元寶楓（Acer truncatum Bunge）是槭樹科槭樹屬原產(chǎn)中國的落葉喬木,屬于重要的彩葉觀葉樹種,也是近些年來具有重要開發(fā)價值的經(jīng)濟樹種,同時,隨著元寶楓育種越來越受到重視,相關(guān)科研人員不斷選育出更多的新無性系品種/品系,因此,研究元寶楓無性系品種/品系DNA指紋圖譜的構(gòu)建技術(shù)十分必要。本研究以課題組選育和收集的23個元寶楓無性系為研究對象,采集各無性系的葉片為試驗材料,探究元寶楓葉片基因組DNA的最佳提取方法,建立了SRAP-PCR擴增的最佳反應(yīng)體系,對其遺傳多樣性及親緣關(guān)系進行了分析,構(gòu)建了23個無性系優(yōu)良品種的指紋圖譜,為其以后的親本選擇,品種鑒定及新品種的保護及分類奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.確定了合適的DNA提取方法。通過采用傳統(tǒng)的CTAB法、改良CTAB法與試劑盒法對元寶楓無性系葉片DNA進行提取,確定了適合元寶楓的葉片DNA提取的方法,即:改良CTAB法和試劑盒法。考慮到試驗樣品量不是很大,從節(jié)儉經(jīng)費考慮最終確定采用改良CTAB進行本次試驗。2.建立了元寶楓SRAP-PCR的最佳反應(yīng)體系。通過正交實驗,得出了適合元寶楓無性系SRAP-PCR的最佳反應(yīng)體系,... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學山東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

部分元寶楓無性系葉片

元寶楓無性系 DNA 指紋圖譜的構(gòu)建 結(jié)果與分析.1 元寶楓無性系基因組 DNA 的提取DNA 提取常見的方法有 SDS 法，常規(guī) CTAB 法，改良 CTAB 法及試劑盒法，驗采用傳統(tǒng) CTAB 法、改良 CTAB 法及試劑盒法三種種進行試驗。結(jié)果表明，傳TAB 法(圖 3-1)，拖帶嚴重，樣孔亮，彌散現(xiàn)象也較較嚴重，并不適合元寶楓葉片，而試劑盒法（圖 3-2）與改良的 CTAB 法（圖 3-3）其 DNA 的質(zhì)量及濃度均符要求，改良 CTAB 法耗時較長，但是濃度大；試劑盒法，省時，操作簡單，但花費度低，考慮到試驗經(jīng)費及樣品數(shù)量不是很多，所以采用改良的 CTAB 法進行對元性系基因組 DNA 的提取。

