蘋果矮化砧木T337中BR相關(guān)基因CBB1、miR492及其靶基因BAK1的克隆與表達(dá)分析
發(fā)布時間:2022-04-28 23:16
T337是目前應(yīng)用最廣泛的矮化蘋果砧木之一,但是其自身株高的調(diào)控機制尚未被完全揭示。前人研究證明傳統(tǒng)的五大類植物激素與蘋果砧木的高矮存在密切的聯(lián)系。模式植物擬南芥和水稻的研究表明,第六大植物激素油菜素內(nèi)酯(BR)及其相關(guān)基因與植株高度有著密切聯(lián)系。然而,在木本植物尤其是蘋果矮化砧木上,關(guān)于BR株高調(diào)控機理的研究尚未見報道。本試驗旨在揭示BR及其相關(guān)基因?qū)337株高調(diào)控的功能,闡釋BR參與T337株高調(diào)控的分子機制。本試驗以T337盆栽苗為試材,選取了BR合成的關(guān)鍵基因CBB1作為研究對象,同時根據(jù)降解組和mi RNA組測序結(jié)果,篩選了BR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蘋果新mi R492及其靶基因BAK1作為研究對象,研究了MdCBB1、miR492及MdBAK1在T337株高調(diào)控中的作用機制。獲得以下結(jié)果:1.以T337的cDNA為模板,克隆了MdCBB1.1、MdCBB1.2和MdBAK1.1、MdBAK1.2基因,獲得的cDNA長度分別為1781bp、1878bp和2090 bp、2058 bp,ORF(開放閱讀框)分別為1707bp、1707bp和1851bp、1848bp,分別編碼568、...
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.1.1 蘋果主要矮化砧木
1.1.2 蘋果矮化砧木生長特性與致矮機理的研究進(jìn)展
1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因關(guān)于株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1.4 miRNAs參與株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.2 本研究的目的意義
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆與表達(dá)分析
2.1 材料與試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 處理與取樣
2.2.2 總RNA的提取與檢測
2.2.3 MdCBB1基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.2.4 MdCBB1基因的表達(dá)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 外源BR對T337株高的影響
2.3.2 基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表達(dá)分析
2.4 討論
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆與表達(dá)分析
3.1 材料與試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 植物材料小分子RNA與DNA的提取
3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆與生物信息學(xué)分析
3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.2.4 miR492的表達(dá)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 基因克隆與序列分析
3.3.2 成熟miR492與mi R492基因及啟動子的克隆與生物信息學(xué)分析
3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表達(dá)分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油菜素內(nèi)酯處理對谷子農(nóng)藝性狀和生理特性的影響[J]. 鐘妍婷,原向陽,劉哲,徐家燕,溫芳英,張美濤,黃蕾,溫銀元,董淑琦,張麗光,郭平毅. 作物雜志. 2015(02)
[2]植物中miRNA及其靶基因mRNA剪切位點的常用檢測方法[J]. 金安娜,李建雄,田志宏. 長江大學(xué)學(xué)報(自科版). 2014(11)
[3]矮化中間砧對華紅蘋果致矮機理初探[J]. 李海燕,趙德英,袁繼存,程存剛,徐鍇,張彥昌. 中國果樹. 2013(03)
[4]果樹矮化機理研究進(jìn)展[J]. 劉彥紅,張志華. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2002(S1)
[5]高等植物油菜素內(nèi)酯的生物合成及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 劉華英,蕭浪濤,藺萬煌. 生命科學(xué)研究. 2002(S2)
[6]油菜素內(nèi)酯(BR)促進(jìn)植物生長機理研究進(jìn)展[J]. 侯雷平,李梅蘭. 植物學(xué)通報. 2001(05)
[7]蘋果屬(Malus)顯性矮化主基因Dw的RAPD分子標(biāo)記[J]. 張開春,畢曉穎,李榮旗,景士西,吳祿平,尹淑萍. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 1999(02)
[8]國內(nèi)外蘋果矮化砧木選育與使用概況[J]. 林淑芳. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 1997(01)
