本文對(duì)'碭山酥梨'和'秋月'在內(nèi)的88個(gè)品種進(jìn)行石細(xì)胞含量的測(cè)定,然后以'碭山酥梨'和'秋月'雜交的110個(gè)F1代單株為作圖群體,采用GBS分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合“擬測(cè)交”策略構(gòu)建了分子遺傳圖譜,并通過KW法和ICIM法對(duì)控制梨果實(shí)石細(xì)胞性狀進(jìn)行了 QTL定位研究。梨高密度遺傳圖譜的構(gòu)建和果實(shí)石細(xì)胞QTL定位以及候選基因,為今后梨分子標(biāo)記輔助育種提供了可靠的理論依據(jù)和方法材料,也為其遺傳育種及分子標(biāo)記輔助選擇提供了有益的參考,對(duì)提高梨果實(shí)品質(zhì)具有重要意義。主要結(jié)果如下:1以'碭山酥梨'和'秋月'在內(nèi)的的88個(gè)梨品種資源為試材,利用冷凍分離法對(duì)成熟期的不同梨果實(shí)中的石細(xì)胞含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:(1)88個(gè)梨品種的果肉石細(xì)胞含量平均值為0.227g,其變化范圍為0.032～1.024g,變異系數(shù)為76%。秋子梨品種果肉石細(xì)胞含量總體最高,種間雜交品種最低。(2)基于對(duì)梨果實(shí)中石細(xì)胞含量頻度分析,同時(shí)篩選出'六月酥'、'滿天紅'、'龍泉19'、'中1A3'、'豐水'等5個(gè)石細(xì)胞含量低的品種和'金川野生梨2號(hào)'、'白皮酥'、'紅香酥'、'八月酥'等4個(gè)石細(xì)胞含量高的品種。(3)對(duì)不同梨果實(shí)中石細(xì)胞含量的聚類分析,將所有的梨品種分為兩大類群,砂梨和白梨存在較近的親緣關(guān)系,秋子梨和種間雜交品種有共同特征。2通過對(duì)'碭山酥梨'和'秋月'及雜交F1代群體的果實(shí)石細(xì)胞含量進(jìn)行測(cè)定,并進(jìn)行聚類和頻率分析。聚類分析結(jié)果將112份材料分為父本類群和母本類群,頻率分析結(jié)果顯示作圖頻率分布基本接近正態(tài)分布,因此,此雜交后代群體適合作QTL定位。3利用'碭山酥梨'與'秋月'與的110株雜交F1代群體,以GBS分子標(biāo)記方法構(gòu)建梨的遺傳圖譜,構(gòu)建了一張包含2600個(gè)標(biāo)記位點(diǎn)的圖譜,共17個(gè)遺傳連鎖群,覆蓋了 1824.11 cM的遺傳距離,每個(gè)連鎖群的長(zhǎng)度為0.26～1.14cM,平均長(zhǎng)度為0.71 cM,每個(gè)連鎖群上平均分布153個(gè)位點(diǎn)。通過Joinmap5.0分析軟件基于構(gòu)建的遺傳圖譜,結(jié)合F1群體果實(shí)石細(xì)胞含量的表型值,利用KW和ICIM法進(jìn)行了 QTL定位分析,共檢測(cè)出16個(gè)QTL位點(diǎn)和2個(gè)重要區(qū)域。最后通過對(duì)16個(gè)位點(diǎn)延伸區(qū)域內(nèi)基因以及與2個(gè)重要區(qū)域重疊區(qū)域內(nèi)的基因進(jìn)行KEGG和GO分析,找出了苯丙烷合成途徑,得到了 16個(gè)相關(guān)基因并篩選出3個(gè)候選基因。
【學(xué)位單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S661.2
【部分圖文】：

０．８００；?１７：＞０．８００￣０．８５０；?１８：＞０．８５０￣０．９００；?１９：＞０．９００￣０．９５０；２０：＞０．９５０—?１．０００；２１＞１．０００??２．２不同品種的石細(xì)胞含量的聚類分析??梨果實(shí)中總石細(xì)胞含量的變化范圍是從０．０３２?ｇ到１．０２４ｇ?（圖１－３），平均值是??０．２２７?ｇ，變異系數(shù)為７６％。根據(jù)聚類分析結(jié)果（圖１－２），可將所有的梨品種分為兩??大類群。??第一大類分為砂梨、白梨兩大品系，其根據(jù)石細(xì)胞含量又細(xì)分為不同的亞群，即??砂梨Ｉ、砂梨ＩＩ、砂梨ＩＩＩ、砂梨ＩＶ和白梨Ｉ、白梨ＩＩ、白梨ＩＩＩ。砂梨品種共３７個(gè)，??石細(xì)胞含量的平均值為０．２２４?ｇ，變化范圍為０．０４６－１．０２４?ｇ?（圖１－３），變異系數(shù)為??８６．８５％；其中白梨品種共１８?jìng)�(gè)，石細(xì)胞含量的平均值為０．２４９?ｇ，變化范圍為??０．０３２￣０．５６１ｇ?（圖?１－３），變異系數(shù)為?６６．１６ｇ。??砂梨品系Ｉ的石細(xì)胞含量區(qū)間為０．０４６？０．０６５?ｇ，共５個(gè)，如‘龍泉１９’，‘豐水’、??‘黃金梨’等；砂梨品系ＩＩ的石細(xì)胞含量區(qū)間為０．１０１？０．１４３?ｇ

