)
[3]雙向核遷移在香菇遺傳和育種中的應用研究[J]. 劉靖宇,劉新銳,鄧優(yōu)錦,劉芳,謝寶貴. 菌物學報. 2011(05)
[4]雙孢蘑菇基質(zhì)降解能力退化的差異蛋白質(zhì)組學分析[J]. 陳美元,王澤生,廖劍華,李洪榮,蔡志欣,謝寶貴. 菌物學報. 2011(03)
[5]雙孢蘑菇耐溫差異蛋白質(zhì)組學研究[J]. 陸兆明,徐禎,王珂,陳澄,陳岑淥璐,宋思揚. 廈門大學學報(自然科學版). 2009(04)
[6]14-3-3蛋白功能研究進展[J]. 曾妍,鄭志紅,楊磊. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學. 2008(07)
碩士論文
[1]超表達高粱果糖-1,6-二磷酸醛縮酶基因(SbFBA)擬南芥對干旱脅迫的響應[D]. 劉軍霞.西北農(nóng)林科技大學 2015
本文編號:3672613
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