元寶楓無性系 DNA 指紋圖譜的構(gòu)建 結(jié)果與分析.1 元寶楓無性系基因組 DNA 的提取DNA 提取常見的方法有 SDS 法，常規(guī) CTAB 法，改良 CTAB 法及試劑盒法，驗采用傳統(tǒng) CTAB 法、改良 CTAB 法及試劑盒法三種種進行試驗。結(jié)果表明，傳TAB 法(圖 3-1)，拖帶嚴重，樣孔亮，彌散現(xiàn)象也較較嚴重，并不適合元寶楓葉片，而試劑盒法（圖 3-2）與改良的 CTAB 法（圖 3-3）其 DNA 的質(zhì)量及濃度均符要求，改良 CTAB 法耗時較長，但是濃度大；試劑盒法，省時，操作簡單，但花費度低，考慮到試驗經(jīng)費及樣品數(shù)量不是很多，所以采用改良的 CTAB 法進行對元性系基因組 DNA 的提取。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]砂梨核心種質(zhì)SSR標準指紋圖譜構(gòu)建[J]. 張靖國,田瑞,陳啟亮,楊曉平,范凈,胡紅菊.  湖北農(nóng)業(yè)科學. 2015(24)
[2]基于SRAP分子標記構(gòu)建的菊苣遺傳連鎖圖譜[J]. 梁小玉,季楊,白史且,黃琳凱,張新全.  草業(yè)學報. 2015(05)
[3]基于SRAP標記的國蘭種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及分子身份證構(gòu)建[J]. 唐源江,曹雯靜,吳坤林.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2015(09)
[4]利用SRAP標記分析春蘭種質(zhì)資源遺傳多樣性[J]. 牛田,張林,王厚新,李承秀,聶碩,朱翠翠,王長憲.  農(nóng)學學報. 2014(08)
[5]利用SRAP標記鑒別美洲黑楊及指紋圖譜構(gòu)建[J]. 郭娟,樊軍鋒,梁軍,李薇.  西北林學院學報. 2014(02)
[6]24種桉樹無性系指紋圖譜構(gòu)建[J]. 張照遠,項東云,鄧紫宇,唐慶蘭,陳健波,蘭俊.  西北林學院學報. 2013(02)
[7]用SRAP標記構(gòu)建松樹良種指紋圖譜方法的研究[J]. 楊會肖,劉天頤,羅銳,劉純鑫,黃少偉.  廣東林業(yè)科技. 2012(05)
[8]基于SRAP分子標記的安祖花遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建[J]. 于翠,金茂勇,張寶珠,明軍,袁素霞,王釗,儲麗紅,劉春.  園藝學報. 2012(06)
[9]菊花品種表型性狀與SRAP分子標記的關(guān)聯(lián)分析[J]. 李仁偉,王晨,戴思蘭,雒新艷,李寶琴,朱珺,盧潔,劉倩倩.  中國農(nóng)業(yè)科學. 2012(07)
[10]基于SRAP標記的墨西哥落羽杉優(yōu)良單株的遺傳多樣性分析[J]. 周冬琴,莫海波,蘆治國,於朝廣,徐和寶,殷云龍.  植物資源與環(huán)境學報. 2012(01)

博士論文
[1]新疆的梨種質(zhì)資源評價及核心種質(zhì)庫構(gòu)建[D]. 玉蘇甫·阿不力提甫（Yusuf.Ablitif）.新疆農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]中國野生板栗（Castanea mollissim Blume）群體遺傳結(jié)構(gòu)和核心種質(zhì)構(gòu)建方法[D]. 馬玉敏.山東農(nóng)業(yè)大學 2009
[3]桂花種質(zhì)資源遺傳多樣性研究及品種鑒定[D]. 李梅.南京農(nóng)業(yè)大學 2009
[4]北美一球懸鈴木無性系選育及其體胚發(fā)生等快繁技術(shù)研究[D]. 蔡曉明.南京林業(yè)大學 2008
[5]梅花DNA指紋圖譜的建立與研究[D]. 明軍.北京林業(yè)大學 2002

碩士論文
[1]湘產(chǎn)百合的SRAP分析與核心種質(zhì)庫的初步構(gòu)建[D]. 高昱.湖南中醫(yī)藥大學 2015
[2]向日葵SRAP分子標記遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建[D]. 于志賢.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2014
[3]部分國蘭品種（系）的SRAP遺傳多樣性研究[D]. 龔理.福建農(nóng)林大學 2014
[4]觀賞芍藥部分新種質(zhì)SSR遺傳多樣性分析及DNA指紋圖譜構(gòu)建[D]. 季麗靜.北京林業(yè)大學 2013
[5]紫薇微衛(wèi)星標記開發(fā)及矮化性狀的分子標記[D]. 劉陽.北京林業(yè)大學 2013
[6]楊樹新品種（無性系）SSR和ISSR指紋圖譜的構(gòu)建[D]. 劉春英.西北農(nóng)林科技大學 2013
[7]玫瑰遺傳多樣性的SRAP分析與品種指紋圖譜構(gòu)建[D]. 徐宗大.山東農(nóng)業(yè)大學 2011
[8]白楊雜種三倍體無性系形態(tài)鑒定及指紋圖譜構(gòu)建[D]. 尹敏娟.北京林業(yè)大學 2011
[9]中國芍藥品種遺傳多樣性SRAP分析和核心種質(zhì)的初步構(gòu)建[D]. 王曉菡.山東農(nóng)業(yè)大學 2010
[10]雜交鵝掌楸優(yōu)良遺傳型選擇及無性系指紋圖譜構(gòu)建[D]. 王龍強.南京林業(yè)大學 2010



本文編號：3517248