發(fā)布時間：2020-11-12 16:59

　　 側(cè)耳屬[Pleurotus(Fr.)Kumm]食用菌屬木腐型菌類,易栽培、產(chǎn)量大,口感好、味道佳,營養(yǎng)豐富,具有較高的經(jīng)濟價值和食藥用功效,與人類生活密切相關(guān);鮑魚菇(Pleurotus abalonus)系側(cè)耳屬食用菌主要品種之一,由于其生長條件和陜南氣候相適應(yīng),已逐漸成為當(dāng)?shù)貏?chuàng)收菌種,走向市場化道路。陜南食用菌種質(zhì)資源豐富,作為主栽品種的側(cè)耳屬食用菌更是物種繁多,但普遍存在種名混亂現(xiàn)象。研究陜南側(cè)耳屬食用菌種質(zhì)資源多樣性,可有效避免種名混亂,同時為其種質(zhì)資源庫的建立和優(yōu)良菌種的選育奠定基礎(chǔ);優(yōu)化側(cè)耳屬鮑魚菇液體種發(fā)酵培養(yǎng)基,可為陜南跨區(qū)域引進鮑魚菇菌種的液體發(fā)酵培養(yǎng)和中試生產(chǎn)提供理論參考,以期擴大新菌種栽培量、提高產(chǎn)量。本研究首次以陜南35株側(cè)耳屬食用菌主栽菌種為試材,基于生物學(xué)特性、拮抗反應(yīng)、酯酶同工酶和ITS序列綜合研究了陜南側(cè)耳屬食用菌種質(zhì)資源多樣性;對陜南側(cè)耳屬鮑魚菇液體種發(fā)酵培養(yǎng)基進行響應(yīng)面優(yōu)化,確定其最佳組合。研究結(jié)果如下:1.陜南側(cè)耳屬食用菌生物學(xué)特性研究為研究陜南側(cè)耳屬食用菌生物學(xué)特性,收集并考察了35株供試菌種的農(nóng)學(xué)性狀,采用組織培養(yǎng)法和栽培試驗研究其菌落形態(tài)、液體種形態(tài)、子實體形態(tài)、生長發(fā)育情況和拮抗反應(yīng)。結(jié)果表明:35株供試菌種的菌落形態(tài)、色澤、濃密程度和生長速度,液體種形態(tài)、色澤、大小、密度和發(fā)酵液顏色,子實體形態(tài)、色澤、產(chǎn)量和生長發(fā)育情況,栽培方式、出菇溫度、溫型、抗雜性和速生性均表現(xiàn)出豐富的生物多樣性;根據(jù)固體培養(yǎng)條件下的菌絲色澤可將其分為5類、根據(jù)拮抗反應(yīng)程度可分為4類;子實體形態(tài)特征可明顯區(qū)分出菌種C23(淡紅色扇形菌蓋)、C27(黃色漏斗形菌蓋)和C29(淡黃色小半球形菌蓋);菌種C4的菌絲體、子實體生長速度快,液體種顆粒小、密度高,生物轉(zhuǎn)化率高,抗雜性強,栽培優(yōu)勢顯著。2.陜南側(cè)耳屬食用菌遺傳多樣性研究為研究陜南側(cè)耳屬食用菌遺傳多樣性,采用酯酶同工酶技術(shù)、ITS序列分析,構(gòu)建了酶譜的相似系數(shù)表和聚類圖以及ITS序列的遺傳距離表和系統(tǒng)發(fā)育樹,同時結(jié)合生物學(xué)特性,明確了供試菌種的生物學(xué)種名和親緣關(guān)系。結(jié)果表明:35株供試菌種中有9株佛羅里達(dá)側(cè)耳(Pleurotus floridanus),8株刺芹側(cè)耳(Pleurotus eryngii),7株糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatus),6株美味側(cè)耳(Pleurotus sapidus),1株白靈側(cè)耳(Pleurotus nebrodensis),1株鮑魚側(cè)耳(Pleurotus abalonus),1株桃紅側(cè)耳(Pleurotus salmoneostramineus),1株金頂側(cè)耳(Pleurotus citrinopileatus),1株金針菇(Flammulina velutipes)(非側(cè)耳屬);菌種C2和C11、C17和C18、C19和C20、C21和C25為同種異名,菌種C23、C27和C28為種名不一。3.陜南側(cè)耳屬之鮑魚菇液體種發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化以陜南跨區(qū)域引進的側(cè)耳屬鮑魚菇菌絲生物量為主要指標(biāo),采用Plackett-Burman試驗和最陡爬坡試驗確定響應(yīng)因素與水平,Box-Benhnken響應(yīng)曲面法優(yōu)化得到鮑魚菇液體種發(fā)酵培養(yǎng)基最佳組合(g/L):馬鈴薯240.00、葡萄糖30.00、玉米粉15.00、蛋白胨5.00、KH2PO4 3.00、MgSO4·7H2O 2.00、VB1 0.10,水1 L,pH自然。優(yōu)化后的鮑魚菇菌絲球顆粒小、密度高,生物量干重實測值為15.126 g/L,相比初始條件下的菌絲生物量干重實測值提高了17.92%。
【學(xué)位單位】：陜西理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S646
【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 側(cè)耳屬食用菌概述
        1.1.1 側(cè)耳屬食用菌生物學(xué)特性
        1.1.2 側(cè)耳屬食用菌生活史
        1.1.3 側(cè)耳屬食用菌食（藥）用價值