[9]蘋果葉片中吲哚乙酸氧化酶與過氧化物酶活性的相關(guān)性[J]. 劉魁英,趙宗蕓,王同坤. 華北農(nóng)學(xué)報. 1993(S1)
[10]矮砧蘋果的發(fā)展前景[J]. 楊進(jìn). 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 1983(06)
博士論文
[1]蘋果砧木M9作自根砧或中間砧的致矮機理研究[D]. 張鶴.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]蘋果矮化基因Md連鎖標(biāo)記的篩選及染色體定位[D]. 石麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3649729
【文章頁數(shù)】:44 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 研究背景
1.1.1 蘋果主要矮化砧木
1.1.2 蘋果矮化砧木生長特性與致矮機理的研究進(jìn)展
1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因關(guān)于株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.1.4 miRNAs參與株高調(diào)控的研究進(jìn)展
1.2 本研究的目的意義
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆與表達(dá)分析
2.1 材料與試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 處理與取樣
2.2.2 總RNA的提取與檢測
2.2.3 MdCBB1基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.2.4 MdCBB1基因的表達(dá)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 外源BR對T337株高的影響
2.3.2 基因克隆與生物信息學(xué)分析
2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表達(dá)分析
2.4 討論
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆與表達(dá)分析
3.1 材料與試劑
3.2 實驗方法
3.2.1 植物材料小分子RNA與DNA的提取
3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆與生物信息學(xué)分析
3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.2.4 miR492的表達(dá)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 基因克隆與序列分析
3.3.2 成熟miR492與mi R492基因及啟動子的克隆與生物信息學(xué)分析
3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表達(dá)分析
3.4 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]油菜素內(nèi)酯處理對谷子農(nóng)藝性狀和生理特性的影響[J]. 鐘妍婷,原向陽,劉哲,徐家燕,溫芳英,張美濤,黃蕾,溫銀元,董淑琦,張麗光,郭平毅. 作物雜志. 2015(02)
[2]植物中miRNA及其靶基因mRNA剪切位點的常用檢測方法[J]. 金安娜,李建雄,田志宏. 長江大學(xué)學(xué)報(自科版). 2014(11)
[3]矮化中間砧對華紅蘋果致矮機理初探[J]. 李海燕,趙德英,袁繼存,程存剛,徐鍇,張彥昌. 中國果樹. 2013(03)
[4]果樹矮化機理研究進(jìn)展[J]. 劉彥紅,張志華. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2002(S1)
[5]高等植物油菜素內(nèi)酯的生物合成及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展[J]. 劉華英,蕭浪濤,藺萬煌. 生命科學(xué)研究. 2002(S2)
[6]油菜素內(nèi)酯(BR)促進(jìn)植物生長機理研究進(jìn)展[J]. 侯雷平,李梅蘭. 植物學(xué)通報. 2001(05)
[7]蘋果屬(Malus)顯性矮化主基因Dw的RAPD分子標(biāo)記[J]. 張開春,畢曉穎,李榮旗,景士西,吳祿平,尹淑萍. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 1999(02)
[8]國內(nèi)外蘋果矮化砧木選育與使用概況[J]. 林淑芳. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 1997(01)
[9]蘋果葉片中吲哚乙酸氧化酶與過氧化物酶活性的相關(guān)性[J]. 劉魁英,趙宗蕓,王同坤. 華北農(nóng)學(xué)報. 1993(S1)
[10]矮砧蘋果的發(fā)展前景[J]. 楊進(jìn). 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 1983(06)
博士論文
[1]蘋果砧木M9作自根砧或中間砧的致矮機理研究[D]. 張鶴.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
碩士論文
[1]蘋果矮化基因Md連鎖標(biāo)記的篩選及染色體定位[D]. 石麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
本文編號:3649729
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