肌肉生長抑制素（myostatin，MSTN）是動物肌肉發(fā)育和生長過程中的負調(diào)控因子，可影響?zhàn)B殖動物的產(chǎn)肉量，近年來頗受動物遺傳育種研究者的重視。淇河鯽(Carassius auratus in Qihe river)是在長期的生態(tài)適應過程中形成的變異地方性種群之一，為河南特色優(yōu)質(zhì)魚類。本實驗以淇河鯽肌肉總RNA為模板，利用RT-PCR和RACE的方法，獲得了淇河鯽肌肉生長抑制素MSTN基因全長cDNA序列；采用實時定量PCR分析MSTN基因在淇河鯽肌肉、腦、心臟、肝臟、腎臟、肝臟、腸道和脾臟8個組織的表達情況；通過石蠟切片的制作和觀察對淇河鯽、錦鯉、草魚和鰱魚4種鯉科魚背部肌肉組織進行比較分析。 1、淇河鯽MSTN基因cDNA全長的克隆。 從淇河鯽背部肌肉中克隆得到的3個重疊片段，測序后拼接得到2094bp(NO.KC851952)全長cDNA序列，其中包含了5’端非翻譯區(qū)的86個核苷酸、3’端非翻譯區(qū)的880個核苷酸和開放性閱讀框的1128個核苷酸，共翻譯編碼375個氨基酸，其中前22個氨基酸為淇河鯽MSTN的信號肽。淇河鯽MSTN具有MSTN的共同特征，有蛋白酶水解位點RIRR在...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語中英文對照
第一章 前言
    1.1 淇河鯽的研究綜述
        1.1.1 淇河鯽的研究背景和意義
        1.1.2 淇河鯽的研究概況
        1.1.3 淇河鯽資源保護與增殖
        1.1.4 存在的問題和發(fā)展建議
    1.2 MSTN 基因
        1.2.1 MSTN 基因的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 MSTN 基因的結(jié)構
        1.2.3 MSTN 基因的作用機制
        1.2.4 MSTN 基因的研究前景
    1.3 魚類 MSTN 基因
        1.3.1 魚類 MSTN 基因的結(jié)構和表達類型
        1.3.2 魚類 MSTN 基因的研究現(xiàn)狀
    1.4 本研究的內(nèi)容及目的意義
    1.5 本研究的特色與創(chuàng)新
第二章 淇河鯽 MSTN 基因的克隆
    2.1 材料
        2.1.1 實驗用魚
        2.1.2 載體和菌種
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 組織取樣及總 RNA 提取
        2.2.2 第一鏈 cDNA 合成
        2.2.3 淇河鯽 MSTN 基因 cDNA 全長的克隆
    2.3 實驗結(jié)果與分析
        2.3.1 Total RNA 的質(zhì)量檢測
        2.3.2 淇河鯽 MSTN 基因序列全長
        2.3.3 淇河鯽 MSTN 基因 cDNA 相關分析
    2.4 討論
第三章 淇河鯽 MSTN 基因組織特異性表達
    3.1 材料
        3.1.1 實驗用魚
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 試劑配制
    3.2 方法
        3.2.1 組織取樣及總 RNA 提取
        3.2.2 第一鏈 cDNA 合成
        3.2.3 淇河鯽 MSTN 基因?qū)崟r定量 PCR
    3.3 實驗結(jié)果與分析
        3.3.1 Total RNA 的質(zhì)量檢測
        3.3.2 引物驗證結(jié)果
        3.3.3 實時定量 PCR 結(jié)果
        3.3.4 淇河鯽 MSTN 基因組織特異性表達分析
    3.4 討論
第四章 四種鯉科魚背部肌肉組織學比較
    4.1 材料
        4.1.1 實驗用魚
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
        4.1.4 試劑配制
    4.2 方法
        4.2.1 形態(tài)指標測量
        4.2.2 背部肌肉切片制作
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 形態(tài)指標數(shù)據(jù)
        4.3.2 四種鯉科魚背部肌纖維數(shù)目統(tǒng)計及相關分析
    4.4 討論
小結(jié)
參考文獻
致謝
攻讀學位期間學術業(yè)績
    一、發(fā)表文章
    二、參加學術會議



本文編號：3851899