發(fā)布時間：2024-03-24 16:50

　　在哺乳動物中,白介素6(IL-6)是一個具有廣泛生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子,它在免疫系統(tǒng),神經(jīng)系統(tǒng),肝臟的再生以及代謝調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用。IL-6發(fā)揮生理作用必須先結(jié)合其專一性受體(IL-6R),再結(jié)合第二個受體gp130形成三聚體,進(jìn)而起始胞內(nèi)信號。雖然IL-6及其受體的功能在哺乳動物免疫系統(tǒng)中已廣泛研究,但在硬骨魚中,這方面的研究還比較缺乏。本論文以草魚為模型,以重組表達(dá)草魚IL-6蛋白為工具,研究IL-6R的性質(zhì)以及它在炎癥中扮演的角色。同時,由于IL-6R存在著跨膜和可溶胞外區(qū)兩種形式,本論文還重組表達(dá)了IL-6R的可溶性胞外區(qū)(s IL-6R),并對其異于膜形式的性質(zhì)進(jìn)行了探索。本研究用畢赤酵母真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)了草魚IL-6蛋白,并對其活性進(jìn)行驗證;同時克隆得到了草魚IL-6R全長cDNA序列,該序列全長2223 bp,其中ORF共1785 bp,編碼594個氨基酸。多序列比對顯示草魚IL-6R的氨基酸序列與其他物種的一致性僅有38.03%-45%。組織分布結(jié)果表明IL-6R mRNA在頭腎中的表達(dá)量最高;本研究用原核表達(dá)和變復(fù)性的方法獲得了草魚sIL-6R蛋白;制備和驗證了草...

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1IL-6受體系統(tǒng)

第一章緒論合進(jìn)而達(dá)到中和IL-6的目的。只有當(dāng)IL-6的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大度，IL-6才能發(fā)揮其應(yīng)有的功能。根據(jù)最新的報道，當(dāng)，而sIL-6R的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于IL-6時，能夠阻斷IL-6的sIL-6R結(jié)合然后形成復(fù)合物，最后被sgp130中和[44形式存在....

圖1-1IL-6信號轉(zhuǎn)導(dǎo)圖

圖1-1IL-6信號轉(zhuǎn)導(dǎo)圖IL-6及IL-6R的研究現(xiàn)狀I(lǐng)L-6研究概述第一個具有先天性免疫和獲得性免疫系統(tǒng)的物種，與和淋巴結(jié)；并且硬骨魚具有獨特的免疫器官，頭腎。與哺乳動物相比獨特而有趣。細(xì)胞因子是構(gòu)成免疫系疫細(xì)胞的通訊中發(fā)揮著重要作用。而IL-6是一類非....

圖2-1pPICZa質(zhì)粒圖譜

第二章草魚IL-6蛋白的重組表達(dá)第二章草魚IL-6蛋白的重組表達(dá)實驗材料.1實驗動物、菌株和質(zhì)粒實驗動物：購買于成都通威水產(chǎn)公司的草魚，體重約為1kg。本論文所有驗均按照四川省實驗動物管理條例的要求和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。實驗菌株：JM109，畢赤酵母X33，均由實驗室保....

圖2-2畢赤酵母表達(dá)草魚IL-6單克隆挑選

的草魚IL-6蛋白和從草魚HKL細(xì)胞提取的總蛋白樣品，上樣GE凝膠電泳。電泳結(jié)束后進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，而后進(jìn)行封閉，封閉結(jié)束后組IL-6蛋白預(yù)吸附后的抗體作為一抗進(jìn)行孵育，另一張膜用未進(jìn)行抗體作為一抗進(jìn)行孵育，一抗孵育結(jié)束后進(jìn)行二抗孵育，以及顯影驗結(jié)果獲得草魚IL-6蛋白....

本文編號：3937754