發(fā)布時(shí)間：2020-04-29 14:24

【摘要】：月季(Rose hybrida)原產(chǎn)于中國(guó),是世界四大鮮切花之一。隨著月季產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,月季消費(fèi)者的要求也日趨多樣化,但月季傳統(tǒng)的雜交育種方式由于其技術(shù)本身局限性和原始品種遺傳背景較為狹窄的限制使得其在對(duì)月季品種內(nèi)在品質(zhì)的改良已很難取得突破。現(xiàn)代分子育種技術(shù)可以有針對(duì)性把優(yōu)良的目的基因快速的轉(zhuǎn)入受體植物,從而達(dá)到改良其內(nèi)在品質(zhì)的目的。正因?yàn)槠浼夹g(shù)的針對(duì)性和高效性,分子育種技術(shù)在月季的育種領(lǐng)域?qū)l(fā)揮著不可取代的重要作用。本實(shí)驗(yàn)以‘蜜桃雪山月季’(Rose.‘Peach Avalanche’)、‘雪山月季’(Rosa.‘Avalanche’)和‘粉佳人月季’(Rosa.‘Nirvana’)的帶芽莖段和葉片作為外植體,通過(guò)研究多組植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑組合處理對(duì)月季腋芽萌發(fā)和葉片愈傷組織誘導(dǎo)的影響,研究了不同侵染時(shí)間與共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)月季愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響,并對(duì)轉(zhuǎn)化完成后的抗性愈傷組織進(jìn)行了選擇擴(kuò)繁的初步探索。本研究結(jié)果如下:1.通過(guò)不同激素配比培養(yǎng)基誘發(fā)‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的帶芽莖段的腋芽萌發(fā)實(shí)驗(yàn)得出‘蜜桃雪山’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;‘雪山’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;‘粉佳人’腋芽萌發(fā)最適培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L。2.以‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的無(wú)菌葉片和離體葉片作為外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),在培養(yǎng)基為MS+2,4-D 4.0 mg/L時(shí),其愈傷組織誘導(dǎo)率均最高。其中無(wú)菌小葉的愈傷組織誘導(dǎo)率明顯高于離體葉片的愈傷組織誘導(dǎo)率,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’無(wú)菌小葉的愈傷組織誘導(dǎo)率最高分別達(dá)到94.64%、97.78%和89.58%。3.研究了不同侵染時(shí)間和共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的月季愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化效率的影響。結(jié)果顯示,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的愈傷組織均在侵染時(shí)間為25 min時(shí),共培養(yǎng)時(shí)間為3 d,GUS瞬時(shí)表達(dá)效率最高,分別為79.26%、69.33%和65.27%。4.通過(guò)降低選擇培養(yǎng)基中Hyg和Cef的濃度獲取了具有生理活性的抗性愈傷組織。‘蜜桃雪山’和‘雪山’獲取的具有HygB抗性的陽(yáng)性愈傷組織在MS+2,4-D2.0 mg/L+Hyg 10 mg/L+Cef 250 mg/L的培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng),且恢復(fù)了生理活性。
【圖文】：

技術(shù)路線圖

圖3-1月季腋芽萌發(fā)Fig.3-1Roseaxillarybudgermination注：A.部分葉片未展開(kāi)就發(fā)黃枯萎；B,C.正常生長(zhǎng)的葉片；D.莖段中部出現(xiàn)少量愈傷組織；
【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S685.12

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2644674