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黃秋葵ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因(HeZDS)的克隆與表達分析

發(fā)布時間:2022-07-16 17:27
  胡蘿卜素脫氫酶(ζ-carotene desaturase, ZDS)是類胡蘿卜素合成的重要限速酶,其催化ζ-胡蘿卜素生成番茄紅素。本研究根據(jù)黃秋葵(Hibiscus esculentus)轉(zhuǎn)錄組測序獲得的序列數(shù)據(jù),設(shè)計引物克隆得到1條2 189 bp的ZDS基因cDNA全長,其具有1 686 bp的ORF;編碼561個氨基酸,理論分子量為61.79kD,等電點(pI)為6.807;編碼的蛋白與亞洲棉(Gossypium arboreum)、陸地棉(G. hirsutum)、黃麻(Corchorus capsularis)、榴蓮(Durio zibethinus)、可可(Theobroma cacao)等蛋白的同源性均超過90%,顯示其高度的保守性,將基因命名為HeZDS,GenBank登錄號為:MG372371。qRT-PCR定量分析表明,黃秋葵根、莖、葉、花和果實等器官中都有檢測到HeZDS基因;葉發(fā)育過程中以成熟葉中表達量最高,果實發(fā)育中以花后2 d高表達。HeZDS基因的表達與類胡蘿卜素含量存在密切的相關(guān)性。本研究為HeZDS的功能和類胡蘿卜素調(diào)控機制研究提供了資料基礎(chǔ)。 

【文章頁數(shù)】:11 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 儀器和試劑
    1.3 轉(zhuǎn)錄組測序
    1.4 HeZDS基因的生物信息學分析
    1.5 HeZDS基因的實時熒光定量分析
    1.6 類胡蘿卜素提取和測定
2 結(jié)果與分析
    2.1 HeZDS基因克隆與驗證
    2.2 HeZDS基因序列的生物信息分析
    2.3 HeZDS基因的表達分析
        2.3.1 黃秋葵不同品種不同組織中HeZDS基因表達
        2.3.2 黃秋葵葉片發(fā)育過程中HeZDS基因的表達
        2.3.3 黃秋葵果實發(fā)育過程中HeZDS基因的表達
    2.4 類胡蘿卜素積累量分析
        2.4.1 黃秋葵不同組織類胡蘿卜素積累量分析
        2.4.2 黃秋葵葉片不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
        2.4.3 黃秋葵果實不同發(fā)育階段類胡蘿卜素積累量分析
    2.5 HeZDS基因表達與類胡蘿卜素積累量的相關(guān)性分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]黃秋葵八氫番茄紅素合成酶PSY基因的克隆與分析[J]. 李永平,陳敏氡,朱海生,溫慶放,劉建汀,林思鍛.  中國細胞生物學學報. 2019(10)
[2]黃秋葵八氫番茄紅素脫氫酶基因的克隆與分析[J]. 李永平,王彬,陳敏氡,劉建汀,朱海生,溫慶放.  西北植物學報. 2019(07)
[3]桃果實ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達分析[J]. 梁敏華,楊震峰,蘇新國,宋春波.  南方農(nóng)業(yè)學報. 2018(05)
[4]鶴望蘭ζ–胡蘿卜素脫氫酶基因SrZDS的克隆及表達分析[J]. 樊榮輝,黃敏玲,鐘淮欽,林兵.  園藝學報. 2016(05)
[5]黃瓜ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因克隆及表達分析[J]. 王柬人,李錫香,王海平,邱楊,宋江萍,張曉輝,沈鏑.  分子植物育種. 2012(05)
[6]草莓ζ-胡蘿卜素脫氫酶基因ZDS的克隆及特征分析[J]. 李永平,朱海生,溫慶放,花秀鳳,林琿.  熱帶亞熱帶植物學報. 2010(06)
[7]14個黃秋葵品系葉黃素和β-胡蘿卜素產(chǎn)量比較試驗[J]. 劉東祥,葉花蘭,劉國道.  中國農(nóng)學通報. 2006(06)
[8]通過轉(zhuǎn)基因提高β-胡蘿卜素生物合成量[J]. 季靜,山村三郎,西原昌宏,王罡,小巖弘之,朱長甫.  中國生物化學與分子生物學報. 2004(04)



本文編號:3662946

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