        1.1.4 側(cè)耳屬食用菌發(fā)展前景
    1.2 陜南食用菌發(fā)展現(xiàn)狀
        1.2.1 環(huán)境條件
        1.2.2 陜南食用菌物種概況
        1.2.3 陜南食用菌產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀
    1.3 食用菌種質(zhì)資源研究方法
        1.3.1 生物學(xué)特性研究方法
        1.3.2 同工酶研究方法
        1.3.3 DNA分子研究方法
    1.4 食用菌液體發(fā)酵技術(shù)研究進展
        1.4.1 原理及特點
        1.4.2 發(fā)展現(xiàn)狀
    1.5 研究背景及內(nèi)容
        1.5.1 研究背景
        1.5.2 研究內(nèi)容
第2章 陜南側(cè)耳屬食用菌生物學(xué)特性研究
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試菌種及來源
        2.1.2 培養(yǎng)基配方
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 儀器設(shè)備
    2.2 試驗方法
        2.2.1 菌種活化
        2.2.2 菌落形態(tài)特征及生長速度
        2.2.3 液體種形態(tài)特征
        2.2.4 拮抗反應(yīng)
        2.2.5 子實體形態(tài)特征及生長情況
        2.2.6 農(nóng)學(xué)性狀調(diào)查
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 菌落形態(tài)特征及生長速度
        2.3.2 液體種形態(tài)特征
        2.3.3 拮抗反應(yīng)
        2.3.4 子實體形態(tài)特征及生長情況
        2.3.5 供試菌種農(nóng)學(xué)性狀
    2.4 討論
第3章 陜南側(cè)耳屬食用菌遺傳多樣性研究
    3.1 試驗材料
        3.1.1 供試菌種信息
        3.1.2 培養(yǎng)基配方
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 儀器設(shè)備
    3.2 試驗方法
        3.2.1 菌種活化
        3.2.2 酯酶同工酶提取及檢測
        3.2.3 基因組DNA提取及檢測
        3.2.4 ITS序列擴增及分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 酯酶同工酶酶譜分析
        3.3.2 酯酶同工酶酶譜聚類分析
        3.3.3 ITS序列電泳圖譜分析
        3.3.4 ITS序列信息及遺傳距離
        3.3.5 基于ITS序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹
    3.4 討論
        3.4.1 酯酶同工酶結(jié)果討論
        3.4.2 ITS序列分析結(jié)果討論
        3.4.3 供試菌種的親緣關(guān)系討論
第4章 陜南側(cè)耳屬之鮑魚菇液體種發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
    4.1 試驗材料
        4.1.1 供試菌種
        4.1.2 培養(yǎng)基配方
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 儀器設(shè)備
    4.2 試驗方法
        4.2.1 菌種活化
        4.2.2 液體種的制備
        4.2.3 鮑魚菇菌絲生物量的測定
        4.2.4 Plackett-Burman設(shè)計試驗
        4.2.5 最陡爬坡試驗
        4.2.6 Box-Behnken試驗設(shè)計
        4.2.7 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 Plackett-Burman試驗結(jié)果
        4.3.2 最陡爬坡試驗
        4.3.3 Box-Benhnken試驗結(jié)果
        4.3.4 Box-Benhnken試驗方差分析
        4.3.5 響應(yīng)面圖形分析
        4.3.6 試驗驗證
    4.4 討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間學(xué)術(shù)成果
致謝

【參考文獻】

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