的典型分布。通過果實(shí)石細(xì)胞含量的變異系數(shù)（０．７０５）可知被調(diào)査的群體個(gè)體間存在??著明顯的分離，均存在一定數(shù)量的超親類型，性狀在親本間具有一定的差異。??果實(shí)石細(xì)胞含量在群體中頻率分布見圖２－２所示，作圖頻率分布基本接近正態(tài)分??布，表明被調(diào)查的性狀受多基因控制，是典型的數(shù)量性狀，因而用此雙親構(gòu)建群體有??可能獲得控制梨果實(shí)相關(guān)性狀的ＱＴＬ。??表２－２果實(shí)石細(xì)胞含量正態(tài)分布檢測(cè)??Ｔａｂｌｅ?４－１?Ｔｅｓｔ?ｏｆ?ｎｏｒｍａｌ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｆｏｒ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｉｎ?ｍａｐｐｉｎｇ?ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ??ｍｉ?ｉｉ?標(biāo)準(zhǔn)差?變異系數(shù)?５ｉｉ??Ｔｒａｉｔ?Ｍｅａｎ?ＳＤ?ＣＶ?（％）?Ｋｕｒｔｏｓｉｓ?Ｓｋｅｗｎｅｓｓ??石細(xì)胞含量?０．１５２?０Ａ０１?０．７０５?９．９８２?２．４３３??Ｍｂ??３（＾??〇?ｉ??將ｓ??遐?Ｉ?Ｊ??ｒ?＼??１?１?１?１?Ｍ?１?Ｉｒ＾ＬＪ—．—．??〇〇〇?〇?｜〇?０?２０?Ｏ?ｉＯ?０４０?０?５０?０．６０?０?７０?０８０??石細(xì)胞含量范圍?Ｒａｎｇｅ?ｏｆ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ??圖２－２?ＦＩ后代石細(xì)胞含量在群體中的頻率分布??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｅ?ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｏｎｅ?ｃｅｌｌ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＦＩ?ｉｎ?ｐ

１．２．２測(cè)序?qū)嶒?yàn)??用干冰將提取的ＤＮＡ運(yùn)輸至深圳華大基因科技服務(wù)有限公司，采用??ＩｌｌｕｍｉｎａＨｉＳｅａ２０００儀進(jìn)行測(cè)序工作。具體建庫流程如圖４－１所示：首先將提取的ＤＮＡ??進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)量合格的進(jìn)行樣品、ｂａｒｃｏｄｅ及接頭的準(zhǔn)備及干燥；之后利用限制性酶??（ＲｅｓｔｒｉｃｔＥｎｚｙｍｅ，ＲＥ）?ＡｐｅＫＩ?（ＧＣＷＧＣ）消化?ＤＮＡ；消化后的?ＤＮＡ?片段兩端加接??頭（ａｄａｐｔｅｒ），其中一端的接頭含有ｂａｒｃｏｄｅ序列，另一端的接頭不含有ｂａｒｃｏｄｅ序列；??然后進(jìn)行Ｐｏｏｌｉｎｇ和純化；純化后進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增，只有兩端接頭種類不同的片段以及??片段長(zhǎng)度在１７０－３５０?ｂｐ之間的可被選擇性擴(kuò)增；最后純化ＰＣＲ產(chǎn)物并將構(gòu)建好的文??庫質(zhì)檢合格后進(jìn)行測(cè)序。??４．?Ｐｏｏｌ?ＤＮＡｓ?＆?Ｃｌｅａｎ?ｕｐ??６．?Ｃｌｅａｎ?ｕｐ?ＰＣＲ??１．?Ｐｌａｔｅ?ＤＮＡ?＆??ａｄａｐｔｅｒｐｌｆ?ｆ?＼??Ｍ?５．?Ｐｅｒｆｏｒｍ?ｆｅｌ?？，??２．?Ｄｉｇｅｓｔ?ＤＮＡ?ｗｉｔｈ?ＡｐｅＫＩ?７．?Ｅｖａｌｕａｔｅ??３．?Ｌｉｇａｔｅ
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8 段增強(qiáng);石細(xì)胞永久制片的新方法[J];河南科學(xué);1996年S1期

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本文編號(hào)：2880419