本研究以馬氏珠母貝（Pinctada martensii）為研究對(duì)象，利用本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的珍珠囊轉(zhuǎn)錄組和植核后6個(gè)時(shí)期珍珠囊的數(shù)字基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)庫(kù)。從中篩選出熱休克蛋白基因和Toll樣受體基因的Unigene片段。應(yīng)用cDNA末端快速擴(kuò)增（RACE）技術(shù)從馬氏珠母貝外套膜中克隆了熱休克蛋白60基因（PmHSP60）、熱休克蛋白90基因（PmHSP90）、Toll樣受體4基因（PmTLR4）、Toll-like protein基因（PmTLP）的cDNA序列全長(zhǎng)，對(duì)其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。并分析了四個(gè)基因的組織表達(dá)及在應(yīng)激后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)。結(jié)果如下： 1.四個(gè)免疫基因cDNA全長(zhǎng)的獲取及其序列分析：PMHSP60基因cDNA全長(zhǎng)為2495bp，開(kāi)放閱讀框?yàn)?734bp。PmHSP90基因cDNA全長(zhǎng)為2584bp，開(kāi)放閱讀框?yàn)?160bp，編碼719個(gè)氨基酸。PmTLR4基因cDNA全長(zhǎng)3138bp，開(kāi)放閱讀框2697bp，編碼899個(gè)氨基酸。PmTLP基因cDNA全長(zhǎng)為2214bp，其中開(kāi)放閱讀框?yàn)?043bp，編碼681個(gè)氨基酸。同源性比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)，PmHSP60和PmHSP90與其...

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1TLR的兩種結(jié)構(gòu)

熱休克蛋白60家族也是一個(gè)具有高度保守性的基因家族。在真核生物細(xì)胞中，主要存在線粒體，可以作為伴侶蛋白分子參與蛋白質(zhì)的折疊以及亞細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)。近年來(lái)的研究表明，熱休克蛋白60也可作為一個(gè)危險(xiǎn)信號(hào)作用于天然免疫系統(tǒng)。通過(guò)激活單核白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞,并誘導(dǎo)產(chǎn)生一系列....

圖1-2Toll樣受體信號(hào)通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor

圖1-2Toll樣受體信號(hào)通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor在海洋動(dòng)物在各個(gè)門(mén)中，很多TLRs已被確定（附錄Ⅰ[97]）。在軟體動(dòng)物eguen等人在太平洋牡蠣的EST序列中發(fā)現(xiàn)三個(gè)與TLR通路信號(hào)分子（MyDAF....

圖2-1pMD19-TVector克隆位點(diǎn)示意圖

圖2-1pMD19-TVector克隆位點(diǎn)示意圖Fig.2-1SketchmapofpMD19-TVectorcloningsites)轉(zhuǎn)化將將連接好的產(chǎn)物加入到已在冰上溶解的含100μLDH5α感受態(tài)細(xì)胞的管子輕吹打均勻；冰上放置30min（此時(shí)....

圖2-23.RACE原理(引自Clontech技術(shù)手冊(cè))

143'RACE第一輪PCR以上述合成的cDNA第一鏈（for3’RACE）為模板，利用GSP-3’outer引物的通用引物（UniversalPrimerAMix，UPM)進(jìn)行PCR反應(yīng)。1)PCR反應(yīng)體系：PremixTaq7.5μLcDNA第....

本文編號(hào)：3898628