發(fā)布時(shí)間：2024-04-03 02:35

　　為探究溫度和亞硝酸鹽對(duì)草魚(yú)(ctenopharyngodon idellus)組織細(xì)胞的應(yīng)激作用及其細(xì)胞水平的反應(yīng)機(jī)理,本文進(jìn)行了以下三個(gè)方面的研究：(1)溫度對(duì)草魚(yú)腎細(xì)胞(CIK)的氧化與抗氧化指標(biāo)及抗氧化物酶相關(guān)基因表達(dá)水平的影響；(2)亞硝酸鹽對(duì)草魚(yú)離體血細(xì)胞的胞內(nèi)氧化及抗氧化指標(biāo)、血紅蛋白及高鐵血紅蛋白含量、及抗氧化物酶相關(guān)基因表達(dá)水平的影響;(3)亞硝酸鹽對(duì)草魚(yú)離體肝細(xì)胞的抗氧化物酶活性的影響。 在研究(1)中采用的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞為來(lái)自華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院的CIK傳代細(xì)胞。在研究(2)和(3)中采用體質(zhì)量為(65.8±5.5)g的草魚(yú)幼魚(yú)為材料,在無(wú)菌條件下提取草魚(yú)血細(xì)胞并制備離體肝細(xì)胞,設(shè)置3個(gè)亞硝酸鹽暴露組(1.0mg/L、10.0mg/L、100.0mg/L)和1個(gè)空白對(duì)照組(0mg/L組),各實(shí)驗(yàn)組設(shè)置3個(gè)重復(fù),離體血細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分別暴露0h、3h、6h、12h、24h,離體肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分別暴露0h、6h、12h、24h、48h、96h。研究結(jié)果如下： 1.溫度對(duì)草魚(yú)腎細(xì)胞的氧化應(yīng)激水平的影響 在急性溫度變化下,無(wú)論升高溫度4℃或者降低溫度4℃都會(huì)導(dǎo)致胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平發(fā)生改變,這...

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 溫度和亞硝酸鹽對(duì)水生動(dòng)物的抗氧化系統(tǒng)和組織器官的影響
    1.2 氧化應(yīng)激的產(chǎn)生與活性氧對(duì)水生動(dòng)物的影響
    1.3 氧化應(yīng)激與水生動(dòng)物的非特異性免疫反應(yīng)
    1.4 氧化應(yīng)激對(duì)水生動(dòng)物基因表達(dá)水平的作用機(jī)制及其影響
    1.5 研究目的與意義
第二章 溫度對(duì)草魚(yú)腎細(xì)胞的氧化應(yīng)激水平的影響
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 草魚(yú)腎細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.2 草魚(yú)腎細(xì)胞的處理
        2.2.3 活性氧的檢測(cè)
        2.2.4 線粒體跨膜電位的檢測(cè)
        2.2.5 抗氧化相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)
        2.2.6 蛋白質(zhì)及脂質(zhì)氧化損傷的檢測(cè)
        2.2.7 抗氧化物酶基因表達(dá)的定量PCR檢測(cè)方法
    2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 溫度對(duì)CIK細(xì)胞內(nèi)活性氧的影響
        2.4.2 氧化損傷指標(biāo)
        2.4.3 抗氧化物酶活性
        2.4.4 氧化還原狀態(tài)
        2.4.5 抗氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄水平
    2.5 討論
第三章 亞硝酸鹽對(duì)草魚(yú)血細(xì)胞的氧化應(yīng)激水平的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 離體血細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        3.2.3 血細(xì)胞內(nèi)活性氧的檢測(cè)
        3.2.4 血細(xì)胞線粒體跨膜電位的檢測(cè)
        3.2.5 血細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)
        3.2.6 血細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)損傷水平及血紅蛋白和高鐵血紅蛋白的檢測(cè)
        3.2.7 血細(xì)胞內(nèi)抗氧化物酶基因表達(dá)的定量PCR檢測(cè)方法
    3.3 數(shù)據(jù)處理
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞的活性氧的影響
        3.4.2 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞的氧化損傷狀態(tài)指標(biāo)的影響
        3.4.3 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白和高鐵血紅蛋白含量的影響
        3.4.4 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞內(nèi)抗氧化相關(guān)酶活的影響
        3.4.5 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)指標(biāo)的影響
        3.4.6 亞硝酸鹽對(duì)血細(xì)胞內(nèi)抗氧化物酶基因表達(dá)的影響
    3.5 討論
第四章 亞硝酸鹽暴露對(duì)草魚(yú)離體肝細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 離體肝細(xì)胞的獲取
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        4.2.3 肝細(xì)胞內(nèi)抗氧化相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)
    4.3 數(shù)據(jù)處理
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的超氧化物歧化酶的影響
        4.4.2 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的過(guò)氧化氫酶的影響
        4.4.3 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的乳酸脫氫酶的影響
        4.4.4 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的影響
        4.4.5 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影響
        4.4.6 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的谷胱甘肽的影響
        4.4.7 亞硝酸鹽對(duì)離體肝細(xì)胞的總抗氧化能力的影響
    4.5 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3946586