本研究以6個(gè)不同雜交組合加工番茄為材料,采用醋酸洋紅染液和苯酚品紅染液篩選合適的核染色劑,通過(guò)觀察花粉小孢子發(fā)育時(shí)期確定適合的花藥接種時(shí)期;研究低溫預(yù)處理、高溫預(yù)處理、離心預(yù)處理和甘露醇預(yù)處理對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率的影響;篩選出不同添加物和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比的最優(yōu)花藥培養(yǎng)基。并通過(guò)對(duì)加工番茄花藥離體培養(yǎng)中細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)的觀察,對(duì)花藥小孢子發(fā)育途徑和愈傷組織形態(tài)與細(xì)胞學(xué)進(jìn)行研究,以期建立加工番茄花藥離體培養(yǎng)技術(shù)體系,優(yōu)化花藥單倍體育種技術(shù)。研究結(jié)果如下:1、加工番茄小孢子發(fā)育時(shí)期與花蕾和花藥相關(guān)性研究:本試驗(yàn)以6個(gè)雜交組合為試驗(yàn)材料,研究發(fā)現(xiàn)不同組合的加工番茄小孢子各個(gè)發(fā)育時(shí)期所對(duì)應(yīng)的花蕾、花藥大小也有所不同,當(dāng)花藥為2-3mm時(shí)花粉處在四分孢子時(shí)期;花藥長(zhǎng)度在4-5mm時(shí)花粉處在單核中期,花藥長(zhǎng)度在6-7mm時(shí)花粉處在單核靠邊期,因不同組合花蕾的萼片長(zhǎng)度具有差異性,花藥作為小孢子發(fā)育時(shí)期的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)更準(zhǔn)確。2、預(yù)處理對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率的影響:通過(guò)對(duì)6個(gè)雜交組合的加工番茄花藥預(yù)處理的研究表明:低溫處理2d的效果較好;因基因型不同高溫預(yù)處理2d或6d的效果較好;離心預(yù)處理因組合不同差異性較大。甘露醇預(yù)處理的整體效果要好于低溫、高溫和離心預(yù)處理。不同的預(yù)處理方式對(duì)不同基因型的預(yù)處理效果不一致,因此不同品種可以選擇不同的預(yù)處理方式。3、不同添加物對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率的影響:利用不同添加物對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率進(jìn)行研究,篩選合適的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配比�；ㄋ庪x體培養(yǎng)條件為處理29(MS+0.1g/L活性炭+1.0mg/L NAA+2.0mg/L ZT+1.0mg/L 6-BA+0.25mg/L Ag NO3+30g/L蔗糖+10g/L葡萄糖+80ml/L椰汁)時(shí),6個(gè)雜交組合的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率都比較好,是最優(yōu)培養(yǎng)基配比。當(dāng)為處理8(MS+0.1mg/L NAA+1.5mg/L KT+3.0mg/L ZT+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L Ag NO3+10g/L蔗糖+10g/L葡萄糖)和處理32(MS+0.1g/L活性炭+1.0mg/L NAA+1.5mg/L KT+1.0mg/L ZT+0.5mg/L Ag NO3+20g/L葡萄糖+30g/L麥芽糖+40ml/L椰汁)時(shí),可使5個(gè)雜交組合達(dá)到較高的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率,也是很好的培養(yǎng)基配比。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)加工番茄花藥不同外源物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑混合配比的研究,發(fā)現(xiàn)不僅同一組合在不同處理下花藥組織誘導(dǎo)率不同,即使在同一處理下不同組合的花藥組織誘導(dǎo)率也不同。4、加工番茄花藥離體培養(yǎng)中花藥發(fā)育的細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)觀察:通過(guò)對(duì)加工番茄花藥小孢子發(fā)育全過(guò)程的研究,發(fā)現(xiàn)加工番茄花藥離體培養(yǎng)過(guò)程中小孢子的分裂途徑有三種:多核花粉途徑、均等分裂途徑、非均等分裂途徑。通過(guò)形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)形成的花藥愈傷組織有4種類型:一是生長(zhǎng)速度緩慢,顏色呈綠色,圓形塊狀或粒狀;二是生長(zhǎng)旺盛,顏色呈白色,質(zhì)地松軟;三是生長(zhǎng)速度較緩慢,顏色深綠色,形狀呈扁平狀,質(zhì)地較堅(jiān)硬;四是胚性愈傷組織生長(zhǎng)較旺盛,顏色呈鮮黃色,質(zhì)地松脆。將四種類型的愈傷組織進(jìn)行鏡檢發(fā)現(xiàn)形成4種愈傷組織細(xì)胞:A:細(xì)胞染色深,細(xì)胞緊密排列在一起;B:細(xì)胞染色深,細(xì)胞排列較松散;C:細(xì)胞染色很淺,細(xì)胞排列的更加緊密;D:細(xì)胞染色較淺,細(xì)胞排列的相對(duì)疏松。
【學(xué)位單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2016
【中圖分類】：S641.2
【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文對(duì)照表
引言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 單倍體的特征
    1.2 單倍體產(chǎn)生的途徑
        1.2.1 細(xì)胞和組織離體培養(yǎng)
        1.2.2 遠(yuǎn)緣雜交
        1.2.3 染色體消除
        1.2.4 化學(xué)藥物誘導(dǎo)
        1.2.5 其他方式
    1.3 單倍體在育種上的應(yīng)用價(jià)值
        1.3.1 縮短育種年限
        1.3.2 克服遠(yuǎn)緣雜交中的不親和性
        1.3.3 提高誘變育種的效率
        1.3.4 合成育種的新材料
    1.4 花藥離體培養(yǎng)的目的與意義
    1.5 花粉發(fā)育成完整植株的途徑
        1.5.1 愈傷組織誘導(dǎo)形成完整的植株
        1.5.2 胚狀體誘導(dǎo)形成完整的植株
