草莓果實品質(zhì)受到很多因素的影響,其中包括遺傳因素、氣候條件和栽培技術(shù)如適時定植和水肥管理等。肥料是影響草莓果實品質(zhì)和產(chǎn)量的重要因素,然而國內(nèi)外關(guān)于磷（Phosphorus,P）對草莓生長發(fā)育和果實品質(zhì)形成作用及其機制的報道卻很少。本研究以鳳梨草莓為試材,揭示了草莓果實可溶性固形物含量（Soluble solids content,SSC）與P含量之間存在著極顯著的正相關(guān)性。為了闡明P影響果實SSC的分子機制,從鳳梨草莓中分離克隆出3個PHO1基因,探明了其序列特征和表達特性,并通過對擬南芥和草莓的遺傳轉(zhuǎn)化分析了其功能。主要結(jié)果如下：1.分別對24個品種（系）草莓和同一品種‘幸香’不同采收日期草莓的整個果實中SSC與P含量進行相關(guān)性分析,發(fā)現(xiàn)兩者均呈極顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為0.95和0.96。對草莓果實不同部位（尖部,中部,基部）中SSC與P含量進行相差牲分析,發(fā)現(xiàn)兩者也呈極顯著正相關(guān),r=0.87。2.通過對‘艷麗’草莓施加不同濃度P肥（磷酸）,驗證了SSC與P含量之間的相關(guān)性。6.0 mM處理下,紅熟期果實中P含量和SSC均有了顯著提高,分別提高了45.0%和16.7%。6.0... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 磷轉(zhuǎn)運蛋白基因的類型
        1.1.1 PHT1家族
        1.1.2 PHT2家族
        1.1.3 PHO1家族
        1.1.4 其他基因家族
    1.2 磷轉(zhuǎn)運蛋白基因的調(diào)控因子
        1.2.1 磷酸鹽
        1.2.2 植物激素
        1.2.3 糖信號
        1.2.4 轉(zhuǎn)錄因子
        1.2.5 MicroRNA
    1.3 磷轉(zhuǎn)運蛋白基因PHO1研究進展
    1.4 草莓果實品質(zhì)與P相關(guān)性的研究
    1.5 本研究的目的和意義
第二章 草莓果實可溶性固形物含量與磷含量的相關(guān)性
    2.1 材料與方法
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 草莓果實SSC的測定
        2.1.3 草莓P含量的測定
        2.1.4 草莓總糖含量的測定
        2.1.5 外源施加P肥驗證
        2.1.6 光合參數(shù)的測定
        2.1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 草莓果實中總糖含量占SSC的比例
        2.2.2 草莓完整果實中P含量與SSC的相關(guān)性
        2.2.3 草莓果實不同部位中P含量與SSC的相關(guān)性
        2.2.4 追施P肥提高草莓植株P(guān)含量和果實SSC的作用
        2.2.5 追施P肥對草莓植株光合效率的影響
    2.3 討論
        2.3.1 草莓糖含量與P含量的相關(guān)性
        2.3.2 草莓植株P(guān)含量增加導致果實糖含量增加的機制
    2.4 小結(jié)
第三章 草莓PHO1基因的序列特征和表達特性
    3.1 材料與方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 草莓總RNA提取
        3.1.3 草莓總RNA質(zhì)量檢測
        3.1.4 cDNA合成
        3.1.5 PCR擴增
        3.1.6 PCR產(chǎn)物的凝膠回收
        3.1.7 目的片段與T載體連接
        3.1.8 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌
        3.1.9 重組質(zhì)粒PCR鑒定
        3.1.10 重組質(zhì)粒提取
        3.1.11 PHO1基因序列分析
        3.1.12 PHO1基因表達檢測
        3.1.13 外源施加P肥試驗
        3.1.14 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 草莓PHO1基因的分離克隆
        3.2.2 草莓PHO1基因的序列特征
        3.2.3 草莓PHO1基因的表達特性
    3.3 討論
        3.3.1 PHO1蛋白的結(jié)構(gòu)域
        3.3.2 PHO1基因的表達特性
    3.4 小結(jié)
第四章 草莓PHO1基因的功能分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌株及載體
        4.1.3 過量表達載體構(gòu)建
        4.1.4 RNAi載體構(gòu)建
        4.1.5 農(nóng)桿菌感受態(tài)制備
        4.1.6 載體導入農(nóng)桿菌
        4.1.7 擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化
        4.1.8 草莓遺傳轉(zhuǎn)化
        4.1.9 轉(zhuǎn)化株系PCR鑒定
        4.1.10 實時定量RT-PCR
        4.1.11 植株P(guān)含量測定
        4.1.12 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 草莓PHO1基因在擬南芥中異位表達及功能分析
        4.2.2 在草莓中沉默F(xiàn)aPHO1；H9基因的功能分析
    4.3 討論
        4.3.1 PHO1基因與P含量的關(guān)系
        4.3.2 PHO1基因的功能
    4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)論及創(chuàng)新點
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
參考文獻
附錄
致謝
攻讀學位期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3637170