    1.6 影響花藥培養(yǎng)的因素
        1.6.1 植株生長(zhǎng)條件和生理狀態(tài)對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.2 植株基因型對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.3 藥壁因子對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.4 小孢子發(fā)育時(shí)期對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.5 預(yù)處理方式對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.6 培養(yǎng)基種類對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.7 接種密度對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
        1.6.8 愈傷組織類型對(duì)花藥培養(yǎng)的影響
    1.7 問(wèn)題與展望
        1.7.1 存在的問(wèn)題
        1.7.2 展望
第二章 加工番茄小孢子發(fā)育時(shí)期與花蕾和花藥相關(guān)性研究
    2.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
    2.2 試驗(yàn)藥品配制
        2.2.1 醋酸洋紅染液的配制
        2.2.2 苯酚品紅染液的配制
    2.3 材料與方法
        2.3.1 試驗(yàn)材料
        2.3.2 試驗(yàn)方法
    2.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    2.5 結(jié)果與分析
        2.5.1 醋酸洋紅染液和苯酚品紅染液的篩選
        2.5.2 不同加工番茄花蕾大小與小孢子發(fā)育時(shí)期對(duì)應(yīng)關(guān)系的觀察
        2.5.3 不同加工番茄花藥發(fā)育特征與小孢子發(fā)育時(shí)期對(duì)應(yīng)關(guān)系的觀察
        2.5.4 加工番茄小孢子發(fā)育時(shí)期與花蕾外部形態(tài)的關(guān)系
        2.5.5 加工番茄小孢子發(fā)育時(shí)期與花藥外部形態(tài)的關(guān)系
    2.6 討論
第三章 預(yù)處理對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率的影響
    3.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
    3.2 材料與方法
        3.2.1 試驗(yàn)材料
        3.2.2 試驗(yàn)方法
    3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 低溫預(yù)處理對(duì)6個(gè)加工番茄雜交組合愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        3.4.2 高溫預(yù)處理對(duì)6個(gè)加工番茄雜交組合愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        3.4.3 離心預(yù)處理對(duì)6個(gè)加工番茄雜交組合愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        3.4.4 甘露醇預(yù)處理對(duì)6個(gè)加工番茄雜交組合愈傷組織誘導(dǎo)的影響
    3.5 討論
第四章 不同添加物對(duì)加工番茄花藥愈傷組織誘導(dǎo)率的影響
    4.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
    4.2 材料與方法
        4.2.1 試驗(yàn)材料
        4.2.2 試驗(yàn)方法
    4.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
    4.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與數(shù)據(jù)處理
    4.5 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        4.5.1 不同添加物對(duì)雜交組合1愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.2 不同添加物對(duì)雜交組合2愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.3 不同添加物對(duì)雜交組合3愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.4 不同添加物對(duì)雜交組合4愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.5 不同添加物對(duì)雜交組合5愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.6 不同添加物對(duì)雜交組合6愈傷組織誘導(dǎo)的影響
        4.5.7 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)32組處理對(duì)6個(gè)雜交組合愈傷組織誘導(dǎo)的影響
    4.6 討論
第五章 加工番茄花藥離體培養(yǎng)中花藥發(fā)育的細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)觀察
    5.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
    5.2 材料與方法
        5.2.1 試驗(yàn)材料
        5.2.2 試驗(yàn)方法
    5.3 試驗(yàn)結(jié)果與分析
        5.3.1 加工番茄花藥離體培養(yǎng)過(guò)程中小孢子發(fā)育過(guò)程的細(xì)胞學(xué)觀察
        5.3.2 加工番茄花藥離體培養(yǎng)過(guò)程中愈傷組織的形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)觀察
    5.4 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師審閱表

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本文編號(hào)：2866005